湿热质大鼠血液流变特性的研究

徐艺筝，邹 明

(四川省骨科医院，四川 成都 610041)

中医体质较早见于《皇帝内经》，从阴阳、气血、津液虚实盛衰，体质的能量亏虚、病理产物相关等不同方面强调不同体质与不同的环境因素有关，与疾病的发生、发展有密切关系。现今以王琦九种中医体质分类最具代表性，其认为体质是一种客观存在的生命现象，在先天遗传和后天获得的基础上，表现出的形态结构、生理机能以及心理状态等方面综合的、相对稳定的特质[1]。湿热质为常见偏颇体质之一，在人群中比例较高[2，3]。其形成因素主要有先天禀赋、久居湿地、嗜食肥甘、长期饮酒等[1]。随着气候、生活水平等变化，越来越多的人过食肥甘厚腻，嗜好烟酒，情绪紧张，出现形盛体实，湿热蕴积，但目前对体质的评判主要依据主诉、四诊等来收集信息，存在主观、随意的缺点[4]，尚未建立客观有效指标。本文参考中医体质的成因，以脾胃湿热实验动物造模方法进行造模[5～7]，观察其血液流变学变化，以发现界定湿热质方便快捷的实验指标。

1 材料与方法

1.1 动物分组与造模于2014年12月至2016年9月选择4周龄SPF级SD雄性大鼠16只，购于四川省达硕生物技术有限公司，许可证编号：SCXK(111)2013-24。采用随机数字表法将其分为湿热质组和对照组各8只，两组基础体重、体温、腹围、体长无差异，分笼饲养。对照组在自然环境下普通饲料喂养。湿热质组大鼠参考中医湿热质成因，通过增加动物生活环境的温度和湿度，制造“外湿”；过食肥甘的方法损伤脾胃，阻碍运化，制造“内湿”，复制湿热质动物模型[7]。采用普通标准颗粒饲料中混入12%猪油，8%蜂蜜制作高脂高糖饲料，饲养10天后，放入人工气候箱内，其湿热环境为温度(32±2)°，相对湿度(95±2)%，仍用高脂高糖饲料喂养每日饲养10 h，进行造模。鼠粮投放时间为每日早8：30至晚18：30。饮用水(本院纯净水)始终足量供应。造模干预时间为28 d，依据方肇勤的方法[6]判断并成功造模。

1.2 方法造模完成后，用10%水合氯醛按0.15 ml/100 g对大鼠进行腹腔注射麻醉，心脏穿刺取血。乙二胺四乙酸二钾(EDTA.2k)抗凝管采集2 ml全血，2小时内使用日本希森美康XN1000血细胞计数仪进行全血细胞计数测定，获得红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均血红蛋白量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞压积(HCT)及红细胞分布宽度(RDW-CV)。肝素抗凝管采集全血4 ml，4小时内使用北京赛科希德SA-6000血流变仪进行血液流变学指标测定，获得切变率(1/s)为1(rt1)、5(rt5)、50(rt50)、100(rt100)、200(rt200)的全血粘度，血浆粘度(xjnd)、全血高切相对指数(gqxd)、全血低切相对指数(dqxd)、全血低切还原粘度(dqhy)、全血高切还原粘度(gqhy)、红细胞聚集指数(hjj)、红细胞刚性指数(hgx)、红细胞变形指数(htk)。每7 d观察1次大鼠体表特征，测量1次大鼠体重、摄食量、饮水量、抓力，体温及抓力，于28天造模结束后比较两组结果差异。体温以测定大鼠肛温表示，连续测2次，取平均值。抓力测试方法为将抓力测试仪水平放置，大鼠轻轻放在抓力板上，抓住鼠尾轻轻往后拉，带大鼠抓牢抓力板后均匀用力后拉，直到大鼠松爪，记录大鼠最大抓力，重复测量3次，每次间隔30秒，取3次平均值。每日测量剩余食/水量，食/水量均值=(投放量-剩余量)/大鼠只数。

1.3 统计学方法采用SPSS 17.0软件进行数据统计分析。正态分布的计量资料以均数±标准差表示，组间数据比较采用独立样本t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组主要症状及体征比较湿热质组大便有时稀溏、有时湿便有黏液；小便黄浊；毛色发暗杂乱、颈背部毛色发红；外阴红肿；尾巴肛门肮脏；舌质暗红，舌苔厚腻；腹部胀满；肛门周围脏；应急排便。而对照组舌质粉红；舌苔淡白；活跃；毛色白亮、整洁；反应灵敏；大小便正常。湿热质组饮食、饮水量、抓力较对照组减少，体重及体重增幅较对照组高；两组体温、腹围和体长比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组主要症状、体征变化比较

2.2 两组血液流变指标变化湿热质组低切全血粘度rt1、rt5、hjj、dqhy高于对照组(P<0.05)，hgx、htk较对照组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 湿热质与对照组血液流变学指标比较

项目湿热质组对照组tPgqxd3.59±0.623.99±0.28-1.6620.119dqxd31.48±10.0829.24±1.920.6150.549hjj8.13±0.907.35±0.372.2850.037dqhy(mPa.S)90.42±12.2980.05±5.192.1990.045gqhy(mPa.S)7.81±0.788.46±0.61-1.8530.085hgx6.31±1.357.57±0.79-2.2840.038htk0.97±0.111.07±0.06-2.3450.034

2.3 两组血常规指标变化湿热质组MCHC、MCH较对照组明显下降(P<0.05)，RBC、HGB、HCT、MCV、RDWSD两组比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 湿热质组与对照组血液学指标比较

3 讨论

湿热质在偏颇体质中居于前三位[2，3]，约占正常人群的 9.88%[8]，湿热之邪，不但可由外而感，且可自内而生。湿热质大鼠，大便有时稀溏、有时湿便有粘液、毛色发暗杂乱、舌质暗红、舌苔厚腻等体征与王琦等[2]对人体的研究一致。而吕冠华等通过给予实验大鼠高脂高糖饮食，损伤大鼠脾胃，发现在短期内湿热大鼠体重增加，饮食减少，精神萎靡，也与本研究一致。高脂高糖饮食过量摄入，干扰了机体正常的糖、脂代谢，使得大鼠体重明显增加，出现肥胖之体，祖国医学素有“肥人多湿”的观点，而脂质代谢与气血津液的运行和代谢过程密切相关[9]，肥胖者因为其机体聚集浊脂，影响脏腑经脉，妨碍气血运行，甚至影响脏腑功能[10]。大鼠高脂高糖的饮食使得能量代谢异常，内生湿热，而湿浊内生，郁而化热，湿热质与体重具有较强的关联性，其湿热内蕴[11，12]，多形体偏胖。脾胃虚弱为湿热前提[5]，过食肥甘致脾胃损伤，使得水谷精微难以生成精血，气血津液失于运化，致湿热质大鼠乏力，抓力下降。而体温、腹围和体长等体征也与吕冠华等[5]研究一致。

湿热质者血脂代谢紊乱的概率高[13]，为血脂异常的危险因素[9，14]。湿热质大鼠摄入过多脂质，可使大鼠体内脂质增加，诱发脂质过氧化及生成自由基中间物，进而破坏内皮的完整性损伤血管内皮[15]，引起血管扩张功能减弱，血管可痉挛或狭窄，血流阻力增加而致全血粘度增加。湿热质大鼠通过高脂饲料喂养，终使红细胞膜的液态特性的脂质双层受到影响，膜的力学性质改变，膜流动性下降，变形性(htk)下降，与熊延连等[16]发现脂质过氧化对红细胞变形性的研究一致。而变形性好坏又决定了血液的流动性，变形性降低，血液流动性变小，可使红细胞的微粘度增加，影响氧的弥散，又进一步降低红细胞变形性。加之摄入过多脂质，使血液脂质浓度增加，增加了血液粘度。Htk受红细胞内粘度影响非常大，而红细胞内粘度受MCHC、MCH的影响[17]，湿热质大鼠MCHC、MCH的降低，表明其红细胞内粘度增加，变形性下降。Htk还受hgx的影响，hgx越大，红细胞硬化程度越高，红细胞变形性越差。但湿热质大鼠hgx下降，与罗超等[18]对刚性指数与变形指数的研究不一致，可能与湿热质大鼠对外湿环境的适应性改变有关。

湿热质大鼠在湿度和温度增加的外湿条件下生活，可通过对外界的适应性反应，代谢和激素水平等内环境发生相应改变。其红细胞变形能力减低，血流变慢，流量减少，影响组织和器官的血液供应，使红细胞在微血管易于瘀积。湿热质大鼠hjj明显增加，表明红细胞聚集性增加，可使低切变率全血粘度增加，致红细胞运送氧的能力受影响，红细胞通过微循环障碍，进一步减小微循环血流灌注，造成组织缺血缺氧，使得红细胞内粘度增高，影响变形性。而组织缺血缺氧可影响局部pH值的变化，使毛细血管通透性增加，血浆渗出，微血管中血液浓缩，可影响机体HCT，而HCT是影响血液粘度的主要决定因素，在湿热质大鼠中，其HCT、RBC等均未有明显改变，但湿热质大鼠经HCT校正后的dqhy却明显增加，表明机体低切变率全血粘度明显增加主要受到hjj、hgx、htk、MCHC、MCH对红细胞变形性和聚集性的影响，与大鼠过食高脂高糖肥甘食物及在一定温度和湿度的环境中生活的“内外湿”有关。湿热质大鼠红细胞变形性降低，聚集性增加又进一步使血液粘度增高，形成恶性循环，使得全身或局部血液循环和微循环受到影响，加重组织器官缺血缺氧，引起新陈代谢和生理功能障碍，致湿浊内停、血行滞涩，机体产生湿热等病理物质而留滞不去，久而久之在人体内蓄积，血液湿性重浊黏滞，又与热相合，则胶结难解影响机体健康。

综上所述，祖国医学在疾病治疗中强调标本兼治，突出辨体论治，治人即“治体”，辨识体质在疾病诊疗中极为重要。湿热质大鼠血液流变特性异常是在实验室极易获得的测试指标，可作为识别中医湿热体质定量、客观判断的早期辅助指标。但本课题研究是在动物模型中进行，尚需在大样本的人群中观察后进行临床应用。