普洱端午药市当归几种混伪品药材的组织比较研究

李剑美 管丽佳 赵 芳 周明敏 赵 锋

1.普洱学院农林学院，云南 普洱 665000；2.普洱学院生化学院，云南 普洱 665000

当归[Angelicasinensis(Oliv.) Diels]，属于伞形科植物，多年生草本植物，主要生产在甘肃东南部，岷县的产量多，质量好，其次为云南、四川、陕西、湖北等省。

普洱端午药市是一年一度民族药膳药材盛会，市场上约有136的药材[1],常见的药膳药材65种[2]，其中文献记载有毒中草药19种[3]。“大卢山当归”为当地主要特色、道地和药膳药材，“卢山当归鸡”是远近闻名的一味药膳。笔者在走访普洱市其他县区时发现，其他县区端午集市也常有“归”类药材，多数以“当归”为名，均为伞形科植物，外形较为相似。

1 材料与方法

1.1 实验材料 收集端午药市以“归”为名的药材，共收集24份当归混伪品(每种药材收集3份)，经DNA鉴定分别为紫花前胡[Angelicadecursiva.(Mip.)Franch]、辽藁本[Ligusticumjeholense(Nakai et Kitagawa) Nakai et Kitagawa] 石防风[Peucedanumterebinthaceum(Fisn.)Fisch]、藁本(LigusticumacuminatumOliv)、拐芹(AngelicapolymorphaMaxim)、滇芹(MeeboldiayunnanensisWollf)、川明参(ChuanminshenviolaceumSheh et Shan)、藁本(LigusticumacuminatumOliv)。材料信息见表1。

按照《中国药典》规定的方法，将待测样品按照归头、归身和归尾切成厚20～40 μm的横切片，并用CaseViewer来观察和测量“当归”药材的归头、归身、归尾的木栓层、皮层、韧皮部、木质部的厚度和油室的大小、面积、数量以及分泌细胞的数量。选取代表性显微制片拍照。

表1 材料信息表

2 结果分析

2.1 8种“归”药材横切面以及不同部位的细胞简图 比较8种“当归”的细胞简图(见附图1-8)，在细胞简图中的字母表示为：ck-木栓层、c-皮层、cle-裂隙、oca-油室、ph-韧皮部、cam-形成层、x-木质部、1-树脂道。

附图1，墨江大叶当归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其中韧皮部极其宽广，且伴有裂隙的存在。油室主要分布在韧皮部与木质部中，数目较多，分泌细胞数量在6～10个之间，归头中存在少量树脂道，归身和归尾中没有树脂道的分布。

图1 墨江大叶当归

附图2，墨江矮归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其中韧皮部相对宽广，细胞相对紧致，仅归头中存在少量裂隙，油室主要分布于皮层、韧皮部与木质部中，且数目较多，分泌细胞的数量在8～12个之间，在归身韧皮部中存在大量的树脂道。

图2 墨江矮归

附图3，墨江栽培当归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部比较宽广，细胞结构松散，存在较多的裂隙，油室主要分布于韧皮部，且数量较少，分泌细胞的数量在6～15个之间，且归身中无油室存在，细胞中没有树脂道的分布。

图3 墨江栽培当归

附图4，墨江野生当归归头呈不规则形状，归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部比较宽广，细胞结构松散，存在较多裂隙，油室主要分布于皮层、韧皮部与木质部中，且数量较多，分泌细胞的数量在5～11个之间，细胞中无树脂道的分布。

图4 墨江野生当归

附图5，澜沧当归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部相对宽广，细胞结构松散，存在较多裂隙，油室主要分布于皮层和韧皮部中，且数量中等，但其归头的木质部中也存在一些油室，分泌细胞的数量在5～11个之间，细胞中无树脂道的分布。

附图6，西盟当归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部相对宽广，归头细胞紧致无裂隙存在，但归身与归尾的细胞结构松散，存在较多的裂隙，油室主要分布于韧皮部，数量较多，但其归头的木质部中也存在油室，分泌细胞的数量在4～7个之间，细胞中无树脂道的分布。

图5 澜沧当归

图6 西盟当归

附图7：大芦山当归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部相对宽广，细胞结构松散，存在大量的裂隙，其油室主要分布于皮层、韧皮部与木质部中，,数量较多，分泌细胞的数量在5～12个之间，细胞中无树脂道分布。

附图8，镇沅秦归归头、归身与归尾皆呈圆柱形，且归头横切面>归身横切面>归尾横切面。组织切片由外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层、木质部，其韧皮部较为宽广，细胞结构松散，存在大量的裂隙，其油室主要分布于归尾韧皮部中，且数量较少，其归头、归身中皆无油室，分泌细胞的数量在5～7之间，细胞中无树脂道分布。

图7 大芦山当归

图8 镇沅秦归

8种不同地方的“归”药材，横切面外至内可分为木栓层、皮层、韧皮部、形成层和木质部，韧皮部相对宽广，均有油室和分泌细胞。树脂道仅见于墨江大叶当归和墨江矮归中。 因此单从组织结构上不能将8种“归”药材鉴别开来，需要做8种“归”药材的显微数量比较。

2.2显微组织切片的数量比较分析

2.2.1不同部位的木栓层厚度比较 见表2。

表2 8种“当归”药材木栓层厚度的比较

注意：同列相同字母表示差异不显著，同列不同字母表示差异显著(下同)。

以某一指标条件下的两个物种显著差异为分支点，建立8种“当归药材”的检索路径如下：

1.归头木栓层厚度大于等于127 μm

2

1.归头木栓层厚度小于127 μm

3

2.归身木栓层厚度大于等于101 μm

墨江野生当归

2.归身木栓层厚度小于101 μm 西盟当归

3.归头木栓层厚度为66 μm以下

澜沧当归

3.归头木栓层厚度为66～91 μm

4

4.归身木栓层厚度大于等于139 μm

墨江大叶当归

4.归身木栓层厚度小于139 μm

5

5.归身大于木栓层厚度大于等于77 μm

墨江矮归

5.归身大于木栓双层厚度小于77 μm

6

6.归身大于木栓层厚度大于等于66 μm

大芦山当归

6.归身大于木栓层厚度小于66 μm

7

7.归尾大于木栓双层厚度大于30 μm

墨江栽培当归

7.归尾大于木栓层厚度大于30 μm

镇沅秦归

综上，以木栓层厚度显微数量为鉴定依据，可以鉴别8种“当归”药材，由此木栓层可作为独立的鉴定点。

2.2.2 不同部位的皮层厚度比较 见表3。

以皮层厚度指标下的两个物种显著差异为分支点，建立8种“当归药材”的检索路径如下：

1.归头皮层厚度大于113 μm

墨江栽培当归

1.归头皮层厚度小于113 μm

2

2.归尾皮层厚度大于34 μm

3

2.归尾皮层厚度小于34 μm

墨江野生当归

3.归尾皮层厚度大于56 μm

4

3.归尾皮层厚度小于56 μm

墨江大叶当归

4.归头皮层厚度大于68 μm

5

4.归头皮层厚度小于68 μm

澜沧当归

5.归尾皮层厚度大于78 μm

墨江矮归

综上，以木栓层厚度显微数据为鉴定依据时，只可以鉴别出墨江栽培当归、墨江野生当归、墨江大叶当归、澜沧当归和墨江矮归，其他3种当归的皮层厚度极其相近，无法进行鉴别。由此皮层厚度不可作为独立的鉴定点。

2.2.3 不同部位的韧皮部厚度比较 见表4。

1.归头韧皮部厚度大于6748 μm

墨江大叶当归

1.归头韧皮部厚度小于6748 μm

2

2.归头韧皮部厚度大于3015 μm

墨江栽培当归

2.归头韧皮部厚度小于3015 μm

3

3.归头韧皮部厚度大于1456 μm

大芦山当归

3.归头韧皮部厚度小于1456 μm

4

4.归头韧皮部厚度大于1301 μm

5

4.归头韧皮部厚度小于1301 μm

6

5.归身韧皮部厚度大于1945 μm

镇沅秦归

5.归身韧皮部厚度小于1945 μm

墨江野生当归

6.归身韧皮部厚度大于1705 μm

墨江矮归

6.归身韧皮部厚度小于1705 μm

7

7.归身韧皮部厚度大于625 μm

澜沧当归

7.归身韧皮部厚度小于625 μm

西盟当归

综上，以韧皮部的显微数据为鉴定依据，可以鉴别8种“当归”药材，由此韧皮部可作为独立的鉴定点。

表3 8种“当归”药材皮层厚度的比较

表4 8种“当归”药材韧皮部厚度的比较

2.2.4 不同部位木质部厚度比较 见表5。

1.归头木质部厚度大于5901 μm

墨江栽培当归

1.归头木质部厚度小于5901 μm

2

2.归头木质部厚度大于4813 μm

墨江大叶当归

2.归头木质部厚度小于4813 μm

3

3.归头木质部厚度大于1875 μm

大芦山当归

3.归头木质部厚度小于1875 μm

4

4.归头木质部厚度大于1281 μm

5

4.归头木质部厚度小于1281 μm

6

5.归身木质部厚度大于1968 μm

墨江矮归

5.归身木质部厚度小于1968 μm

7

6.归头木质部厚度大于1166 μm

澜沧当归

6.归头木质部厚度小于1166 μm

镇沅秦归

7.归身木质部厚度大于668 μm

墨江野生当归

7.归身木质部厚度小于668 μm

西盟当归

综上，以木质部的显微数据为鉴定依据，可以鉴别8种“当归”药材，由此木质部可作为独立的鉴定点。

2.2.5 不同部位的油室面积比较 见表6。

1.归头油室面积大于7834π μm

墨江矮归

1.归头油室面积小于7834π μm

2

2.归头油室面积大于1186π μm

3

2.归头油室面积小于1186π μm

西盟当归

3.归身油室面积大于5033π μm

4

3.归身油室面积小于5033π μm

5

4.归尾油室面积大于2936π μm

墨江大叶当归

4.归尾油室面积小于2936π μm

墨江野生当归

5.归身油室面积大于2413π μm

6

5.归身油室面积小于2413π μm

澜沧当归

6.归身有油室

大芦山当归

6.归身无油室

7

7.归头有油室

墨江栽培当归

7.归头无油室

镇沅秦归

综上，以木质部的显微数据为鉴定依据，可以鉴别8种“当归”药材，由此木质部可作为独立的鉴定点。

在普洱药材市场上流通着的8种“当归”中，墨江矮归的归身中存在大量的树脂道，墨江大叶当归的归头中有少量的树脂道，通过检索表检索，可以从木栓层、韧皮部、木质部、油室面积这四个方面确定当归的物种，皮层检索表只可鉴别出部分，要想鉴别出其他还需要其他的辅助手段。

表5 8种“当归”药材木质部厚度的比较

表6 8种“当归”药材油室面积的比较

3 结论与讨论

当归作为普洱当地主要的一味药膳食材，在“端午药市”上同物异名，同名异物的现象非常普遍，严重干扰了当归药材的秩序。市场流通的“当归”都是伞形科的植物块根,分属于当归属(2种)、藁本属(4种)、川明参属(1种)、滇芹属(1种)。《中国药典》[4]收录的有藁本、辽藁本、紫花前胡3种。藁本、辽藁本有祛风，散寒，除湿，止痛。用于风寒感冒，巅顶疼痛，风湿痹痛。紫花前胡当归属植物，降气化痰，散风清热。用于痰热喘满，咯痰黄稠，风热咳嗽痰多。川明参属只有1种，特产于中国，根入药，为利肺、和胃、化痰、解毒的作用[5]。滇芹属只产1种，产于云南，主治感冒风寒，发热头痛[5]。正品当归为当归属当归植物，能补血活血，调经止痛，润肠通便，用于经闭。痛经，风湿痹痛，跌打损伤。

伞形科植物多数可入药，花小、形态差异小，因此彼此之间互为混伪品的现象较为普遍，石防风常作为前胡的混伪品[6]。同科同属植物的显微结构很类似，因此显微数量差异比较分析是近缘属种鉴别的主要依据，如李剑美[7]利用显微数量的差异鉴别了兰科白及及其混伪品。

本文以某一指标条件下的两个物种显微数量显著差异为分支点，利用平行检索表鉴别“当归”药材，在观察分析的5个指标中，除皮层厚度不能鉴别外，其余的木栓层厚度、韧皮部厚度、木质部厚度、油室面积4个指标都可以鉴别8种药材。但是其方法有一定的局限性，例如生长周期、生育期、地理环境都都会受到一定程度的影响。因此还应以油室的数量，分布的区域，树脂道的有无作为鉴别8种“当归”药材的辅助手段。