急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3水平与预后的关系

张子豪 王昌生 黎 雄 钟业腾

急性胰腺炎是常见的急腹症之一，具有起病急、病情进展快等特点，若不及时救治，预后往往较差，甚至导致患者死亡[1-2]。若能及时了解影响急性胰腺炎患者预后的危险因素，采取对症治疗，将极大改善患者的预后情况，降低病死率。目前，临床上鲜有准确度较高的生物学指标用以预判急性胰腺炎的预后。锌指蛋白转录抑制因子3(PRDM3)是PRDM家族成员之一，在造血、细胞分化及凋亡方面发挥着重要作用[3-4]。有研究表明，PRDM3在正常胰腺腺泡细胞中低表达，但在慢性胰腺炎患者的胰腺组织中呈高表达；急性胰腺炎小鼠的胰腺组织中PRDM3表达升高，且与胰腺炎性反应有关[5]。由此推测，检测急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3的表达水平或可预判患者预后情况。本文对此展开研究，以探究急性胰腺炎的预后标志物。

1 资料与方法

1.1 一般资料

前瞻性选取2016年5月至2020年1月在海南省东方市东方医院接受治疗的311例急性胰腺炎患者作为研究对象。患者均参照《中国急性胰腺炎诊治指南(2013年，上海)》[6]中的标准确诊。纳入标准：(1)年龄>18岁；(2)入组前未接受相关治疗；(3)能够配合完成研究；(4)签署了知情同意书。排除标准：(1)伴自身免疫性疾病；(2)心、肝、肾功能严重异常；(3)伴心、脑血管疾病；(4)有长期免疫抑制剂服药史；(5)有恶性肿瘤。本次研究中男性222例，女性89例，年龄为35～68岁，平均年龄为(50.26±7.34)岁。根据急性胰腺炎患者治疗后28 d的预后情况将其分为2组：生存组265例，死亡组46例。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 临床信息收集

收集受试者的年龄、性别、体质量指数(BMI)、吸烟史、急性胰腺炎病因(酒精性、胆源性、高脂血症性)、脂肪酶、血钙、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)、急性胰腺炎严重程度床边指数(BISAP)及入院28 d内死亡情况等信息。

1.3 外周血单个核细胞中PRDM3水平检测

分别于急性胰腺炎患者入组当日及治疗3 d时抽取空腹肘部静脉血10 mL，采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞[7]。采用蛋白质印迹法检测单个核细胞中PRDM3的表达水平，具体如下：RIPA裂解液裂解单个核细胞，分离出蛋白，采用BCA法进行蛋白定量；10% SDS-PAGE分离胶电泳至溴酚蓝跑出胶面，转膜，5%脱脂牛奶室温封闭1 h；一抗，4 ℃孵育过夜；二抗，室温孵育2 h；ELC显影。使用ImageJ软件读取灰度值[8]。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 两组的基本资料比较

两组在年龄、性别、BMI、吸烟史、病因、WBC和CRP方面比较，差异均无统计学意义(P均>0.05)。生存组血钙水平高于死亡组，而脂肪酶水平、APACHEⅡ评分和BISAP评分均低于死亡组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1 两组的基本资料比较

2.2 两组外周血单个核细胞中PRDM3水平比较

两组治疗前PRDM3水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗3 d后PRDM3的相对表达量均较治疗前降低，且生存组PRDM3的相对表达量低于死亡组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表2和图1。

表2 两组PRDM3的相对表达量比较()

图1 两组PRDM3的蛋白电泳图

2.3 PRDM3诊断急性胰腺炎患者预后的效能分析

治疗3 d后PRDM3诊断急性胰腺炎预后的ROC曲线下面积(AUC)大于治疗前PRDM3和APACHEⅡ评分，差异均有统计学意义(Z=7.454，P<0.001；Z=2.820，P=0.005)。治疗3 d后PRDM3诊断急性胰腺炎预后的AUC大于BISAP评分，但差异无统计学意义(Z=1.951，P=0.051)。见表3和图2。

表3 各指标诊断急性胰腺炎的效能比较

图2 各指标诊断急性胰腺炎预后的ROC曲线

2.4 影响急性胰腺炎患者预后的危险因素分析

将急性胰腺炎患者预后作为因变量，将可能影响急性胰腺炎预后的指标，包括血钙、脂肪酶、APACHEⅡ评分、BISAP评分和治疗3 d后PRDM3作为自变量纳入Logistic回归分析模型，结果显示血钙是急性胰腺炎预后的独立保护因素(P<0.05)，而APACHEⅡ评分、BISAP评分和治疗3 d后PRDM3是急性胰腺炎预后的独立危险因素(P<0.05)。见表4。

表4 影响急性胰腺炎患者预后的危险因素分析

3 讨论

近年来，中国急性胰腺炎的发病率呈升高趋势，病死率为5%～10%[9]。探究急性胰腺炎患者预后的影响因素不仅可指导临床治疗，还对患者的预后评估有着重要意义。基于Ye等[5]的研究结论，推测急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3的表达水平与患者的预后有关。本研究比较了生存组与死亡组外周血单个核细胞中PRDM3的表达水平，结果显示生存组治疗3 d后PRDM3的相对表达量低于死亡组，提示治疗3 d后PRDM3的表达水平可能与患者预后有关，或可评价预后情况。

既往研究表明，APACHEⅡ评分、BISAP评分在重症急性胰腺炎预后评估中具有较高价值，尤其适用于发病至救治时间短于3 d的重症急性胰腺炎患者[10]。APACHEⅡ评分在临床上常用于评价急性胰腺炎患者的病情和预后情况[11]。BISAP评分可用于评价急性胰腺炎患者病情的严重程度，并在评价全身并发症、器官衰竭及死亡方面具有较高价值[12]。本研究构建了APACHEⅡ评分、BISAP评分和治疗3 d后PRDM3评价急性胰腺炎患者预后的ROC曲线，结果显示治疗3 d后PRDM3诊断急性胰腺炎预后的AUC、敏感度和特异度分别为0.885、86.96%和80.00%，其诊断效能与BISAP评分相当，两者的诊断效能均高于APACHEⅡ评分，上述结果提示治疗3 d后的PRDM3在急性胰腺炎患者预后评估中具有一定价值。

田阿各等[13]研究表明，血钙是急性胰腺炎患者预后的独立保护因素，而APACHEⅡ评分是急性胰腺炎患者预后的独立危险因素。王辉等[14]研究亦证实，APACHEⅡ评分是急性胰腺炎患者预后的独立危险因素。此外，安园[15]指出APACHEⅡ评分和BISAP评分均是急性胰腺炎预后的独立危险因素。本文采用多因素Logistic回归方法分析影响急性胰腺炎患者预后的相关因素，结果显示血钙是急性胰腺炎预后的独立保护因素，而APACHEⅡ评分和BISAP评分是急性胰腺炎预后的独立危险因素，与上述研究结果一致。本研究结果显示，治疗3 d后PRDM3水平与急性胰腺炎患者预后不良有关，推测其原因可能是急性胰腺炎患者的PRDM3表达水平升高，参与了炎性反应及胰腺腺泡细胞稳态调节，因此PRDM3水平可反映机体的炎性反应情况及胰腺损伤情况，进而反映患者的预后情况。

综上所述，急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3水平与患者预后有关，检测其水平有助于预后评估。本研究因样本量偏小，且为单中心研究，分析结果可能存在一定偏倚，下一步将开展大样本、多中心研究，以验证本研究结论。