70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油中有效成分含量测定

2021-03-02阚晓丽张茜曹磊单言昊

生物化工 2021年1期

阚晓丽，张茜，曹磊，单言昊

（江苏省产品质量监督检验研究院，江苏南京 210007）

异丙甲草胺，化学名称2-乙基-6-甲基-N-(1’-甲基-2’-甲氧乙基)氯代乙酰基苯胺，属于酰胺类选择性除草剂[1]。异噁草松，化学名称2-(2-氯苄基)-4,4-二甲基异恶唑-3-酮，是有机杂环类选择性苗前除草剂，适用于防除大豆、花生、玉米等作物田的一年生禾本科杂草和阔叶杂草[1-2]。2,4-滴异辛酯，化学名称2,4-二氯苯氧乙酸异辛酯，是一种激素类选择性苗后茎叶处理触杀型除草剂，替代常用的2,4-滴丁酯，安全性好，可减少对周边敏感作物漂移药害[3-4]。该复配产品比单剂产品防除效果更优。本文旨在建立气相色谱法，测定70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油产品中有效成分的含量，对企业自身的质量把关提供依据，便于进行快速准确的检测。

1 材料与方法

1.1 仪器及试剂

Agilent 7890 A型气相色谱仪，具有氢火焰离子化检测器，美国安捷伦公司生产； XS105DU型电子分析天平，METTLE TOLEDO；KQ-300E超声清洗仪，昆山市超声仪器有限公司。

邻苯二甲酸二正戊酯，分析纯，国药化试；三氯甲烷，分析纯，国药化试；2,4-滴异辛酯标样（纯度95.3%）、异噁草松标样（纯度97.3%）、异丙甲草胺标样（纯度97.0%），国家农药质量监督检验中心（沈阳）；70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油由江苏长青生物科技有限公司提供。

1.2 色谱条件

色谱柱：HP-5，30 m×0.32 mm×0.25 μm毛细管柱；温度：柱温200 ℃（运行15min）、气化室290 ℃、检测室300 ℃；气体流速：载气（N2）2.0 mL/min、氢气（H2）40 mL/min、空气 400 mL/min；保留时间：内标物邻苯二甲酸二正戊酯约8.6 min，异噁草松约3.2 min，异丙甲草胺约5.5 min，2,4-滴异辛酯约10.0 min。

1.3 实验步骤

1.3.1 内标物溶液的配制

称取邻苯二甲酸二正戊酯约2.5 g（精确至0.000 2 g）置于250 mL容量瓶中，用三氯甲烷溶解、定容、摇匀。

1.3.2 标样溶液的配制

准确称取异丙甲草胺标样0.101 0 g（精确至0.000 2 g）、异噁草松标样0.035 6 （g精确至0.000 2 g）、2,4-滴异辛酯标样0.049 2 g（精确至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，移取10 mL内标物溶液，超声溶解，摇匀，静置备用。（异丙甲草胺标样浓度为9.7mg/mL、异噁草松标样为3.46 mg/mL、2,4-滴异辛酯标样浓度为4.69 mg/mL）

1.3.3 样品溶液的配制

称取0.25 g试样（精确至0.000 2 g）置于25 mL容量瓶中，加入10 mL内标物溶液，摇匀备用。

1.3.4 测定

在“1.2”操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入两针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻两针的相对响应值变化小于1.0%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定，按照此顺序，可以减少系统误差。

1.3.5 计算

将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液中异丙甲草胺（异噁草松、2,4-滴异辛酯）的峰面积与内标物峰面积之比分别进行平均，其各自的质量分ω1（%）按公式（1）计算[2]。

式（1）中，r1为标样溶液中，异丙甲草胺（异噁草松、2,4-滴异辛酯）与内标物峰面积比的平均值；r2为试样溶液中，异丙甲草胺（异噁草松、2,4-滴异辛酯）与内标物峰面积比的平均值；m1为异丙甲草胺（异噁草松、2,4-滴异辛酯）标样的质量，g；m2为试样的质量，g；ω为标样中异丙甲草胺（异噁草松、2,4-滴异辛酯）质量分数，%。

1.4 方法学验证

1.4.1 线性关系

采用已知含量的异丙甲草胺、异噁草松和2,4 滴异辛酯标样分别配制成5个已知浓度的梯度混合标样溶液（浓度见表1），以异丙甲草胺、异噁草松和2,4-滴异辛酯与内标物质量比为横坐标，以异丙甲草胺、异噁草松和2,4-滴异辛酯与内标物峰面积比为纵坐标，绘制异丙甲草胺、异噁草松和2,4-滴异辛酯含量测定线性关系图，并进行线性回归获取线性方程和相关系数。

表1 混合标样浓度表

1.4.2 精密度

对同一70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油试样，按照上述分析方法，连续进行5次平行测定，分别计算有效成分含量、平均值及相对标准偏差。

1.4.3 回收率

按照配方比例要求，将除原药以外的所有助剂按制剂同样比例混匀，作为制剂空白。在一定量的制剂空白中添加异丙甲草胺标样、异噁草松标样和2,4-滴异辛酯标样，合成5个组成与70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油相似的模拟试样，作为准确度试验样品溶液，再按照上述分析方法进行测定，通过准确度试验溶液中各有效成分的测得值和实际添加值计算回收率[5-6]。

2 结果与讨论

2.1 线性关系

线性关系结果如图1～3所示，异丙甲草胺线性方程为y=0.887x+0.000 1，线性范围内相关系数r为0.999 9；异噁草松线性方程为y=0.822 6x-0.001 7，线性范围内相关系数r为0.999；2,4-滴异辛酯线性方程为y=0.830 4x+0.000 5，线性范围内相关系数r为1，均大于0.99，表明该分析方法线性关系良好。

图1 异丙甲草胺含量测定线性关系图

图2 异噁草松含量测定线性关系图

图3 2,4-滴异辛酯含量测定线性关系图

2.2 精密度

精密度试验结果列于表2，结果表明3种有效成分色谱定量分析方法精密度均能满足定量分析要求。

表2 精密度测试结果

2.3 回收率

该检测方法加标回收率实验结果如表3所示。结果表明，在添加设计的五个浓度模拟溶液中，回收率均在98%～101%，满足NY/T2887-2016农药产品质量分析方法确认指南中制剂有效成分分析的回收率要求，表明该分析方法准确度良好[5-6]。

表3 加标回收率测定结果

2.4 样品测定结果

对70%异丙甲草胺·异噁草松·2,4-滴异辛酯乳油供试样品按照本文所述试验方法对其有效成分进行检测，标样及样品的气相图谱如图4所示。测得数值及计算结果见表4（峰面积及称样量表，表中数字1为异噁草松标样，含量为97.3%；2为异丙甲草胺标样，含量为97.0%；3为2,4-滴异辛酯，含量为95.3%）和表5（含量测定结果表），结果表明，该检测方法具有操作简便及快速准确的特点。