30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂高效液相色谱分析

2021-03-02余德勉张常庆王丹斌万娜娜王陈杰

农药科学与管理 2021年1期

余德勉，张常庆，王丹斌，万娜娜，王陈杰

(上海悦联生物科技有限公司，上海 201215)

氟吡菌胺[1]是德国拜耳作物科学公司开发的新型吡啶酰胺类杀菌剂，主要用于防治各类蔬菜和葡萄上的常见卵菌纲病害，如霜霉病、疫病、晚疫病、猝倒病等，具有保护和光谱治疗作用。氰霜唑[1]是日本石原产业株式会社开发，为磺胺咪唑类杀菌剂，属于保护性杀菌剂，对霜霉病，疫病，根肿病，猝倒病等有特效。对卵菌纲真菌如霜霉菌、假霜霉菌、疫霉菌、腐霉菌以及根肿菌纲的芸苔根肿菌具有很高的生物活性。

氟吡菌胺和氰霜唑的单剂或其他复配制剂的分析方法已有报道[2-6]，但30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂复配制剂的分析方法还未见报道。本文采用反相高效液相色谱法，采用C18不锈钢柱和紫外可变波长检测器，对30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂(15%+15%)中有效成分氟吡菌胺和氰霜唑同柱分析和定量，此方法快速、简便、准确、灵敏度高、重现性好的特点，适用于产品质量的检测和分析。

1 试验操作

1.1 仪器与试剂电子天平(梅特勒AL-204)、高效液相色谱仪(岛津SPD-20A)、超声清洗机；甲醇、乙腈、氟吡菌胺标样、氰霜唑标样、30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂。

甲醇：色谱纯；乙腈：色谱纯；水：二次重蒸蒸馏水；氟吡菌胺标样：已知氟吡菌胺含量≥98.0%；氰霜唑标样：已知氰霜唑含量≥98.0%。高效液相色谱仪：具紫外可变波长检测器；色谱柱：Φ4.6mm×150mm不锈钢柱，内装Kromasil C18/5μm为填充料的不锈钢柱。

1.2 分析条件 Φ4.6mm×150mm不锈钢柱，内装Kromasil C18/5μm为填充料的不锈钢柱，流动相为(甲醇：乙腈：水=35：35：30)混合溶液，流量：1.0mL/min，柱温：室温(温差变化≤2℃)，检测波长215nm，进样体积：20μL，保留时间：氟吡菌胺约5.0min，氰霜唑约7.0min。

1.3 标准溶液配制称取氟吡菌胺标样0.05g和氰霜唑标样0.05g(精确到0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，加乙腈超声振荡5min使样品溶解，冷却至室温定容，摇匀；再用移液管准确吸取5～50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀。

1.4 试样溶液配制称取含0.05g氟吡菌胺或0.05g氰霜唑(精确到0.000 2g)样品，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，超声振荡5min使试样溶解，冷却至室温，摇匀，用移液管准确吸取5～50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，过滤。

1.5 有效成分测定在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻2针的响应值变化<1.5%后，按照标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液的顺序进行测定。30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂测试中标样和试样溶液的典型色谱图(图1、图2)。

图1 30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂标样色谱图

图2 30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂试样色谱图

1.6 结果计算将测得的2针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中的峰面积分别进行平均，试样中氟吡菌胺(氰霜唑)的质量分数X(%)分别按式(1)计算：

式中：

A1—标样溶液中氟吡菌胺(氰霜唑)峰面积的平均值；

A2—试样溶液中氟吡菌胺(氰霜唑)峰面积的平均值；

m1—氟吡菌胺(氰霜唑)标样的质量，g；

m2—试样的质量，g；

P—标样中氟吡菌胺(氰霜唑)的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 流动相和波长选择首先对30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂中有效成分氟吡菌胺、氰霜唑在DAD条件下做紫外吸收扫描(图3)，(图3)并结合分析中助剂杂质干扰因素，选定检测波长为215nm。在甲醇、乙腈、水中调节比例，将氟吡菌胺和氰霜唑进行有效分离，同时避免助剂和杂质干扰，最后确定为甲醇：乙腈：水=35：35：30作为流动相，在此条件下对30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂中氟吡菌胺、氰霜唑峰纯度扫描。30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂中氟吡菌胺、氰霜唑的峰纯度均>99.9%，30%氟吡菌胺·氰霜唑悬浮剂中氟吡菌胺、氰霜唑中有效成分出峰位置无明显物质干扰，符合定量分析要求。