新生儿溶血病筛查结果分析

俞建飞，王丽叶，郭婷婷

（苏州大学附属太仓医院，江苏 太仓 215400）

0 引言

新生儿溶血病（HDN）是指因母婴血型不合引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病，主要临床表现为高胆红素血症，严重的可导致患儿高胆红素脑病从而造成智力低下甚至死亡[1]。临床上发生HDN主要为母婴ABO血型不合引起，即母亲血型为O型，患儿血型为A型或B型。其次为Rh血型系统，其他血型系统如Kell、Duffy、Kidd等也有发生，但较为少见[2]。本研究主要针对ABO血型系统发生的HDN进行阐述与分析。发生ABO血型不合的HDN其发病机理为当母亲血型为O型而新生儿血型为A、B型时，因胎儿血液可以通过胎盘进入母体，胎儿的红细胞抗原进入母体时因母亲体内无相应抗原而发生免疫反应，从而母体内产生相应抗体，该类抗体属于IgG类抗体，可以通过胎盘进入胎儿体内，作用于胎儿红细胞导致发生免疫性的溶血反应[3]。多数的患儿临床表现为黄疸、贫血，严重的可有肝脾肿大甚至死亡。新生儿溶血病筛查包括直接抗人球蛋白试验、血浆游离试验、红细胞抗体释放试验三项血清学检测[4]。本研究回顾性分析本院2018年1月至2019年12月收治的344例O型母亲产A、B型新生儿，对新生儿溶血三项血清学结果和其他影响因素进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2019年12月送至我科的344例高胆红素血症且母亲为O型患儿为A、B型的患儿，平均年龄为（3.49±4.37）d，其中男性169例，女性175例，对所有患儿血液进行溶血病三项检测，标本采取EDTA-K2抗凝静脉血2 mL。

1.2 仪器与试剂

试剂均采用长春博讯的反定型红细胞、ABO-Rh血型卡和抗人球蛋白检测卡、BX-1型样本释放剂及配套的FYQ型免疫微柱孵育器和TD-3A型血型血清学离心机。

1.3 试验方法

本试验采用酸放散试验，操作流程按《全国临床检验操作规程》和试剂说明书进行。将ABO标准红细胞与抗体筛选细胞配置成比例为0.8%～1.0%的红细胞悬液放置待用，对母婴取EDTA抗凝全血，1kg离心力离心5min，再对母体的血液样本进行ABO血型与RhD血型的鉴定与抗体的筛选实验。对于新生儿的血液样本，将其血浆与压积红细胞进行分离，配置成比例为0.8%～1.0%的红细胞悬液，再把配置剩余的压积红细胞洗涤3次，放置待用。将溶血病受检抗人球蛋白卡的6孔进行标记，依次分别为FAC/BC、FOC、EAC/BC、EOC、AC/BC、OC，其中EAC/BC、EOC为释放试验孔，FAC/BC、EAC/BC为添加新生儿同血型标准红细胞对应的受检孔，FOC、EOC为添加O血型标准红细胞的不规则抗体对照孔，AC/BC、OC为标准红细胞试剂的对照孔。

1.3.1 游离试验

将0.8%A/B型标准红细胞50μL分别加入相应的孔中，并且在FAC/BC、FOC中分别加入新生儿的血浆各50μL。

1.3.2 释放试验

将上述放置待用的压积红细胞与数量相等的酸放散液一起混合后轻轻摇匀，放置保温室保存1～2min，再将1kg离心力离心1min后，迅速将上清液移至另一处干净的试管里，混入1～2滴中和液，将放散液加入EAC/BC、EOC孔中，分量为50μL，完成后将卡片置入恒温孵育器中，时长为15min，再放入离心机中离心5min，用直观肉眼观测结果。

1.3.3 新生儿的血型鉴定与直抗实验

采集新生儿的血型样本卡片1张，在A-B-AB-Dctl-AHG的每个孔中都分别加入新生儿的红细胞悬液，比例为0.8%～1.0%，放置于离心机中离心5min，结果可以直接用肉眼观测判定。

1.4 结果判读

游离试验、释放试验均阴性可排除HDN，释放试验阳性即可判定为HDN、三项中有两项阳性可确诊为HDN、仅游离试验阳性或直接抗人球试验阳性为不确定。

1.5 统计学方法

用SPSS 20.0软件对所统计的研究数据进行处理和分析，计量资料用均数±标准差（）表示，采用t检验，计数资料用率（%）表示，采用χ2检验，如果P＜0.05，则说明差异有统计学有意义。

2 结果

2.1 新生儿溶血三项血清学结果

HDN患儿检出阳性244例，检出率为70.9%，见表1。

表1 新生儿溶血三项血清学结果（n,%）

2.2 新生儿HDN 不同血型的检出率

O-A阳性率为74.1%，O-B阳性率为67.8%，见表2。

表2 新生儿HDN 不同血型的检出率（n,%）

2.3 HDN患儿与其他高胆红素患儿胆红素结果分析

将HDN患儿与其他高胆红素患儿胆红素结果分析，HDN患儿的总胆红素与直接胆红素均高于非HDN高胆红素患儿，见表3。

表3 HDN 患儿与其他高胆红素患儿胆红素结果分析（±s,μmol/L）

表3 HDN 患儿与其他高胆红素患儿胆红素结果分析（±s,μmol/L）

3 讨论

新生儿溶血病患病的主要原因就是母婴之间的Rh血型与ABO血型的不适合，新生儿的血型是由父母血型决定的，如果新生儿父亲所拥有的血型抗体是母亲所没有的，那么其抗体通过遗传至新生儿身上的话，就会引起新生儿与母亲之间产生相对应的抗体，这些遗传的抗体再经由胎盘进入到新生儿身体内，会造成免疫反应的降低，从而发生溶血现象[5]。新生儿Rh溶血病是由于母亲血液中对于新生儿体内的红细胞免疫抗体IgG由胎盘进入到新生儿的血液循环中，使免疫抗体发生一系列不良反应，导致引起溶血性疾病，会对新生儿的红细胞造成破坏[6]。ABO溶血病则是母亲与新生儿产生溶血病中最常见的一种，主要原因是母亲血型为O型，而新生儿血型为A型或B型，其发病原因主要是因为新生儿通过胎盘接受了母体的同族免疫抗体而发病，导致发病的条件也有母体曾有异种抗原刺激的过往病史，从而产生了相对应的免疫抗体，而其抗体通过胎盘进入到胎儿的体内，使胎儿对其抗体产生免疫敏感性而得病[7]。

新生儿溶血的具体临床表现为：①黄疸：患有黄疸的新生儿如果是Rh血型不合的话，在出生后的24h内皮肤会呈现明显的黄染，并且情况会随之加重，如果是ABO血型不合的新生儿，部分会在出生后的24h内呈现出来，但是也有部分会在出生后的48h内才呈现出来，在新生儿黄疸症状展现的同时，新生儿体内的血清胆红素水平指标也会在短时间内迅速上升[8]；②贫血：新生儿发生黄疸症状与黄疸消退后都有很大的可能会出现贫血，其主要原因是由于当新生儿产生溶血时，体内大量的红细胞会被破坏，Rh溶血患者会发生较为严重的贫血现象，并且会出现肝脾大或者心力衰竭等严重的并发症，而ABO溶血患者则有一半的概率会出现贫血状态[9]；③核黄疸：主要形成原因是新生儿患有严重的高胆红素血症从而致使急性胆红素脑病的发生，其临床表现为听力障碍、智力及运动发育障碍、手足徐动和牙釉质发育不良等[10]。新生儿与新生儿红细胞均会被母体的lgG抗体所影响，并会在新生儿的单核-巨噬细胞系统内受到免疫性的破坏，引发不同程度的病情，病情严重的胎儿会出现宫内死亡的现象，对新生儿溶血病患者实行血清学检测可以有效提高诊断率，使其尽早接受治疗，降低新生儿后遗症与并发症的发生。对于新生儿溶血病的血清学检测主要包含三项实验，分别是游离抗体实验、抗球蛋白实验与红细胞抗体释放试验，其中游离抗体试验主要是检测新生儿血清中所含的血型抗体，当检测出相关抗体和新生儿体内的红细胞产生反应时，游离抗体试验结果为阳性，反之则为阴性，此项检查项目有利于对新生儿溶血病情的发展趋势进行观察监督[11]。抗球蛋白试验主要是检测新生儿体内的红细胞是否有免疫抗体的存在，但是由于新生儿血型抗体的密度相比于成年人来说较低，所以能够相互结合的抗体也比较少，有部分ABO溶血病新生儿的直抗会呈现为弱阳性，甚至还会呈现为阴性。红细胞抗体释放试验是先采用特定的方法将新生儿体内红细胞的抗体进行释放，对释放液中的抗体进行检测，当在释放液中检测出相应的抗体，并且又能在红细胞上检测到相应的抗体时，结果就是阳性[12]。根据本次研究报告可以看出，对新生儿溶血病进行血清学检测是发现与诊断新生儿患病最直接有效的方法，在目前所拥有的医学治疗方法下，新生儿溶血病有很大概率可以尽早发现与治疗，关键在于能否及时对新生儿溶血病的早期进行识别与干预，血清学检查对于新生儿溶血病的诊断具有很大的临床意义，对于新生儿溶血病患儿来说，应该尽早接受血清学检查，尽早确诊病情与严重程度，可以及时实施治疗，对新生儿的身体健康有积极意义。

综上所述，新生儿溶血病筛查三项血清学检查结果对于溶血病的早期诊断与治疗具有重要的积极意义，可以作为诊断的重要依据，值得推广与应用于临床诊断中。