术前血清肿瘤标志物水平对浸润性膀胱癌根治术后生存率的预测价值*

张姝越 刘吉文 蒋鑫 黄婷 文杨

(中国人民解放军西部战区总医院泌尿外科，四川 成都 610000)

膀胱癌是发生于膀胱黏膜的泌尿系恶性肿瘤，其临床病理类型包括膀胱尿路上皮癌、鳞状细胞癌、腺癌等[1]。膀胱尿路上皮癌是最常见的膀胱癌，根据其侵犯黏膜的深度可分为肌层浸润性膀胱癌(Muscle invasive bladder cancer，MIBC)和非肌层浸润性膀胱癌(Non-muscle invasive bladder cancer，NMIBC)[2]。目前，MIBC是指肿瘤穿透黏膜层浸润到肌层，临床主要采用膀胱切除根治术进行治疗，但术后复发转移率较高，预后较差[3]。寻找新的能够预测MIBC预后生存的分子标志物，正确评估MIBC患者的病情具有重要意义。因此，本研究分析了术前血清肿瘤标志物血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、血清趋化因子配体5[Chemokine(C-X-C motif)ligands，CXCL5]和基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9，MMP9)的表达对MIBC患者根治术后生存的影响，旨在明确其在MIBC预后中的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年11月～2015年11月在本院行膀胱癌根治术的82例MIBC患者。纳入标准：①经手术病理组织学确诊为MIBC。②均获得患者及其家属知情同意，经医院医学伦理委员会审核。排除标准：①并发其它恶性肿瘤者。②合并明显肝肾功能不全、心、脑血管疾病者。③合并精神系统疾病者。另选择同期在该院体检的41名健康者为健康对照组。

1.2 试剂与仪器 VEGF、CXCL5和MMP9酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司；多功能酶标检测仪(iMark)购自美国Bio-Rad公司；高速离心机(AVANTI J-15)购自美国Beckman Coulter公司。

1.3 治疗方法 所有纳入患者均进行根治性膀胱切除术治疗，切除膀胱，配合盆腔淋巴结清扫术。术后给予常规补液、抗生素预防感染。

1.4 检测指标 术前，对所有入选MIBC患者空腹抽血3 mL，离心(3500 r/min，10 min)分离血清，采用ELISA检测所有血清样品中VEGF、CXCL5和MMP-9表达水平，严格参照试剂盒说明操作。

1.5 随访 患者自术后第1 d开始经门诊复查或电话随访，1年内每3个月经门诊复查1次，2年内半年经门诊复查1次，之后至少每年复查一次，随访截止2018年12月，共计随访36个月。随访记录患者复发、死亡、生存或其他等，复发为患者治疗后经膀胱镜活检证实为膀胱癌再发。

2 结果

2.1 一般资料比较 纳入患者中男性52例，女性30例，年龄25～75岁，平均(57.36±10.24)岁，根据组织学分级[9]：G1期8例，G2期40例，G3期34例；肿瘤直径≤5cm 32例，直径>5 cm 50例；T分期：T2期45例，T3期31例，T4期6例；合并淋巴结转移36例，无淋巴结转移46例。对照组中男26例，女15例，年龄26～75岁，平均(57.84±10.39)岁。两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

2.2 MIBC患者术前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9表达水平 与对照组相比，MIBC患者术前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表达水平显著升高(P<0.05)，见表1。

表1 MIBC患者血清中VEGF、CXCL5和MMP-9表达水平

2.3 不同基本特征MIBC患者术前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表达 MIBC患者术前血清CXCL5、VEGF和MMP-9的表达水平与患者肿瘤直径、分化程度、T分期以及是否合并淋巴结转移有关(P<0.05)，见表2。

表2 不同基本特征MIBC患者术前血清中VEGF、CXCL5和MMP-9的表达

2.4 术前VEGF、CXCL5和MMP-9的表达与MIBC患者根治术后的预后分析 采用中位数法，将患者分为VEGF高表达组和低表达组各41例；CXCL5高表达组和低表达组各41例；MMP-9高表达组和低表达组各41例。MIBC患者术前血清中VEGF低表达患者生3年总生存率和无病生存率显著高于VEGF高表达患者(73.17% vs 51.22%，Log-rank2=4.548，P=0.033；56.10% vs 34.15%，Log-rank2=4.701，P=0.030)，见图1A、B。MIBC患者术前血清中CXCL5低表达患者3年总生存率和无病生存率显著高于CXCL5高表达患者(75.61% vs 48.78%，Log-rank2=6.639，P=0.010；58.54% vs 31.71%，Log-rank2=7.212，P=0.007)，见图1C、D。MIBC患者术前血清中MMP-9高表达患者生3年总生存率和无病生存率显著低于MMP-9低表达患者(75.61% vs 48.78%，Log-rank2=6.340，P=0.012；56.10% vs 34.15%，Log-rank2=5.037，P=0.025)，见图1E、F。

图1 VEGF、CXCL5和MMP-9的表达与MIBC患者根治术后的预后分析

2.5 术前VEGF、CXCL5和MMP-9表达的相关性分析 MIBC患者术前血清VEGF、CXCL5水平均与MMP-9的表达呈显著正相关关系(r=0.594，P<0.001；r=0.658，P<0.001)。

3 讨论

MIBC是一种复发、转移率较高的膀胱癌，根治性膀胱切除术是其主要的治疗手段。研究显示，MIBC患者术后复发、远端转移率高，寻找相关的分子标志物，正确评估患者预后，具有重要意义[4]，VEGF、CXCL5、MMP9均与膀胱癌的发生发展相关[5-6]，但其对MIBC根治术后生存的影响报道较少。因此，本研究分析了术前VEGF、CXCL5、MMP9的表达对MIBC患者根治术后生存的影响，以期正确评估患者预后，指导临床治疗。

本研究中，术前VEGF水平与膀胱癌患者的病理分期、组织类型、临床分期等有关，VEGF高表达可以显著降低MIBC患者根治术后的3年生存率。VEGF是血管内皮细胞特异的有丝分裂原，可以有效的促进内皮细胞增殖，增加血管通透性，改变细胞外基质，促进肿瘤血管的新生[7]。周浴等[8]研究显示，VEGF与膀胱癌的临床病理特征相关，可以在一定程度上反映膀胱癌患者病情发展，与本研究结果基本一致，证实VEGF与膀胱癌患者的恶性发展密切相关，有望作为其预后评估的标识物。熊莺等[9]研究显示，VEGF可以促进肿瘤血管的新生，调控肿瘤细胞的增殖侵袭、迁移等多种恶性生物学行为，影响膀胱癌患者的预后生存，提示VEGF可能通过调控膀胱癌的恶性增殖和转移，推进MIBC患者的恶性发展，影响患者的术后生存。本研究中，术前CXCL5高表达可以显著降低MIBC患者根治术后的3年生存率。CXCL5为趋化因子C-X-C/α亚族的一员，与肿瘤血管的新生密切相关，参与多种肿瘤细胞的生物学行为[10]。倪锋等[11]研究显示，CXCL5高表达与膀胱癌患者术后复发转移密切相关，提示CXCL5可以作为评估MIBC患者根治术后生存的标志物。本研究中，术前MMP-9高表达可以显著降低MIBC患者根治术后的3年生存率。MMP-9属于MMP家族，可以分解呼吸道和肺内的结构复合物，降解和重塑细胞外基质，促进肿瘤细胞的侵袭、转移和血管生成[12]。陈娟等[13]研究显示，MMP-9参与调控膀胱癌的恶性生物学行为，促进肿瘤细胞的侵袭和转移，提示MMP-9高表达可能通过促进MIBC的转移，从而降低根治性膀胱切除术后的生存率。

本研究中，MIBC患者血清VEGF与MMP-9的表达呈显著正相关关系。临床研究显示，MMP-9和VEGF可以发生协同作用，共同促进肿瘤血管的新生，调控非小细胞肺癌的生物学行为[14]，与本研究结果基本一致，提示MMP-9和VEGF可能共同参与调控MIBC的生物学行为，推进MIBC的恶性发展，但其作用机制目前尚不清楚，有待于进一步研究。本研究中，MIBC患者血清MMP-9与CXCL5的表达呈显著正相关关系。已有研究显示，MMP-9与CXCL5在膀胱癌细胞中的表达呈显著正相关关系，可以共同调控膀胱癌细胞血管的新生[15-16]，与本研究结果基本一致，提示MMP-9、CXCL5、VEGF可能通过某种信号途径共同调节MIBC的发生发展，临床可根据MIBC患者术前的MMP-9、CXCL5、VEGF水平，评估患者预后生存，指导临床治疗，通过联合术前新辅助化疗、术后放化疗等延长患者的生存期。

4 结论

术前VEGF、CXCL5或MMP-9高表达MIBC患者根治术后的3年生存率明显降低，且VEGF和CXCL5均与MMP-9的表达呈显著正相关关系，提示MMP-9、CXCL5、VEGF可能通过共同调节MIBC的恶性发展，但其相互作用机制尚不清楚，有待于进一步研究。本研究不足之处为样本量较少，可能会对结果产生一定的影响，但本研究为临床MIBC的预后提供了一定的理论依据。