叉头框转录因子D3蛋白表达与胃癌相关病理学参数的关联性①

程兰芳

(郑州市金水区总医院病理科,河南 郑州 450000)

胃癌为临床常见的消化道恶性肿瘤，目前临床主要采用胃镜、病理检查等诊断。肿瘤干细胞(CSCs)为肿瘤细胞内特殊细胞亚群，数量极少，能产生不同表型的肿瘤细胞，维持肿瘤细胞的恶性增殖。叉头框转录因子D3(FOXD3)蛋白是一种干细胞关键转录因子，可维持胚胎发育，同时有助于抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达，阻断血管生成，干扰病灶生长[1,2]。本研究以我院胃癌患者109例为研究对象，旨在分析FOXD3蛋白表达与胃癌患者相关病理学参数的关系。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2018-03～2019-11我院胃癌患者109例，术前均未行任何放、化疗，术后均行病理检查。排除HE染色制作时掉片、滑片情况病例。

1.2 方法

手术取胃癌组织及癌旁正常组织，采用免疫组化法按SP试剂盒(购自北京博奥森公司)说明书进行，固定，脱水，包埋，3μm连续切片，脱蜡至水化，抗原微波修复，辣根过氧化物酶标记，二抗孵育，DAB镜下观察显色，以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性组织切片作为阳性对照。每张切片随机选5个高倍视野(×200)，半定量积分法判断阳性结果，阳性强度：3分：棕褐色；2分：棕黄色；1分：浅黄色；0分：基本不着色；阳性面积：4分：视野阳性细胞数≥75%；3分：50%～74%；2分：25%～49%；1分：6%～24%；0分：≤5%。两项积分乘积≤2 分为阴性(-)，3～4分为弱阳性(+)，5～8分为中度阳性(++)，9～12分为强阳性(+++)，强阳性、中度阳性、弱阳性均判断为阳性表达。

1.3 观察指标

(1)对比胃癌组织及癌旁组织FOXD3蛋白阳性率。(2)单因素分析不同病理参数(性别、年龄、肿瘤直径、分化程度、临床分期、浸润深度、是否有淋巴结转移)FOXD3蛋白阳性表达情况。(3)分析FOXD3蛋白阳性率与胃癌相关病理学参数关联性。

1.4 统计学方法

采用SPSS22.0统计分析软件，计数资料以n(%)表示，两组间比较采用χ2检验；Logistic回归分析模型分析FOXD3蛋白阳性率与胃癌相关病理学参数关联性。均采用双侧检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 FOXD3蛋白阳性率

胃癌组织FOXD3蛋白阳性率78.90%(86/109)高于癌旁组织28.44%(31/109，χ2=55.805，P<0.001)。

2.2 单因素分析

不同年龄、性别、肿瘤直径FOXD3蛋白阳性率对比，差异无统计学意义(P>0.05)；低分化程度、浸润程度T3～T4、淋巴结转移患者FOXD3蛋白阳性率高于中高分化程度者、浸润程度T1～T2、无淋巴结转移者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 FOXD3阳性率与病理参数的关系[n(%)]

2.3 Logistic回归分析模型分析FOXD3蛋白阳性率与胃癌相关病理学参数关联性

以FOXD3蛋白阳性率为因变量，纳入单因素分析中差异有统计学意义的参数，结果显示，中、低分化程度FOXD3蛋白阳性率是高分化的5.143倍；浸润程度为T3～T4是T1～T2的2.909倍；有淋巴结转移是无淋巴结转移的1.966倍，分化程度、浸润程度、淋巴结转移与FOXD3蛋白阳性率显著相关(P<0.05)，见表2。

表2 Logistic回归分析模型分析

3 讨论

胃癌发生发展是多阶段、多基因参与的复杂过程。其中FOXD3蛋白可抑制胚胎干细胞中起分化作用的基因转录，调节胚胎干细胞增殖、分化。近年来，其与胃癌的关系研究备受关注。刘坤龙等[3]研究指出，胃癌组织内FOXD3蛋白阳性表达率高达72.50%。本研究对比胃癌患者癌组织及癌旁正常组织FOXD3蛋白水平，发现胃癌组织FOXD3蛋白阳性率78.90%高于癌旁组织28.44%(P<0.05)，与上述研究结果相近，可见FOXD3蛋白在胃癌患者中呈异常高表达。

FOXD3蛋白表达受丝氨酸-苏氨酸激酶(B-RAF)抑制，可下调RhoA-ROCK信号，抑制黑色素瘤细胞形成、迁移、侵袭，进而影响肿瘤的形成[4]。本研究中低分化程度胃癌组织FOXD3蛋白阳性率高于中高分化程度者(P<0.05)，主要原因在于FOXD3蛋白为转录抑制因子，其高表达会抑制细胞生长，促使基因水平向恶性转化，分化程度降低。胃癌组织中FOXD3蛋白可能通过负调控B-RAF信号通路抑制胃癌浸润及淋巴结转移。本研究还发现，浸润程度T3～T4、淋巴结转移患者FOXD3阳性率高于浸润程度T1～T2、无淋巴结转移者(P<0.05)。肿瘤细胞生长过程中，其基因水平调控失常，在恶性转化过程中浸润程度增高，而干细胞因子获得淋巴细胞样“伪装”，逃避人体免疫系统识别，杀伤，侵袭淋巴结，因此，FOXD3蛋白表达随着浸润深度增加或转移阳性表达率增加[5]。进一步Logistic回归分析模型分析发现，分化程度、浸润程度、淋巴结转移与FOXD3蛋白阳性率显著相关(P<0.05)，通过检测FOXD3蛋白阳性率可为临床评价胃癌病理学特征提供参考。

综上可知，胃癌患者FOXD3呈异常高表达，且其表达与分化程度、浸润程度、淋巴结转移密切相关，临床可据此判断患者病情程度，为制定针对性治疗措施提供参考依据。