儿童肺炎支原体检测方法应用研究进展

2021-02-03应悦

婚育与健康 2021年22期

应悦

【摘要】儿童抵抗力较弱，而肺炎前期并无明显症状，同时，肺炎易引起并发症，导致儿童其他系统、器官遭到损害，使得儿童生命健康受到影响。鉴于医者的职责是治病救人，而肺炎严重影响儿童生命健康，所以医者需对儿童肺炎支原体进行研究，并尝试将检测方法应用于临床诊断中。

【关键词】儿童肺炎；支原体；检测方法；应用研究

Progress in application of detection methods for mycoplasma pneumoniae in children

Ying Yue

Lanxi Peoples Hospital， Zhejiang Lanxi， 321100

【Abstract】Childrens resistance is weak， and there are no obvious symptoms in the early stage of pneumonia. Meanwhile， pneumonia is easy to cause complications， resulting in damage to other systems and organs of children， which affects childrens life and health. Since the responsibility of doctors is to treat and save lives， and pneumonia seriously affects childrens lives and health， doctors need to study mycoplasma pneumoniae in children and try to apply detection methods to clinical diagnosis.

【Key？Words】childhood pneumonia； Mycoplasma； Detection method； Application research on

肺炎支原体将口、鼻分泌物当做载体，通过空气进行传播。一般来讲，肺炎支原体可引起呼吸道感染，当累及肺面时可引起肺炎。据调查，感染肺炎支原体常为青少年、儿童，而且患儿年龄越小，临床表现越不明顯，诊断时间也越长。在无法确诊的情况下，医者会凭借自身经验开一些抗生素给患儿，但并未给予患儿及时有效的治疗。由此可见，儿童肺炎支原体检测方法的应用对于临床诊断而言有着重要作用[1]。但是，肺炎支原体检测方法各有优点与不足，想要进行切实有效的检测，需结合患儿临床表现选择一种或多种方法进行检测。

1 肺炎支原体概述

支原体隶属于细胞形微生物，最大特征为具有较多形态，没有细胞壁，因自身直径小所以可以通过滤菌器，可通过人工培养基进行培育、繁殖。因其构成部分有三层，两边为蛋白质，中间为脂质，且形状为分支状、丝状，所以被称为支原体。支原体直径多为0.2mm～0.3mm，且在自然界中存在较广。据统计，自然界中共有60多种支原体。肺炎支原体虽为自然界中的一种支原体，但可引发人类疾病。

肺炎支原体并不是直接引起肺部感染，而是通过呼吸道感染对肺部造成破坏，引起局部组织损伤。具体来讲，肺炎支原体基于接触感染长于纤毛上皮间，通过抑制纤毛活动、对上皮细胞造成破坏、产生过氧化氢引起局部组织损伤。

2 儿童肺炎支原体检测的重要性

2.1 于早期快速确诊

支原体肺炎越拖越难治，因其可引发各种并发症。而将肺炎支原体检测方法应用于临床诊断中，可在患儿就诊时快速确诊，并采取相关治疗措施进行治疗。

2.2 避免滥用抗生素

在未确诊的情况下，多数医者会为缓解儿童患病症状开一些抗生素，但滥用抗生素不仅无法进行有效治疗，还会引起不良反应、使细菌产生耐药性。而应用儿童肺炎支原体检测方法，可避免抗生素的滥用。

2.3 减轻患儿家庭经济负担

据调查，支原体肺炎拖的越久治疗费用越高。而应用肺炎支原体检测方法，可及时给予有效质量，可尽快使患儿恢复健康，可减轻患儿家庭经济负担。

3 儿童肺炎支原体检测方法

3.1 培养法

培养法简单来说就是培育支原体，如果培养基与肺炎支原体形态相似，即形成“荷包蛋”状细小菌落，便可确诊为支原体。最初的培养法对培养基营养有着较高要求，且培养基生长速度较慢，常需一定培养时间，且阳性率极低，所以无法进行临床快速诊断。实验室研究人员通过探究、实践对培养法进行了改良，快速液体培养法应势而生。这种培养法的原理是这样的：将肺炎支原体生长期间的代谢产物利用起来，置于培养基液体中，使其进行结合并改变指示剂颜色，然后根据颜色对肺炎支原体生长进行判断，而标本中的其他支原体、细菌因培养基中加入青霉素、醋酸陀、生物抑菌剂而被抑制[2]。具体操作为：采集临床疑似患儿的咽拭子、痰、胸腔积液、肺泡冲洗液，并选择疑似菌落进行肺炎支原体检测。因MP培养法操作简便，对实验室条件并无太高要求，可明显缩短培养时间，所以可应用于临床诊断中。但在应用快速液体培养法进行肺炎支原体检测时，医者需注意：念珠菌可影响诊断结果，为避免出现误诊误治，医者需同时进行念珠菌培养。

3.2 免疫学检测法

免疫学检测法又被称为血清学检测法，即根据患儿血清情况进行临床诊断。

3.2.1 血清冷凝集试验血清冷凝集试验是最早出现的一种检测方法，因为儿童被肺炎支原体感染时会在一周后期或第二周前期出现血清冷凝集效价升高的现象。利用传统血清检测方法进行检测，可快速获得结果。但医者需注意，此种方法存在灵敏度不高、特异度不高等问题，所以不能作为确诊指标。

3.2.2 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验是应用最为广泛的一种技术，其原理为：将载体表面的抗原进行吸附，使其与血清中的相应抗体进行结合，进而形成免疫复合物[3]。之后，将免疫复合物放入第二抗体，使其进行结合，进而发生免疫反应，并借助酶所具备的降解作用进行诊断。相较而言，这种检测方法具有以下优点：①操作简单方便。②临床易开展。③操作时间短。④对实验室条件低。但检测结果容易受患者年龄、基体免疫功能及试剂盒不同等影响，所以无法为肺炎支原体诊断提供有效依据。

3.2.3 明胶颗粒凝集法明胶颗粒凝集法隶属于间接凝集试验。原理为：将病原体放置于粉色凝胶颗粒中，使其进行结合，并根据试验反应进行诊断。倘若血清标本中含有抗体，那么试验结果就会变成这样：形成肉眼可见的粉红色凝集。这种试验方法的具体操作并不是很难，而且血清抗体呈现出特异度高特点，所以诊断结果的可靠性可以得到保障。因此，被应用于支原体肺炎诊断常规检测中。

3.3 基因检测法

基因检测法指的是对患儿的基因进行检测，根据患儿基因情况进行临床诊断。一般采用基因检测法进行检测时，医者需采集患儿的血液、细胞或者其他体液。就现代医学而言，可应用于肺炎支原体检测的基因检测法有四种，一是普通PCR，二是实时荧光PCR，三是套式PCR，四是反向斑点杂交法。利用基因检测法进行肺炎支原体检测的操作流程如下：①获取标本。医者需与患儿监护人进行交流，使患儿监护人了解此检测的意义、必要性，并在患儿监护人同意后与患儿进行沟通，使其配合标本取样。②获取核酸。医者需采取有效手段去除标本中除核算外的杂质，如：裂解剂、孵育、反复清洗、离心等。③PCR。利用PCR仪使标本产生反应，并对靶基因进行扩增。④电泳。使扩增物质进行凝胶电泳，之后进行有效检测。倘若标本中未存在靶基因，那么检测结果为阴；倘若标本中存在靶基因，那么检测结果为阳。但基因检测因操作复杂、所用设备昂贵，无法进行广泛应用。

3.4 血小板衍生生长因子检测法

血小板衍生生长因子指的是由血小板衍生的生长因子，常被称为PDGF，由二聚体和染色体激酶肽结构组成，分为AA、AB、BB、CC、DD5种亚型。血小板衍生生长因子是多种间质细胞强促成的生长因子，包括丝分裂剂、生长因子、趋化因子。PDGF可趋化多种炎细胞、肺泡细胞，所以在检测肺炎支原体方面有一定的优势。通过研究发现，当患儿血清PDGF值为6000pg/ml时，检测结果为阳性的概率为93.47%。也就是说，可将PDGF值为6000mg/ml作为鉴别诊断的基线值，对支原体肺炎及非支原体肺炎进行有效区分[4]。