Treg%、sICAM-1水平与蛛网膜下腔出血严重程度的相关性分析*

魏 容，杨 娜，胥国强，肖光军

四川省遂宁市中心医院检验科，四川遂宁 629000

蛛网膜下腔出血(SAH)是临床常见的急重症之一，具有较高的致残率和致死率，临床将其分为原发性SAH和继发性SAH。原发性SAH的病因多是颅内动脉瘤、自身免疫性动脉炎或是血管畸形引发患者脑表面和脑底部的血管破裂，造成血液流入蛛网膜下腔。90%以上的SAH为急性发病，部分原发性SAH患者在治愈后可能再次出血或血管痉挛，形成继发性SAH[1]。SAH通常采用数字显影血管造影术、颅脑CT扫描监测出血情况或进行腰椎穿刺脑脊液检查，但是腰椎穿刺操作烦琐且操作时需严格注意禁忌证。近年来的研究表明，SAH的病理生理改变与免疫炎性反应有重要联系：调节性T细胞(Treg)是体内的一种T细胞亚群，同时表达CD4、CD25两种分化簇，可减轻过度的免疫炎性反应，减少组织的损伤[2]。有研究指出，Treg是原发性SAH患者的保护性因素[3]。可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)是SAH患者发生血管痉挛的主要特异性炎性因子，当机体组织受损、缺血缺氧或处于炎症状态时，sICAM-1被大量激活，于外周血中高表达，引起一系列免疫炎性反应。调节性T细胞百分比(Treg%)与SAH存在明显的相关性[4]，sICAM-1能介导SAH患者脑组织受损的相关免疫炎性反应[5-6]。但Treg%和sTCAM-1水平与SAH严重程度的相关性研究报道较少。本研究针对SAH患者进行了这方面研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2015年1月至2019年6月在本院接受治疗的96例SAH患者为研究对象，其中男62例，女34例；年龄30～69岁，平均(48.09±6.53)岁。采用Hunt-Hess分级法对患者进行分级[4]：Ⅰ级为无症状或出现轻微头痛，体格检查可见颈项强直；Ⅱ级为中重度头痛，无意识障碍，体格检查可见脑膜刺激征阳性；Ⅲ级为嗜睡或精神错乱，轻度局灶性功能缺损，可见偏侧肢体中重度麻痹等；Ⅳ级为昏迷，中重度肢体偏瘫，早期去脑强直、自主神经功能异常；Ⅴ级为深昏迷，去大脑皮质强直，患者处于濒死状态。96例患者中Ⅰ级25例，Ⅱ级27例，Ⅲ级28例，Ⅳ级12例，Ⅴ级4例。本研究经本院伦理委员会批准，所有患者及家属均知情同意。

1.2纳入与排除标准 纳入标准：(1)所有患者的临床症状符合SAH，伴剧烈头痛、恶心呕吐及意识障碍；(2)所有患者经CT或MRI诊断，符合SAH的诊断标准[7]，确诊为SAH；(3)发病72 h内入院接受治疗；(4)具有较高的依从性。排除标准：(1)发病时间不明者；(2)合并颅内感染、肿瘤等其他颅内病变者；(3)严重心、肝、肾功能障碍者；(4)伴有血液系统疾病者；(5)外伤性头痛者。

1.3方法

1.3.1CT检查 采用飞利浦16层螺旋CT MX16进行检查，患者取仰卧位，先进行CT平扫，再进行血管成像(Vitrea2.0工作站)。CT扫描参数设置：120～140 kV，电流250 mA，层厚5 mm，矩阵扫描(512×512)。然后将20 mL小剂量造影剂(碘普罗胺注射液)用于肘静脉注射造影，流速为4.5 mL/s，于第5颈椎椎体水平的颈动脉设定阈值为90 HU，当注射造影剂后该处CT值超过80 HU时开始自动扫描，范围从第1颈椎椎体下缘至头顶部。获得图像后传输至工作站进行容积再现、最大投影密度重建，从各视角观察血管形态。

1.3.2外周血检测 所有患者于清晨空腹抽取外周静脉血5 mL，分为两管，其中1管采用贝克曼库尔特EPICS®ALTRATM流式细胞仪检测，并使用直接荧光标记法检测Treg%，CD4-PE、CD25-FITC抗体购自蓝基生物公司；另1管置于室温下30 min，以3 000 r/min的速度离心15 min，分离上层血清，保存于-20 ℃冰箱中待测，采用ELISA法检测血清sICAM-1水平，试剂盒由江莱生物提供。

1.4观察指标 采用Glasgow昏迷量表(GCS)评分[8]评价患者的颅脑损伤程度(3～15分)，得分越高表示患者的意识状态越好；采用Hunt-Hess分级评价患者病情严重程度。

2 结 果

2.1不同Hunt-Hess分级、GCS评分患者Treg%、sICAM-1水平比较 Hunt-Hess分级Ⅰ～Ⅱ级与Ⅲ～Ⅴ级患者之间Treg%、血清sICAM-1水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；GCS评分3～4分、>4～7分、>7～15分患者Treg%、血清sICAM-1水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1、2。

2.2Treg%、sICAM-1水平与Hunt-Hess分级、GCS评分的相关性 血清sICAM-1水平与Hunt-Hess分级呈正相关(P<0.05)，与GCS评分呈负相关(P<0.05)。Treg%与Hunt-Hess分级呈负相关(P<0.05)，与GCS评分呈正相关(P<0.05)。见表3。

表1 不同Hunt-Hess分级患者Treg%、sICAM-1水平比较

表2 不同GCS评分患者Treg%、sICAM-1水平比较

表3 sICAM-1 、Treg%与Hunt-Hess分级、GCS评分的相关性

3 讨 论

SAH是脑内血管破裂出血后，血液进入蛛网膜下腔而引起的一系列综合征[9]。SAH常见的病因包括颅内动脉瘤破裂、自身免疫性动脉炎、动脉硬化、血管畸形等，其中颅内动脉瘤破裂是引发SAH最主要的原因，占60%～90%[10]。SAH发病急、致死致残率高，因此临床尽早、及时的诊断对患者的治疗具有重要意义[11]。

目前诊断SAH应用最多的仍然是数字显影血管造影术，该技术在临床中被视作诊断SAH的金标准，但其缺点是具有侵入性，在检查过程中，对于伴颅内动脉瘤的患者，极有可能引发血管再次破裂，造成血管痉挛、栓塞，给患者带来生命危险[12]。多层螺旋CT成像技术是临床诊断内科疾病应用最为广泛的技术之一，其最主要的优点是通过一次扫描即可获得不同层厚的CT图像，并且成像速度非常快，仅需数秒即可完成，成像质量极大提高[13]。本研究采用多层螺旋CT成像技术观察了96例SAH患者脑部血管，也获得了清晰的重建影像图，有利于SAH的诊断和分级。

除了影像学检查外，脑脊液检测也是SAH的常规检测项目，有研究报道，SAH患者脑脊液中sICAM-1水平、Treg%与健康人群比较，差异有统计学意义(P<0.05)[14]。sICAM-1是黏附分子从细胞中脱落至体液中形成的可溶性黏附分子，其含量可以反映黏附分子的水平。sICAM-1也是黏附分子蛋白家族中的重要成员，其通过与对应的配体结合参与人体细胞识别、炎性反应等多种病理生理过程[15]。正常情况下，sICAM-1在健康人体内呈低表达，但在人体组织受损发生炎性反应时被激活而呈高表达。在患者发生SAH时，sICAM-1能介导白细胞与血管内皮细胞的黏附作用，在血栓形成处和内皮损伤处高表达，这种活化作用使得sICAM-1被大量释放入血，并通过血液循环进入外周血[16]。本研究发现，不同Hunt-Hess分级、GCS评分患者外周血清sICAM-1水平，差异均有统计学意义(P<0.05)，且通过相关性分析发现血清sICAM-1水平与Hunt-Hess分级呈正相关(P<0.05)，与GCS评分呈负相关(P<0.05)。以上结果表明，血清sICAM-1水平越高，SAH患者病情越严重。分析其原因：炎性反应是SAH发生、发展中的一个重要环节，以白细胞局部浸润、黏附聚集为主要表现，sICAM-1是白细胞黏附所必需的重要介质。有研究发现，在SAH早期sICAM-1水平即明显升高，sICAM-1水平升高是引起迟发型脑血管痉挛的重要因素[17]，而迟发型脑血管痉挛是SAH的常见并发症，主要发生在脑出血后48 h，进一步导致局部脑组织严重缺血缺氧，引起脑组织继发性损伤，是SAH患者高致死率、致残率的主要原因[18]。

除了sICAM-1外，Treg也与炎性反应有密切联系：Treg是一类免疫调节细胞，其功能是通过免疫抑制来维持人体的免疫稳态；Treg能抑制淋巴细胞增殖分化，调控免疫功能，减轻炎性反应对机体组织、器官的损伤作用,而动脉壁损害是引起动脉瘤破裂导致SAH的重要原因之一[19]。有学者对行腰椎穿刺取得脑脊液患者的Treg%进行检测，发现Treg%是SAH患者的一个保护因素，Treg%与患者的疼痛程度评分、神经功能评分(NIHSS评分，得分越高，功能越差)和住院时间呈负相关，并在患者得到有效治疗后Treg%升高[20]。本研究结果发现，不同Hunt-Hess分级、GCS评分患者外周血Treg%差异均有统计学意义(P<0.05)，且通过相关性分析发现外周血Treg%与Hunt-Hess分级呈负相关(P<0.05)，与GCS评分呈正相关(P<0.05)。以上结果表明，Treg%越高，患者病情越轻，Treg是SAH患者的保护因素。分析其原因，考虑与Treg的免疫抑制作用相关。梁仔等[3]研究证实，Treg%及转化生长因子(TGF)-β1与SAH患者GCS评分、住院时间等指标呈负相关。此外，该项研究还发现，原发性SAH患者Treg%低于健康成年人，而外伤性SAH患者Treg%与健康成年人无明显差异，可在一定程度上用于鉴别原发性SAH和继发性SAH。

综上所述，血清sICAM-1水平与SAH患者Hunt-Hess分级呈正相关(P<0.05)，与GCS评分呈负相关，Treg%与Hunt-Hess分级呈负相关(P<0.05)，与GCS评分呈正相关(P<0.05)。外周血Treg%和sICAM-1检测可为SAH严重程度评估提供参考。