2种不同的尿液沉渣检测方法在肾脏疾病诊断中应用价值

李文芳，李春娜，林文珍，李克学，唐 苗，刘丹丹

（中山大学附属第五医院1.临床检验科；2.感染科，广东 珠海 519000）

慢性肾脏病（Chronic kidney disease，CKD）是一种慢性进展性疾病，严重危害人类健康，早期临床表现常由于缺乏明显和特异性的症状和体征容易被漏诊，研究显示约30%的患者在首次就诊时就已经患有慢性肾脏疾病[1]，因此予以肾脏疾病患者早期而有效的诊断很有必要。目前尿液常规和沉渣检查是目前检查肾脏疾病的常用检测方法，也是肾脏疾病治疗的常用监测指标[2]；显微镜镜检结果较为准确，但需大量的人力投入以及结果易受主观因素影响，随着尿沉渣检验标准化的推广和普及，有许多尿液沉渣检验专用仪器，无论是何种仪器法操作均简单及高效[3-4]；慢性肾脏疾病患者尿液中各种有形成分有多种形态学的变化，尤其红细胞形态学的变化较为多样性，因此针对慢性肾脏疾病患者是否可用仪器法完全替代人工镜检仍有待商榷。因此本文将运用沉渣发针对肾脏疾病患者的尿液检测，同时以人工显微镜镜检检测作为标准，探讨不同的尿沉渣仪器检测法在肾脏疾病患者中的检测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院在2020年8月收治的31例患者的尿液样本和53例肾脏疾病患者作为研究对象，其中女性56例，男性27例，年龄17～87岁。通过比较数字显微镜成像检查和染色流式细胞仪法在尿液有形成分如红细胞、白细胞和管型计数的检测结果的差异。

1.2 主要仪器与试剂

人工镜检法使用奥林巴斯显微镜进行，而数字显微镜成像尿沉渣检测使用Cobas u701有形成分分析仪和染色流式细胞仪法尿沉渣检测用希森美康UF-5000i有形成分分析仪，以上两台设备均采用配套的试剂。

1.3 方法

同一份尿液标本分别在Cobas u701有形成分分析仪和希森美康UF-5000i有形成分析仪上进行尿液有形成分检测。仪器检测后，将剩余的尿液标本以1500 rpm，离心5分钟，弃上清，沉渣涂片人工镜检。尿液为均为清晨的中段尿，所有的检查结果均在2h内检查完成。

1.4 统计学方法

本文中所有的数据分析均采用SPSS 21.0软件进行分析统计。计量资料采用t检验；计数资料以率（%）表示，采用x2检验。若P＜0.05则表示具有统计学意义差异。

2 结 果

2.1 两种方法一致性分析

为了检测两种不同的检测方法在在常规患者的检测中尿液检测结果是否存在一致性，我们通过检测31名随机患者的尿液，结果显示染色流式细胞仪法和数字显微镜成像检查法在红细胞和白细胞的计数均没有统计学差异（图1A和B）；进一步比较发现在肾小球疾病患者中染色流式细胞仪法检测的红细胞计数要明显高于数字显微镜成像检查法，且差异具有统计学差异（P＜0.05）（图1C和D）。

2.2 两种方法学在尿液红细胞和白细胞、管型与显微镜镜检符合率的比较

人工镜检是尿液有形成分是临床尿液常规检查的金标准，本研究的尿液有幸成分的人工镜检有2名有经验的检验人员对尿液标本进行人工镜检，对两种方法学在红细胞和白细胞与显微镜镜检符合率进行评估比较，结果显示染色流式细胞仪法实验组的红细胞镜检阳性19例，阴性28例；白细胞镜检阳性28例，阴性21例，管型镜检阳性4例，阴性48例；数字显微镜成像检查法实验组的红细胞镜检阳性18例，阴性32例；白细胞镜检阳性28例，阴性20例，管型镜检阳性2例，阴性42例；染色流式细胞仪法的红细胞和白细胞的符合率分别为91%和93%，数字显微镜成像检查法的红细胞和白细胞的符合率分别为85%和93%，显然前者要略高于后者且差异具有统计学意义（见表1）。

表1 两种方法与人工镜检检测（n）

3 讨 论

机体在正常情况下尿液并不会出现大量的红细胞、白细胞和管型等有形成分，若在尿液标本中检测出红细胞、白细胞和管型可提示患者的肾脏或者泌尿系统出现异常，尤其显微镜镜下血尿和镜下管型是提示肾性疾病的重要线索，也是明确肾性疾病类型的依据之一[5-6]，多项研究也证实于肾脏疾病患者采取尿沉渣化学方法检测尿液的准确性较高[7-8]，因此能够早期和准确的检测尿液中各种细胞类型将有助于提高肾性疾病的诊断准确率和监测治疗的有效性。目前在临床检验中对于尿液沉渣有形成分检测原理主要有数字显微镜成像检查和染色流式细胞仪法，其中染色流式细胞仪法主要是通过对尿液中各种有形成分进行细胞膜和细胞核荧光染色，通过对各种有形成分所产生的散射光、荧光和电阻变化检测计算出各种有形成分的含量；而数字显微镜成像尿沉渣检测法主要是通过拍摄全景图片并且提供与人眼在显微镜下观察到的细胞有形成分一致的图像，最终通过神经网络分析软件对图像内的成分进行识别和计数[9]。在本研究分析中发现，针对肾脏疾病患者，两种方法学在红细胞的检出率中具有统计学差异，并且染色流式细胞仪法与镜检符合率更明显高于数字显微镜成像尿沉渣检测法，究其原因可能是由于数字显微镜成像在检测过程中对某些层别的细胞识别效率减低甚至无法识别，因此与镜检的符合率有所减少[10]；数据显示，染色流式细胞法在检测红细胞时存在一定的假阳性，镜检发现这类假阳性标本主要是由于含有细小的草酸钙结晶，在形态上与小红细胞形态类似，因此染色细胞流式法存在一定的假阳性[11]；另外我们认为在数字显微图像法出现一定的假阳性可能是由于肾小球源性的红细胞因受到肾脏系统中不同的酸碱环境和渗透压的影响会导致出现红细胞形态学的变化[12]，因此可能运用数字显微镜成像检查法时对红细胞的检测可能存在漏诊，本研究中数字显微镜成像检查所漏诊的患者尿液中的红细胞阳性率要略高于色流式细胞仪法检测法的结果也证实这一点。另外，尿液中出现管型成分提示患者的肾小球或者肾小管存在肾实质性损害，针对肾小球疾病患者运用数字显微镜成像检查对于管型成分识别与镜检符合率要明显低于染色流式细胞法，但是检出的假阳性略高，这主要是由于前者常将尿液中的粘液丝和卷曲的上皮细胞误判为病理性管型，以及管型由于在组成成分、形态和性质管型具有多种类型，因此染色流式细胞法与镜检符合率上更优于数字显微镜成像法。临床工作发现显微镜镜检虽具有较高的临床价值，但耗时耗力，尤其对检验人员资质要求高，但无论染色流式细胞法还是数字显微镜成像法的都具有高效率和速度快的特点，结合以上结果可以看出，无论是何种方法学的尿液沉渣检测，都无法完全替代人工镜检法，因此在临床检验中，针对肾脏疾病患者都应在仪器法检测的基础上及时进行人工镜检确认，这样才能保证检测的准确性、避免误诊漏诊的事件发生。