输血前不规则抗体筛查对预防免疫溶血性输血反应的效果观察

李 巍，翟慢慢，田冬冬

(1郑州大学附属儿童医院，河南 郑州 450000；2河南省儿童医院；3郑州儿童医院)

目前，因ABO血型不符引起的溶血性输血反应(HTR)已很少发生，但不规则抗体所导致免疫HTR、新生儿溶血病、交叉配血不和等情况的发生率仍较高。因此，在临床输血前进行不规则抗体筛查越来越普及，这有助于选择相配合的血液进行输注，以保障患者的安全。现就其对预防HTR的影响进行观察分析。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析了2019年5月—2020年5月本院输血科进行不规则抗体筛查的168例患儿相关资料(观察组)，同时收集2018年4月—2019年4月未行不规则抗体筛查的160例患儿相关资料(对照组)。所有研究对象临床资料均完整，有多次输血史，患儿生命体征稳定。排除伴有凝血功能障碍、心脏疾病、肝肾功能严重障碍的患儿。观察组：男81例，女87例；年龄4～12岁，平均(8.12±2.12)岁；输血史0～5次，平均(2.11±0.24)次。对照组：男75例，女85例；年龄3～13岁，平均(8.09±2.09)岁；输血史0～5次，平均(2.09±0.26)次。两组一般资料比较无统计学意义(P>0.05)，有可对比性。

1.2方法 仪器与试剂：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e血型定型试剂(上海血液生物医药有限责任公司)，Banjo血型卡加样仪(瑞士达亚美公司)，不规则抗体筛选红细胞(江苏力博医药生物技术股份有限公司)，TEG 5000血栓弹力图分析仪与8Techno型全自动血型分析仪(美国伯乐公司)，微柱凝胶卡(北京市斑驳斯技贸有限责任公司)。抗原系统包括ABO、Rh、Kidd、Duff、MNSs、lewis血型系统抗原。对照组：参照《临床输血学检验》进行检测[1]，遵循常规流程进行输血：空腹采集患者肘静脉血32 mL，盐水凝集法检测血型抗原，获取患者的50μL红细胞液，将红细胞液与抗A血清、抗B血清各20μL进行混合反应，当反应液充分反应后接合到反应卡上，再次反应10 min(37℃环境)，离心处理，查看结果，选取同血型的血液进行交叉配血，结果相符后再进行输血。观察组：其他检查同对照组，不规则抗体筛查：空腹静脉采血3 mL，并置于抗凝管中，在37℃水浴中处理10 min，以3000 r/min离心5 min，分离血浆待用。在微柱凝胶卡的三个微柱孔中加入50μL、0.5%～0.8%的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号抗体筛选细胞，然后分别将50μL血清加入已标记好的凝胶管内；37℃反应15 min，离心5 min，然后进行观察。若红细胞凝聚且悬浮于凝胶柱上方或中间则为阳性，无凝聚且沉于底部为阴性。阳性标本需进行抗体特异性检测，并与标准谱细胞进行对照，若与谱细胞(1份或数份)出现凝集而自身红细胞不凝集，为特异性抗体；与血浆、自身红细胞及所有谱细胞均凝聚，为非特异性抗体。需排查抗筛阳性病例是同种抗体、自身抗体或是干扰因素造成的阳性。护士根据结果选择血型相同、配血符合的血液进行交叉配血，并观察免疫性HTR情况。检测时同时需考虑可能存在漏检，如抗-M、抗-N、抗P1、抗-A1、抗-H等，需严格进行质量控制。

1.3评价指标 不规则抗体的检出情况，两组免疫HTR情况。

2 结果

2.1不规则抗体的检出情况 观察组168例患儿中，检出阳性11例，占6.55%，其中特异性不规则抗体2例(1例抗e4，1例抗E2)，非特异性9例。其中女性、输血次数>3次患儿阳性检出率较高。见表1。

表1 不同患儿不规则抗体的检出情况[n(%)]

2.2免疫溶血性输血不良反应 观察组免疫溶血性输血不良反应发生率为0.60%(1/168)，对照组为5%(8/160)。两组比较有统计学意义(χ2=4.422，P=0.035)。

3 讨论

输血是临床救治患者常用的手段，但血液成分的复杂性以及患者个体之间的差异性易导致输血不良反应，其中HTR是较为严重的不良反应之一，可导致发热、胸痛、黄疸等，严重者可出现呼吸困难、休克等，严重危及患者的生命安全[2]。不规则抗体是引起HTR的主要因素之一，该抗体是指除抗-A、抗-B以外的血型抗体，常导致血型鉴定困难、交叉配血、输血不良反应等，一般会在输血后1～4周出现，因而常被误诊为隐匿性出血，影响患儿的健康，增加患儿家长的经济负担[3]。目前，筛查不规则抗体的方法较多，如盐水介质法、凝聚胺法、微住凝胶法等，其中微住凝胶法是一种较新型的血液检验方法，检测较为便捷、敏感且操作简单，较常规检测方法更为可靠[4]。本研究使用微住凝胶法进行筛查，患儿不规则抗体阳性率为6.55%，其中非特异性规则抗体相对较多，提示了在输血前进行不规则抗体筛查时需进一步证实其特异性，保证输血安全性。由于不规则抗体属于免疫蛋白M，适宜反应温度为4～20℃，在麻醉与降温情况下可发生不规则反应，且受不同人群、地域的影响，因而非特异性规则抗体检出率相对较多，输血时需注意鉴别，配型时无相应抗原血液，保障输血安全。此外，本研究结果显示，女性、输血次数>3次患儿阳性检出率较高。因而，对于输血次数>3次的女性患儿，不规则抗体筛选及特异性鉴定可采用不含相应抗原血液进行输血。此外，本研究中观察组免疫HTR发生率低于对照组。表明了进行不规则抗体筛查可有效减少HTR发生的风险，进而保障输血安全。在常规血液检测中，根据血型抗原结果进行交叉输血，但是ABO血型系统外的所有红细胞血型抗体多为免疫球蛋白M，因而可导致免疫HTR；此外，妊娠史女性、多次输血患者发生HTR的风险较高，需注重不规则抗体筛查，避免患者输血时出现不良反应。

综上所述，在进行临床输血前，应进行不规则抗体筛查，以减少或避免免疫HTR风险，提高临床输血安全性。