临沂市2014—2019年单增李斯特菌感染病例流行病学调查和PFGE分子分型分析

蒋海英，左亚凡，王济忠，季圣翔，李 涛

(临沂市疾病预防控制中心，山东 临沂 276000)

食源性疾病是当今世界上最广泛的公共卫生问题之一，单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes，LM)作为一种革兰阳性、兼性厌氧的无芽孢杆菌，逐步成为新兴的重要的人兽共患食源性致病菌。被感染的人群可发生以败血症、脑膜炎、脑炎等为症状的李斯特菌病，还可引起孕妇菌血症、流产，甚至死产。婴儿、老人、孕妇和免疫力低下者为易感人群。食品尤其是动物性食品和冷冻饮品容易被该菌污染，成为重要的感染源。

1 资料与方法

1.1资料来源 本文资料来源于临沂市食源性疾病LM专项监测项目，主要以临沂市某妇女儿童医院等医疗机构为监测医院，采集前来就诊的孕妇和新生儿血液、脑脊液、羊水等生物标本进行检验检测，通过流行病学调查搜集相关食品信息，开展可疑病因食品溯源。

1.2方法 医疗机构开展LM感染病例标本初筛，收集病例基本信息、症状与体征、饮食暴露史、采集生物标本、实验室检测结果等，开展阳性病例生物标本复核，对确诊病例进行流行病学调查。通过面对面现场问卷调查方式，追溯患者发病4周前饮食暴露史，获得日常生活购买食品和相关物品的场所、日常饮食习惯、就餐场所等信息，整理分析与LM感染相关的可疑危害食品，采集可疑病因食品及其相关样品，进行食品溯源和危害因素分析。

采用脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis，PFGE)分子分型技术进行可疑病因食品溯源分析。采集患者血液、羊水、脑脊液和皮肤涂抹等生物标本和流行病学调查病家日常居住环境、厨房、冰箱、餐饮场所食品和相关食品、环境样品。根据《GB4789.30-2016食品安全国家标准 食品微生物学检验单核增生细胞增生李斯特氏菌检验》《山东省食源性疾病主动监测工作手册》的推荐方法检验，进行LM检测和PFGE分子分型比对。

2 结果

2.1各年度检测情况 2014—2019年临沂市累计监测生物样品、食品样品和环境样品606份，总检出率4.62%，其中生物样品368份，检出率4.62%；食品标本161份，检出率5.59%；环境样品77份，检出率2.60%。详见表1。

表1 2014—2019年单增李斯特菌监测样品情况一览表

2.2阳性病例及PFGE比对情况 在生物样品检出的17份(16例患者)阳性标本中，其中血液11份、脑脊液3份、羊水3份。16例患者中，其中孕妇4例、新生儿10例(其中1例新生儿死亡病例血液和脑脊液中同时检出阳性菌株)、幼儿1例、成人1例。采集食品和环境样品238份，11份样品阳性，其中猪肉3份、禽类(鸡)4份、冷冻饮品1份、贝类1份、冰箱内壁涂抹样2份。经比对发现，某品牌白条鸡和某快餐店甜筒样品中的分离菌株与病例株PFGE完全一致，且其中一个型别与山东省往年分离菌株的一个较大聚类型别完全一致；同一居住地区的2014年1例孕妇和2016年1例新生儿血液标本PFGE分子分型完全一致。

2.3患者分布情况 16例病例中有10例(62.5%)居住在城乡结合部或者农村，家庭居住环境脏乱差，食品卫生意识差，厨房用具摆放杂乱、刀板生熟不分。流调发病前4周均有外出就餐史，以流动摊点、街边小吃、餐饮场所居多。

3 讨论

LM广泛存在于自然界中，土壤、禽、畜、蛋等污染程度高。老年人、新生儿、孕妇和免疫力低下的人群易感，死亡率高。本调查显示，2014—2019年间临沂市LM专项监测阳性检出率在0.96%～9.09%，新生儿病死率达30%，与很多文献研究结果一致[1-2]。LM为低温菌，能够在冰箱冷冻条件下继续生存，猪肉、禽类(鸡)、冷冻饮品、贝类和冰箱内壁涂抹样中均检出阳性样本，与张玲等研究结果一致[3]。

2名孕妇分别食用过的某品牌白条鸡和某快餐店甜筒中检出菌株与病例株PFGE完全一致，表明妊娠期母亲可能因为进食被LM污染的食品导致感染，与相关研究情况一致[4]。一个阳性菌株型别与山东省往年分离菌株的一个较大聚类型别完全一致[5]，表明该型别可能在山东省市售食品中长期存在，具有食源性疾病患病隐患，建议长期跟踪监测。流行病学调查显示，孕妇对LM感染知识知之甚少，孕期饮食健康知识缺乏，家庭居住环境卫生状况较差，不注重饮食卫生，缺少食源性疾病预防意识，普遍存在随意外出就餐情况，增加了LM感染机会。

LM感染是非临床常规检测项目，孕妇妊娠期间出现临床症状后，往往会延误新生儿救治，本监测项目10例新生儿中7例病例由于诊断及时，经正确临床治疗，预后良好。表明LM感染病例监测对临床救治具有指导作用。