动物检测样品采集和处理

刘莹

动物检测样品采集和处理

刘莹

（河南省西峡县动物卫生监督所，河南 西峡 474500）

动物检测样品的采集、保存、运输和处理，事关所采检测样品的质量和检测结果的准确性。为有效保障动物检测样品的质量及安全性，本文就采集和处理动物检测样品过程中应注意的事项进行了阐述。

动物样品；采集；处理

动物检测样品是实验室检测工作的对象，样品的采集、保存、运输和处理关系着所采检测样品的质量，决定着检测工作的成败，是实验室操作质量控制的首要环节。采集动物检测样品应注意以下事项：

1 样品的采集和处理

样品采集时应穿戴好防护用品（如一次性手套、鞋套、防护服，口罩等）后再进行样品采集，应避免防护用品破损。样品采集操作完成后，应严格按照生物安全要求妥善处理相关污染物品，以免造成人畜感染和环境污染。

1.1 病原微生物样品的采集和处理

（1）充分保定动物。在减少动物应激的同时，避免动物对采样人员构成威胁。

（2）做好环境消毒和动物尸体处理工作。防止污染环境，防止疫病传播。

（3）根据不同检测目的，采集相应的样品。如监测抗体采用血清样品，检测抗原则根据病原不同分别采集相应的内容物、分泌物、组织脏器、排泄物或其他材料，不能初步判断病因时应进行全面采样待查。进行流行病学调查、抗体监测、群体健康状况评估或环境卫生检测时，样品数量应满足统计学要求及一定饲养阶段的区间分布。企业进行群体抗体监测时可根据群体大小和日龄状态，制定符合养殖场自身的采样方案和样本数目。

（4）采集样品时应无菌操作。

（5）所采集样品要及时标记并进行登记。

（6）用于细菌检测的样品，如果是无菌样品，接种前无需作特别处理；有杂菌污染的样品，可接种选择性培养基抑制杂菌生长；奶、尿等样品含菌量少时，可用离心法或过滤法作集菌处理。

1.2 血样的采集和处理

采集全血应根据试验要求选择合适的抗凝剂，如肝素、乙二胺四乙酸（EDTA）、阿氏液、枸橼酸钠等。血清血液样品采集后应避免震荡，于室温下静置2～4 h（避免暴晒），待血液凝固、血清析出后分离血清，置4 ℃ 保存，如需长期保存应置于-20 ℃ 保存，避免反复冻融。

1.3 眼、呼吸道、咽、肛拭子的采集与处理

需进行病毒分离的样品用无菌PBS液保存，如需长期保存，应置于-70 ℃；待进行细菌学检验的应立即进行涂片染色和接种相应培养基；待进行核酸检测的样品用50 % 甘油生理盐水保存，保存液没过拭子即可。所采集样品应用稀释液作1～2倍稀释，室温作用1 h后充分振荡，离心取上清液。

1.4 实质脏器的采集和处理

（1）对已死亡的畜禽，应尽快采集，冬季不超过6 h，夏季不超过4 h。濒死畜禽，在放血后采集。采集实质脏器时应无菌操作，将所采脏器组织块，放入无菌容器，每块组织应单独放置，取材应包括病灶和周边正常组织。供组织病理学检查的样品应新鲜，不能冷冻，不能挤压，避免人为损伤，组织块以1.5 cm × 1.5 cm × 1.5 cm为宜。如作冷冻切片，则需将组织放在0～4 ℃保存，尽快进行切片、检测；作石蜡切片应及时用10 % 甲醛溶液固定；进行分子生物学检查的样品，应保持新鲜，低温保存，不能及时检测的，7 d内可于 -20 ℃保存，超过30 d的应置于-70 ℃保存，但应避免反复冷冻。进行细菌学检验时，应及时进行触片、固定。

（2）供显微镜检查的脓汁、血液、分泌物等样品，应无菌操作，尽快进行涂片、固定。

2 样品的记录

送往实验室的样品应填写一式两份的送检单，一份随样品送实验室，另一份留送备案。送检单应包括畜主姓名、场址、动物品种及数量；被感染动物的种类、数量、发病日期、造成损失、感染动物在畜群中的分布情况、发病动物及死亡数量、临床症状、病理变化、免疫及用药情况。送检样品的清单和说明应包括病料种类、保存方法等。

3 样品的运输

运输样品时应提前与动物疫病诊断室沟通，并视天气情况和运输时间长短，将所采集的样品放入加有足够冰袋的泡沫保温箱中，以最快最直接的途径送往实验室。如果样品能在采集后24 h内抵达实验室，应放在4 ℃的容器中密封保存，专人运送。如需寄送，装箱时要内装防震材料。在制成的涂片、触片、玻片上做好标记，火焰固定，放入玻片盒内，并另附说明。所有样品都要标注详细标签。

[1] 樊丽鑫, 袁慧, 宋红静. 兽医临床样品的采集与送检规范[J]. 山东畜牧兽医, 2015, 36（6）: 55-56.

[2] 刘炜, 贾松涛, 彭志领. 基层动物疫病防控技术指南[M]. 郑州: 河南人民出版社, 2014.

[3] 袁江平. 牛羊布鲁氏菌病临床样品的采集与送检技术要点[J]. 山东畜牧兽医, 2018, 39（6）: 56.

（2021–05–08）

S851.2+1

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1007-1733（2021）08-0041-02