生产工艺对补肾活血膏组方成份影响的研究

董晓蕊

摘要：目的：以补骨脂素、异补骨脂素为指标成分，分别从煎煮时间、煎煮次数对补肾活血膏中主要成分含量的影响进行考察，为后期补肾活血膏质量标准的制定奠定基础。方法：以高效液相色谱法测定补骨脂素、异补骨脂素含量。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水（55：45）为流动相;检测波长为246nm;流速为1ml/min;柱温30℃;进样量为10µl。结果：通过对比各实验项下出膏率、相对密度及补骨脂素和异补骨脂素含量测定结果，初步确定补肾活血膏提取工艺为浸泡12小时，煎煮3次，第一次1h，第二次45min，第三次45min。

关键词：补肾活血膏;提取工艺;补骨脂

补肾活血膏方是青海省中医院肺病科专科用药，用于慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期的治疗，在临床已有多年使用历史。补肾活血膏由炙补骨脂、党参、黄芪、骨碎补等27味中药组成，具有扶正固本，祛痰逐瘀，活血通脉的作用，在减轻慢性阻塞性肺疾病的临床症状，遏制病情的发展，提高患者的生存质量方面发挥着积极的作用。

1含量测定

1.1仪器与试药

XS105DU电子天平（上海梅特勒有限公司）;BSA224S-CW电子天平（赛多利斯有限公司）;Waters2695高效液相色谱仪;Milli-Q Advantage A10超纯水仪（默克密理博）。

补肾活血膏（批号0826-1、0826-2、0826-3）;补骨脂素对照品（批号21010802：，含量以99.99%计）;异补骨脂素对照品（批号19101704：，含量以99.31%计）;对照品均购自成都格利普生物科技有限公司。试剂均为色谱纯，水为超纯水。

1.2色谱条件与系统适应性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水（55：45）为流动相;检测波长为246nm;[1]流速为1ml/min;柱温30℃;进样量为10µl。

1.3对照品溶液的制备

补骨脂素对照品（批号21010802：，含量以99.99%计）5.52mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀;异补骨脂素对照品（批号19101704：，含量以99.31%计）5.36mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀;分别精密量取补骨脂素对照品母液、异补骨脂素对照品母液各1ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得。

1.4供试品溶液的制备

精密量取补肾活血膏方浓缩液50ml，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2炙补骨脂阴性补肾活血膏的制备

由于补肾活血膏方中阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉均在收膏时加入，黄酒用于胶类的烊化，均不在本次实验的考察范围内，因此在制备供试品补肾活血膏（阴性对照）时将上述细料药剔除。

2.1制备方法  精密称取除炙补骨脂、阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉外其它处方中药饮片1份，加水浸泡12小时，煎煮60min，提取液趁热滤过，滤液浓缩至600ml。

3单因素考察

3.1浸泡时间

3.1.1浸泡方法  由于补肾活血膏方中阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉均在收膏时加入，黄酒用于胶类的烊化，均不在本次实验的考察范围内，因此在制备供试品补肾活血膏时将上述细料药剔除。

精密称取除阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉外其它处方中药饮片3份，加入8倍量的水，分别浸泡6小时、12小时、15小时，过滤，计算饮片吸水率，结果见表1。

3.1.2结论  表1实验数据显示，浸泡时间越长，饮片吸水率越大，但浸泡12小时与浸泡15小时时，吸水率变化不大，综合考虑，选择浸泡时间为12小时。

3.2煎煮次数

3.2.1煎煮方法  由于补肾活血膏方中阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉均在收膏时加入，黄酒用于胶类的烊化，均不在本次实验的考察范围内，因此在制备供试品补肾活血膏时将上述细料药剔除。

精密称取除阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉外其它处方中药饮片4份，加水浸泡12小时，再加入5 倍量的水，分别提取1、2、3、4次，每次1小时，提取液液趁热滤过，滤液浓缩至600ml。

3.2.2出膏率

精密称取上述补肾活血膏浓缩液各30ml，置干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷却30min，精密称定重量，计算出膏率，结果见表2。

3.2.3相对密度

照《中国药典》2020版四部通则0601相对密度测定法中的比重瓶法进行测定，结果见表2。

3.2.4含量测定

照“1含量测定”下方法进行含量测定，结果见表3。

3.2.5结论  综合上述实验结果，煎煮2次时，出膏率和相对密度均变化较明显，煎煮3、4次时，出膏率与相对密度变化不大。进行含量测定时，煎煮3次时补骨脂素和异补骨脂素含量明显增加，煎煮4次时，含量基本无变化。综合考虑，选择煎煮次数为3次。

3.3煎煮时间

3.3.1煎煮方法  由于补肾活血膏方中阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车

精密称取除阿胶、鹿角胶、龟板胶、紫河车粉外其它处方中药饮片4份，加水浸泡12小时，再加入5倍量的水，分别提取60min、120min、150min、200min，提取液趁热滤过，滤液浓缩至600ml。

3.3.2出膏率

精密称取上述补肾活血膏浓缩液各30ml，置干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷却30min，精密称定重量，计算出膏率，结果见表4。

3.3.3相对密度

照《中国药典》2020版四部通则0601相对密度测定法中的比重瓶法进行测定，结果见表4。

3.3.4含量测定

照“1含量测定”下方法进行含量测定，结果见表5。

3.3.5结论  综合上述实验结果，煎煮时间大于120分钟时，出膏率与相对密度明显增加，之后基本不變，但在含量测定时，煎煮150分钟时补骨脂素和异补骨脂素含量最高，煎煮200分钟时变化不明显。因此，选择煎煮时间为150min。

4 综合上述实验结果，结合实际制剂生产经验，对补肾活血膏的生产工艺进行优化，选择加水量为5倍，浸泡12h，煎煮3次，第一次1h，第二次45min，第三次45min。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2020年版（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2020：195

[2]吕天璞、张水定.从脾肺肾论治慢性阻塞性肺病缓解期[J].中国保健营养，2016，05：42