新型冠状病毒肺炎患者隔离结束后复查核酸检测结果为阳性病人研究

樊鹏威，许少奇，王斌，陶文，喻娓，刘建中

(武汉市第七医院检验中心,湖北 武汉)

0 引言

2019 年12 月在我国湖北省武汉市首先被检测到，随后施虐全球的冠状病毒是一种从未在人体中被发现的冠状病毒新毒株[1]。世界卫生组织已经将该病毒的肺炎命名为“COVID-19”[2]，同时，国际病毒分类委员会声明，将新型冠状病毒命名为“SARA-CoV-2”.在疫情暴发流行以来，随着对病毒研究的深入，我们对SARS-CoV-2 病毒的认识也越来越清楚，但仍会有一些未解之处。例如新型冠状病毒病人出院隔离结束后，复查核酸结果为阳性的原因分析。本文针对这类病人进行了初步的研究分析，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

采集2020 年4 月至5 月到武汉市第七医院新冠康复门诊复诊的新冠出院隔离结束病例1628 例，其中男779 人，女849 人，年龄为9-92 岁，平均(57.4±14.4)岁。所有确诊患者均符合国家卫生健康委员会印发的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》出院标准，即连续两次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本核酸检测阴性(采样时间至少中间间隔24 小时)。

1.2 对所有病例采集咽拭子进行实时荧光RT-PCR 检测SARS-CoV-2 核酸，检测试剂由上海之江生物科技股份有限公司提供。

1.3 试剂新型冠状病毒(SARS-CoV-2)特异性IgM/IgG 抗体(胶体金免疫层析法)，由英诺特(唐山)生物科技有限公司研制。

1.4 方法

1.4.1 SARS-CoV-2 病毒核酸检测

技术原理病原体核酸在裂解结合缓冲液存在的环境中释放并与磁珠结合，然后通过磁力棒将结合在磁珠上的核酸同磁珠一起分离，再用洗脱液成。

溶解与磁珠结合的核酸，使样品的核酸得到提取分离。

1.4.2 SARS-CoV-2 病毒特异性IgM/IgG 抗体检测

在出院隔离28 天后，采集康复患者血清标本，按试剂盒说明书进行SARS-CoV-2 病毒特异性IgM/IgG 抗体检测，室温放置15 分钟内观察结果。

1.5 统计学处理

应用SPSS 16.0 软件数据。

2 结果

2.1 在COVID-19 患者出院复诊核酸后，大多数出院病人核酸检测为阴性，仅20 例核酸检测为阳性，也就是我们俗称的“复阳病人”，复阳病人占总检测出院患者比率为1.23%。

表1 疾病康复期COVID-19 患者中复查核酸结果为阳性人数比例

2.2 在20 例SARS-CoV-2 病毒核酸检测结果阳性的COVID-19 出院患者中，检测其特异性IgM/IgG 抗体情况。

表2 二次检测核酸为阳性患者的IgM 和IgG 抗体情况分析表

在20 例“复阳”患者中，抗体检测仅有2 例IgM 和IgG抗体均为阳性，而其余18 例只要IgG 抗体为阳性。

3 讨论

研究表明SARS-CoV-2 病毒的潜伏期为1-14d，多数为3-7d，该疾病的传染源为COVID-19 患者及无症状携带者。虽然处于潜伏期的感染者多数没有明显的临床症状和体征，但具有传染性，可以作为疾病的传染源，增加切断传染源的难度[3-5]。因此，对出院后患者的追踪观察，防止出院患者“复阳”，对切断传染源显得尤为重要。

虽然病毒核酸检测(RT-PCR)已成为诊断COVID-19 患者的确诊方法，但是PCR 检测有很多局限性，受各方面条件限制，对实验室条件要求高、方法检测阳性率偏低等。ARSCoV-2 的特定S 蛋白和N 蛋白，会刺激机体的免疫系统引起抗体应答，机体最早出现的抗体是IgM， SARS-CoV-2 特异性IgM 抗体多在3-5d 后开始出现阳性，IgG 抗体滴度在恢复期较急性期有4 倍以上升高，若检测到IgM 和IgG 抗体阳性，可作为COVID-19 的诊断指标之一[6]。由此可知抗体的检测具有极其重要的价值，抗体检测可用做新型冠状病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标或者疑似诊断病例诊断中与核酸检测协同使用。

对出院隔离后核酸检测为阳性患者进行分析，我们可以看出，此类患者在全部出院患者所占比率非常低，仅为1.23%，没有之前研究报道那么严重，这可能于加强了出院患者的核酸检测数量有关，降低了病人检测的假阴性，降低复阳的可能性。在这些病毒核酸检测为阳性的患者中IgM90%为阴性，只有2 例病毒IgM 为弱阳性，可能是由于IgM 抗体水平还未降到正常水平。这类人群均为隔离观察，病毒的2 次感染问题可能性极低，病毒核酸复查为阳性存在主要原因我们分析有下面几方面的原因：①病人体内病毒载量较低，受标本采集方式限制，最好采集肺泡灌洗液进行核酸检测，有COVID-19 死亡患者病理解剖显示SARS-CoV-2 病毒仅残留在尸体肺细胞中，由病毒引起了肺部的实质性病理变化；②患者本人具有基础性疾病，导致免疫功能低下，而机体病毒没有真正被清除，引起核酸检测“复阳”；③受研发厂家试剂盒影响，试剂盒有缺陷，检测特异性较低，不能达到临床的要求.应该选择超敏方法可能会改善复阳患者样品中的RNA 阳性检测，排除假阴性；④在采集标本的过程，采集者没有严格按照操作规程进行，导致采集的患者标本不合格，检测结果呈假阴性。

我国应对本次COVID-19 疫情已经取得了阶段性成果，初步抑制了疫情的发展，主要的成功经验就是需要控制好传染性疾病的三要素：传染源、传播途径和易感人群。本文主要的目的就是要分析“复阳”的患者，找出其中规律性内容，进一步加深对SARS-CoV-2 病毒的认知，切断传染源。针对“复阳”患者可能产生的原因，我们建议一定要延长检疫时间，还要增加核酸检测次数，并对重点人群如有严重基础疾病或者老年患者进行持续性的医学观察，选用符合临床要求的检测试剂，只有充分认识了SARS-CoV-2 病毒，才能够有效战胜该疾病。