高效液相色谱法测定噻虫嗪·克百威种子处理悬浮剂

2021-01-09郝一影

河南化工 2020年12期

郝一影

(河南省化工研究所有限责任公司，河南郑州 450052)

克百威是一种氨基甲酸酯类高毒性的杀虫剂，具有高效、广谱、残留低、持效期较长的特点，可通过内吸、触杀、胃毒多种致毒方式达到目的，同时还有一定的杀卵作用；既适用于防治多种大豆、水稻、棉花、烟草等作物上的害虫，也可以作为专门的种子处理剂使用[1]。噻虫嗪是一种全新结构的杀虫剂，属于第二代烟碱类，具有高效低毒的特点，在推荐用量范围下使用对作物安全、无药害，可以用于果树、稻类、豆类、烟草、油菜、向日葵等多种作物[2]。不仅可以直接用于种子和茎叶处理，还可以用来进行处理土壤[3]。对噻虫嗪和克百威的分析方法多有报道，但目前噻虫嗪·克百威种子处理悬浮剂还未见关于高效液相色谱的分析方法[4-6]。本文使用高效液相色谱法，使用反相C18柱对试样中的噻虫嗪和克百威进行定量分析，该方法操作简便、分析速度快，精密度和准确度均符合分析要求，可以满足常规分析和生产中的质量控制。

1 实验部分

1.1 试剂和溶液

试验中的试剂和溶液如下：甲醇，色谱纯；纯净水；标品有克百威(质量分数≥98.3%)、噻虫嗪(质量分数≥98.5%)，标准品均由国家农药质量监督检验中心提供；噻虫嗪·克百威种子处理悬浮剂，某公司提供。

1.2 仪器

试验中的仪器如下：Agilent1200高效液相色谱仪；紫外检测器； Caprisil-C18(5 μm，150 mm×4.5 mm ) 色谱柱；超声波清洗器；过滤膜，0.45 μm。

1.3 色谱操作条件

室温条件下，体积比55∶45的甲醇-水作流动相，以1.0 mL/min的流速进样5 μL，在220 nm波长进行测试，各组分的保留时间分别为：噻虫嗪约2.1 min，克百威约6.2 min，见图1、图2。

图1 克百威和噻虫嗪标准品液相色谱图

图2 噻虫嗪·克百威悬浮种衣剂液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1标样溶液的配制

称取噻虫嗪标准品0.030 g(精确至0.000 2 g)，克百威标准品0.018 g(精确至0.000 2 g)，置于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇放置于超声波清洗器中，超声使其充分溶解，取出后冷却至室温，用甲醇定容，摇匀后静置，备用。

1.4.2试样溶液的配制

称取0.60 g 样品(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇放置于超声波清洗器中，超声使其充分溶解，取出后冷却至室温，用甲醇定容，摇匀后静置，过滤，备用。

1.4.3测定

在1.3所述条件下，当仪器基线运行平稳后，标样溶液被连续注入几次，比较各次的特征色谱峰的保留时间和峰面积，如果相邻两针的保留时间和峰面积的变化均小于1.5%，那么可以进样进行测定，测试按照标样、试样、试样、标样的顺序进行。

1.5 计算

分别对测得的2针标准溶液和试样溶液的各成分的特征峰的峰面积进行平均计算后，按下式计算噻虫嗪、克百威的质量分数(X)。

式中：A1，标样溶液中噻虫嗪(或克百威)峰面积的平均值；A2，试样溶液中噻虫嗪(或克百威)峰面积的平均值；m1，噻虫嗪(或克百威)标样的质量，g；m2，试样的质量，g；P，标样中噻虫嗪(或克百威)质量分数，%。

2 结果分析

2.1 流动相的选择

为了实现噻虫嗪和克百威的有效分离，分别使用甲醇-水、乙腈-水作为流动相进行试验，其中乙腈-水作为流动相时噻虫嗪的峰形对称性差，故流动相选择甲醇-水。对不同比例的甲醇-水对分离效果的影响进行试验，分别为80∶20、65∶35、55∶45、40∶60。结果表明：当流动相中甲醇比例过高时，流出时间过短，甲醇比例低时，克百威的保留时间较长，综合考虑选择体积比55∶45为试验流动相。此时噻虫嗪和克百威保留时间适中，峰形对称，分离效果好，可以满足分析要求。

2.2 检测波长的选择

通过Agilent 1200高效液相色谱仪的紫外光谱采集功能，经紫外光谱扫描噻虫嗪在215、250 nm左右均有很好的吸收，克百威在210 nm有最大的吸收峰，考虑低波长时试剂的干扰较大，经优化试验，采用220 nm为检测波长。

2.3 线性关系的测定

分别称取噻虫嗪标准品0.030 4 g、克百威标准品0.018 4 g置于同一50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后，用移液管分别准确移取2.0、5.0、10.0、15.0 mL于20 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后进行测定。测试结果被绘制成标准曲线，如图3、图4所示，其中横坐标表示各成分的进样浓度，纵坐标表示其特征峰的峰面积。各有效成分的线性回归方程分别为：噻虫嗪y=11 020x+17.419，相关系数为0.999 9；克百威y=8 471.5x-38.873，相关系数为0.999 3。