小青龙汤联合肺肠同治法对支气管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影响

陈英妹

支气管哮喘是临床常见的呼吸系统疾病，患者多表现为咳嗽、喘息、胸闷等症状，部分患者由于病情延长、反复发作，会对呼吸系统造成严重损伤。中医治疗能够在针对致病机制进行治疗的同时，还能够对患者的机体运行进行调节，加强患者自身的免疫能力，加强治疗效果[1]。支气管哮喘的病理机制是由多种细胞参与的气道慢性炎症。支气管哮喘小鼠模型的建立能够对小青龙汤和肺肠同治法的药效作用机制进行研究。因此，本研究以支气管哮喘小鼠作为研究对象，探讨小青龙汤联合肺肠同治法对支气管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年12月—2019年12月满6周龄的健康BALB/c小鼠60只，采用致敏和雾化激发的方法建立支气管哮喘小鼠模型，通过随机数字表法分为对照组和观察组各30只。对照组中雌鼠16只，雄鼠14只；周龄6～8周，平均周龄(7.42±0.28)周；体质量20～22 g，平均体质量(20.17±0.57) g。观察组中雌鼠15只，雄鼠15只；平均周龄6～8周，平均周龄(7.69±0.13)周；体质量20～22 g，平均体质量(20.28±0.49) g。2组小鼠的性别、周龄和体质量资料比较，差异不具有统计学意义(P>0.05)。

1.2 诊断标准通过卵清蛋白(OVA)诱导建立支气管哮喘小鼠模型，首先将氢氧化铝1mg、OVA20 μg、生理盐水0.2 ml混合ip抗原液，于第0、7和14天对所有小鼠进行致敏注射；其次将4 ml的1%OVA雾化液对5L透明玻璃容器内的所有小鼠持续激发30 min，于第21～27天持续进行7 d。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法对照组接受小青龙汤治疗。方药组成：麻黄5 g，桂枝5 g，细辛3 g，干姜5 g，甘草10 g，白芍10 g，五味子5 g，姜半夏5 g。颗粒剂，5剂，每天1剂，早晚各服用一次。观察组接受小青龙汤联合肺肠同治疗法治疗，小青龙汤治疗同对照组。用宣肺通络平喘汤加减治疗。方药组成：炙麻黄6 g，苦杏仁 9 g，炙紫苏子10 g，蝉蜕6 g，姜半夏10 g，黄芩6 g，麻黄根10 g，枳实10 g，炒莱菔子10 g，连翘10 g，瓜蒌仁6 g，甘草5 g。颗粒剂，5剂，每天1剂，早晚各服用1次。

1.3.2 观察指标①比较2组小鼠治疗前后的细胞学水平。2组小鼠于最后一次雾化激发24 h内采用乙醚麻醉处死，抽取肺泡灌洗液离心处理后去除上清液的沉渣进行推片和染色处理，采用100×10油镜计算细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞个数。②比较2组小鼠治疗前后的IL-4和IFN-γ水平。取肺泡灌洗液离心处理后的上清液，采用小鼠IL-4和IFN-γ试剂盒对2组小鼠的IL-4和IFN-γ水平进行检测。

2 结果

2.1 2组小鼠治疗前后的细胞学水平比较治疗前2组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞水平比较，差异均不具有统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞水平均低于对照组小鼠(P<0.05)。见表1。

表1 2组小鼠治疗前后的细胞学水平比较 (只，

2.2 2组小鼠治疗前后的IL-4和IFN-γ水平比较治疗前2组小鼠的IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平比较，差异均不具有统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组小鼠的IL-4和IL-4/IFN-γ水平低于对照组小鼠(P<0.05)，观察组小鼠的IFN-γ水平高于对照组小鼠(P<0.05)。见表2。

表2 2组小鼠治疗前后的IL-4和IFN-γ水平比较 (只，

3 讨论

支气管哮喘由于多种细胞、介质等相互作用的参与机制，会使气道结构发生气道壁增厚等结构的异常变化，产生气道的高反应性，产生对气道平滑肌收缩性的刺激，导致气道狭窄加重，出现咳嗽、气促、胸闷等支气管哮喘症状。在临床治疗中，常使用糖皮质激素吸入治疗，虽然能够起到改善临床症状的治疗作用，但缺乏对多细胞、介质等参与的致病机制的抑制，无法有效治愈病情[2]。所以支气管哮喘常会表现为病情迁延、反复发作等特性，导致患者持续性气道损伤，严重影响呼吸功能，影响患者的日常工作和生活。早在《黄帝内经》中就已出现对于支气管哮喘之证的相关记载，至《伤寒杂病论》中对于支气管哮喘的证候记载更为明确，也已具有成熟的治疗组方记载，直至《诸病源候论》中已经详细记载了对病因机制的论述。经过多年对于支气管哮喘的研究与治疗，中医具有独特的辨证理论基础与多种施治组方实践[3]。中医治疗能够从患者自身的免疫机制进行调节，改善患者的气道反应以及细胞、介质等水平，达到既能够改善临床症状又能够抑制致病机制的良好治疗效果。本研究中，治疗前2组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞水平比较，差异均不具有统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞水平均低于对照组小鼠(P<0.05)，说明小青龙汤联合肺肠同治法能够有效降低支气管哮喘小鼠的细胞学水平。在中医理论中，针对支气管哮喘的致病机制有着详实的理论研究，明确到“哮”与“喘”时气息与声音的区别等[4]。所以在进行辨证施治之时，能够对支气管哮喘的病声、病态、病机等证候进行针对性的组方治疗。小青龙汤组方源自于《伤寒杂病论》，组方中以麻黄和桂枝作为君药，干姜和细辛作为臣药，白芍和五味子作为佐药等，具有止咳平喘、解表散寒、敛肺养津、燥湿化痰等作用。其药效作用机制在于对气道异常分泌进行抑制，同时刺激气道平滑肌的扩张，减轻毛细血管通透性，达到止咳平喘的治疗效果。肺肠同治法是基于对肺与肠互为表里的气机运行机制在支气管哮喘致病机制中的影响作用，促进肠道运行、加强肠道营养等，能够维护肠道微生态环境的平衡，加强机体代谢功能和免疫功能的运行，达到整体运行机制的有效改善，达到肺与肠的氧化与抗氧化机制平衡，达到对支气管哮喘的有效治疗[5]。所以在对2组小鼠治疗后的细胞学水平的检测中，接受小青龙汤联合肺肠同治法治疗的观察组小鼠的细胞学水平得到了更有效降低。本研究中，治疗前2组小鼠的IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平比较，差异均不具有统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组小鼠的IL-4和IL-4/IFN-γ水平低于对照组小鼠(P<0.05)，观察组小鼠的IFN-γ水平高于对照组小鼠(P<0.05)，小青龙汤联合肺肠同治法能够有效降低支气管哮喘小鼠的IL-4水平，提高IFN-γ水平。支气管哮喘由于气道炎症的致病机制，活跃的炎症细胞会对肺组织的结构和功能进行破坏，导致呼吸功能的损伤。IL-4因子由小鼠的h2亚群分泌产生，能够引发气道组织的过敏性反应和气道组织的损伤，对于巨噬细胞、T细胞等免疫细胞具有较大影响[6]。IFN-γ原名为巨噬细胞活化因子，是由h1细胞分泌产生，加强巨噬细胞的活化补体等，对于免疫调节系统具有重要参与作用，有助于对细胞内病原体进行清除[7]。小青龙汤能够针对小鼠的呼吸系统病理机制进行改善和调节，肺肠同治法能够针对小鼠的肺肠相互作用机制进行改善和调节，联合治疗能够将2种治疗方法的不同药效机制进行联合发挥，达到相辅相成的双重效果，通过对2组小鼠进行组方治疗研究，在IL-4和IFN-γ水平的检测中，2组小鼠治疗后的水平表现均好于治疗前[8]。IL-4水平有所降低，IFN-γ水平有所升高，说明组方治疗具有良好的治疗效果；而观察组小鼠治疗后的IL-4和IFN-γ水平表现更优于对照组小鼠，更低的IL-4水平能够减少小鼠的气道炎症反应，缓解支气管哮喘的临床症状，更高的IFN-γ水平维持细胞学水平的平衡，抑制气道局部的炎症细胞浸润，说明小青龙汤联合肺肠同治法2种治疗机制的共同作用能够针对支气管哮喘小鼠达到更好的治疗效果。

综上所述，小青龙汤联合肺肠同治法能够有效降低支气管哮喘小鼠的细胞学和IL-4水平，提高IFN-γ水平。