溃疡性结肠炎内镜下评分与细胞免疫指标的相关性分析

张静文

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种慢性炎症性肠病，临床表现为腹痛腹泻等，其治疗效果与结肠黏膜愈合情况有关， 通常采用内镜进行评估［1］。 UC 内镜下严重性评分（ulcerative colitis endoscopic index of severity，UCEIS）是一种有效的内镜评分方法，能够更为细致地对内镜下黏膜病变的严重程度进行分级［2］。缺点是内镜有创且耗时长，并有可能加重UC 病情，因此，需要采用简单、敏感、非侵入性的指标代替内镜， 实时反映UC 患者肠道情况［3］。 目前 UC 的发病机制未完全明确，有研究显示UC 与机体的细胞免疫相关。 T 淋巴细胞群及自然杀伤（natural killer，NK）细胞是外周免疫系统的重要组成部分，T 细胞的反应增强及NK 细胞水平下降，会引起黏膜菌群的反应，导致免疫异常，引发结肠性炎性变化［4］。 该文通过研究 UCEIS 与细胞免疫指标的相关性，探讨其对UC 的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2018年1月—2019年12月笔者医院就诊的溃疡性结肠炎患者60 例作为研究组，纳入标准：（1）符合溃疡性结肠炎［5］诊断标准，并进行内镜检查；（2）年龄为 18～70 岁。 排除标准：（1）存在严重心、肺、肾或者其他恶性肿瘤者；（2）存在自身免疫疾病者；（3）伴有感染性肠炎或其他慢性疾病者；（4）存在结肠息肉或有结肠切除史者；（5）近期有非甾体消炎药服用史者。 研究组男32 例，女28 例，年龄 20～69 岁，平均（42.13±5.28）岁。 同时选取来医院检测的健康者50 名作为对照组， 男26名，女 24 名，年龄 19～70 岁，平均（42.34±5.17）岁。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 所有受试者均知情并同意参与该研究；该研究经医学伦理委员会同意。

1.2 方法 （1）采用 UCEIS［6］评价 UC 患者的严重程度：UCEIS 总分为0～8 分，具体为血管纹理（正常0 分，模糊 1 分，消失 2 分）、出血（无出血 0 分，血性黏液1 分，肠腔轻度出血2 分，肠腔中度重度出血3分）、糜烂和溃疡（黏膜正常0 分，黏膜粗糙、糜烂1分，浅表溃疡2 分，深凹溃疡3 分），最后得分为三项相加，其中 2～6 分为轻、中度，7～8 分为重度。 （2）两组细胞免疫指标比较：所有受试者在清晨取肘静脉血5 ml，离心后取上层清液，用EDTA 抗凝，采用流式抗体标记， 用美国BD 公司流式细胞仪检测血清中 CD3+、CD4+、CD8+、NK 细胞水平，并计算 CD4+/CD8+。

图1 各指标预测UC 时的ROC 曲线

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据处理，计量资料以（±s）表示，组间比较采用t 检验； 计数资料以率 （%） 表示， 采用 χ2检验，UCEIS 与细胞免疫指标的相关性采用Pearson 相关性分析，细胞免疫指标对UC 的预测价值采用ROC曲线，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 UC 患者的 UCEIS 情况 根据 UCEIS， 研究组轻、中度 48 例，UCEIS 为（4.29±1.27）分，重度 12例，UCEIS 为（7.42±0.49）分。

2.2 2 组细胞免疫指标比较 研究组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 细胞水平均低于对照组，CD8+水平高于对照组（P＜0.05），结果见表 1。

2.3 UCEIS 与细胞免疫指标的相关性分析 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 细胞与 UCEIS 呈负相关，CD8+与 UCEIS 呈正相关（P＜0.05），结果见表 2。

表1 2 组细胞免疫指标比较（±s）

表1 2 组细胞免疫指标比较（±s）

组别 n CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+ NK 细胞（%）观察组 60 67.12±4.38 33.16±4.29 26.42±3.25 1.25±0.39 13.27±2.13对照组 50 69.35±5.24 39.28±5.11 23.48±2.53 1.67±0.52 17.42±3.25 t 值 - 2.432 6.829 5.213 4.835 8.038 P 值 - 0.017 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 UCEIS 与细胞免疫指标的相关性分析

2.4 细胞免疫指标预测UC 时的ROC 曲线分析预测 UC 时，联合检测的 AUC 为 0.931，高于 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及 NK 细胞（P＜0.05），结果见表 3、图 1。

表3 细胞免疫指标预测UC 时ROC 下曲线面积比较

图1 见封三。

3 讨 论

UC 是一种非特异性肠道慢性炎症疾病， 病变从直肠向结肠近端发展，该病难治愈，且易反复发作，通常以黏膜愈合情况作为评判标准，一般采用内镜检查黏膜，进行客观评估［7］。UCEIS 是近年发展起来的一种内镜评分方法，能从血管纹理、出血情况、糜烂和溃疡这三个方面评价UC 的严重程度，且对于UC 患者的转归及预后有较高的准确度［8］。 袁柏新等［9］研究表明UCEIS 与患者的外周血炎症水平相关，可通过检测外周血炎症相关指标（白细胞计数、血沉、C 反应蛋白、清蛋白）来评估患者病情的转归。 但是内镜具有侵入性，且不能实时反映患者黏膜情况，使患者感觉痛苦，因而需要选择一些简便易得的指标，替代内镜，实时反映患者情况，从而方便治疗及观察，而细胞免疫指标简单易得，能够较好地反映患者的免疫功能［10］。

T 淋巴细胞亚群失调是导致UC 发展的重要原因， 肠黏膜屏障功能异常是其发病的分子基础［11］。CD3+是外周血成熟T 淋巴细胞的标志，是全身机体免疫的基础［12］。 CD4+细胞又称辅助性 T 细胞（Th）在抗原递呈、 淋巴细胞的活化过程中起重要作用［13］。Th 可分为 Th1 和 Th2，Th1 主要介导细胞免疫，能帮助CD8+淋巴细胞增殖及分化； 而Th2 则参与B细胞增殖，介导体液免疫反应，能提高机体免疫，两者又互为抑制细胞［14］。CD8+细胞也称细胞毒 T 淋巴细胞（CTL），通过释放穿孔素细胞毒性分子破坏靶细胞， 作用于局部肠黏膜造成黏膜上皮细胞坏死，导致溃疡、水肿，并抑制正常的免疫应答，使UC 患者炎症加剧、组织损伤更严重［15］。 通常情况下，CD4+/CD8+是衡量机体免疫系统的主要因素，而当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，就可导致机体免疫紊乱，并发生一系列的病理变化［16］。 该研究中，研究组的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于对照组，CD8+水平高于对照组， 说明UC 患者的免疫功能出现异常，可通过这几项细胞免疫指标来监测病情的变化。 沈浩等［17］研究表明 UC 患者存在 T 细胞亚群紊乱的现象，各亚群间功能无法协调，免疫反应异常增强，导致细胞损伤。

NK 细胞是不需要抗体参与就能杀死靶细胞的广谱杀伤细胞， 具有免疫监视及免疫调节的作用，占外周血淋巴细胞的 5%～15%［18］。 而研究［19］表明NK 细胞缺陷型小鼠易患自发性结肠炎， 说明NK细胞水平与肠炎相关。 NK 细胞活化后可通过分泌INF-7、IL-2 等细胞因子发挥免疫调节作用，使机体产生 Th1 型免疫［20］。 该研究中 NK 细胞水平均低于对照组，说明UC 患者的NK 细胞减少，导致机体固有的免疫功能下降，使得黏膜发生免疫异常［21］。 武铁龙等［22］研究表明活动期UC 患者外周血的NK 比例下降，且随炎症加重而降低，主要是由于NK 细胞由外周血循环至肠黏膜中，从而发挥抗炎作用。

而 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 细胞水平与UCEIS 呈负相关，CD8+与 UCEIS 呈正相关， 说明随着UC 患者免疫功能与其肠道损伤程度存在密切关系，这几项指标均易检测，因而 CD3+、CD4+、CD8+及NK 细胞水平可作为评估UC 患者严重程度的非入侵性指标。 预测UC 时，联合检测的AUC 为0.931，高于 CD3+、CD4+、CD8+及 NK 细胞，说明可考虑联合检测 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及 NK 细胞来进行UC 病情的预测。 虽然理论认为病理组织学变化更能反映出UC 的本质， 而该研究没有进行常规活检，无法研究细胞免疫指标与内镜组织学病变严重程度的相关性，因而还需结合组织学检查，以便更准确评估病情。