大别山冬青组培苗工厂化生产技术

方宇鹏 （池州职业技术学院，安徽省池州市 247000）

组培苗工厂化生产技术是在特定的条件下，应用组织培养技术加快苗木繁殖的方法，是全新的育苗技术之一，对一些繁殖系数较低或难以通过种子繁殖的珍贵树种尤为重要[1]。大别山冬青(Ilex dabieshanensisK.Yao & M.B.Deng)又名小苦丁茶，是冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)常绿阔叶乔木，原产安徽大别山及江西等地[2]，其叶色青翠，果实红艳，生长旺盛，且耐修剪性强，适应性强，耐贫瘠和干旱环境，病虫害发生率低，是园林绿化上的优良、珍贵树种[3]。目前，大别山冬青在生产中主要通过扦插进行繁殖，但其扦插繁殖系数较低[4]，导致其种苗在市场上较为短缺。因此，为开发推广大别山冬青这种珍稀植物品种，在短期内获得大量优质种苗，满足其生产应用的需要，笔者对大别山冬青组培快繁技术进行了研究，并取得了一定的成效。现将研究的大别山冬青组培苗工厂化生产技术总结介绍如下，以期为推动大别山冬青的园林应用，丰富我国绿化树种奠定基础。

1 外植体选取

选择由安徽省安庆市太湖县宏安冬青树种植农民专业合作社提供的5年生扦插苗，取无病虫害、生长旺盛的一年生枝条作为外植体来源。

2 外植体处理

用自来水将具有腋芽的一年生枝条冲洗30 min，然后去除叶片，留少量叶柄，放入盛有洗衣粉溶液的烧杯中漂洗，并不断搅动，冲洗干净后沥干，放置于超净工作台上，用75%酒精消毒20 s，无菌水冲洗5次后，将其置于0.1%升汞液中消毒8 min，然后用无菌水冲洗3～5次，再将其表面的水分用无菌纸吸干，最后将经消毒的茎段（外植体）剪切成长0.5～1.0 cm的茎段，每茎段带1～2个腋芽，接种到初代培养基上诱导腋芽萌发[5]。

3 组培苗扩繁

3.1 腋芽诱导培养

以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L作为培养基进行腋芽诱导，每个培养瓶中分别接种3个茎段。外植体接种后置于温度（23±3）℃、光照2 000 Lux、16 h/d的条件下培养，腋芽诱导率可达100%。

3.2 继代增殖培养

将前期初代培养诱导后产生的新梢，切割成茎段，每个茎段带1个新腋芽，处理后转接到MS+6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.3 mg/L培养基中，每瓶接种2个茎段，增殖系数可达4.6。

3.3 生根培养

将长至3～4 cm高的健壮大别山冬青试管苗接种到1/2 MS+NAA 0.3 mg/L +IBA 0.2 mg/L生根培养基中，其生根率可达95%。

3.4 驯化移栽

在大别山冬青组培苗生根后、株高达4 cm左右时进行炼苗与移栽。选择根系发达、生长健壮的组培苗，先将瓶盖打开，覆上保鲜膜在人工气候室内放置2～3 d。再从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，移栽至消毒过的蛭石（V）∶珍珠岩（V）∶泥炭土（V）=2∶1∶2的混合基质中，要求控制环境条件，前期适当遮阳，保持一定湿度，成活率可达85%。

4 结论与讨论

大别山冬青作为优良的园林绿化珍贵树种，经过组织培养，能进行较大规模的生产，较好地满足了当地市场对大别山冬青的需求。值得注意的是，在组培苗实际生产中，驯化移栽是极为重要和关键的一个环节，组培苗移栽的成活与否与基质、环境条件等密切相关。因此，需严格做好组培苗移栽环境的调控工作。