脂联素和骨钙素在子宫内膜组织中表达及其临床意义*

顾佳士，叶慧英，戴海燕，朱建龙，郭丽梅

上海市浦东医院/复旦大学附属浦东医院：1.妇产科；2.病理科,上海 201399

子宫内膜癌是指原发于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，是女性生殖道三大恶性肿瘤之一[1]。肥胖和胰岛素抵抗是子宫内膜癌发生、发展的高危因素[2]。脂联素为脂肪因子，与肥胖、高血压、糖尿病等多种临床疾病相关，且被证实参与多种妇科肿瘤的发生、发展[3]。另有研究证实，骨钙素可通过促进脂联素的分泌从而增强胰岛素基因蛋白表达并改善胰岛素的敏感性，参与调节能量代谢[4]。本研究通过检测子宫内膜癌组织中脂联素和骨钙素的表达情况，探讨其与子宫内膜癌之间的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1月至2019年1月上海市浦东医院收治的40例子宫内膜癌患者作为内膜癌组，年龄为42～75岁，平均(55.23±5.74)岁。另选取同期在本院确诊为子宫内膜不典型增生的30例患者作为增生内膜组，年龄为40～63岁，平均(57.23±3.25)岁；以及选取同期因子宫肌瘤在本院行全子宫切除术且术后诊断为正常子宫增殖期内膜的30例患者作为正常内膜组，年龄为50～69岁，平均(58.43±8.21)岁。所有患者均不合并其他恶性肿瘤、糖尿病、高血压及代谢性疾病，术前也均未接受放、化疗及内分泌方面治疗。所有标本均经甲醛固定，石蜡包埋并经过两名以上病理科医生复诊确认，本研究经过医院伦理委员会的批准，患者均知情同意。

1.2方法

1.2.1免疫组化染色 将标本蜡块切片，厚4 μm，脱蜡、水化，抗原热修复，阻断内源性过氧化物酶，滴加一抗和二抗，行PV-6000免疫组化染色。脂联素和骨钙素兔抗人多克隆抗体及SP试剂盒均购自上海容成生物技术有限公司。

1.2.2免疫组化结果判定 脂联素和骨钙素的细胞质或细胞膜被染成黄色即判定为阳性细胞。技术方法采用半定量法。在高倍光镜(200倍)下随机选取5个视野，计算每个视野的阳性细胞所占百分比、染色强度并进行评分，如果染色强度评分与阳性细胞所占百分比评分之积≥3分即为免疫反应阳性，<3分即为免疫反应阴性[5]。

1.3统计学处理 采用SPSS22.0统计软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，相关性分析采用线性回归分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1各组脂联素及骨钙素阳性表达率比较 正常内膜组、增生内膜组和内膜癌组脂联素和骨钙素阳性表达率逐渐降低，差异有统计学意义(P<0.05)。内膜癌组与增生内膜组脂联素和骨钙素阳性表达率比较，差异有统计学意义(P<0.05)；正常内膜组与增生内膜组脂联素和骨钙素阳性表达率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组的脂联素及骨钙素阳性表达率比较[n(%)]

2.2内膜癌组脂联素和骨钙素的表达与临床病理参数之间的关系 内膜癌组脂联素的表达与肿瘤病理类型、临床分期、淋巴结转移及肌层浸润深度无关(r=0.014、0.002、0.172、0.032，P>0.05)。内膜癌组骨钙素的表达和肿瘤病理类型相关(r=0.455，P<0.05)，但与肿瘤的临床分期、淋巴结转移及肌层浸润深度无关(r=0.153、0.024、0.051,P>0.05)。见表2。

表2 内膜癌组脂联素和骨钙素的表达与临床病理参数之间的关系(n)

2.3内膜癌组脂联素与骨钙素的相关性 内膜癌组脂联素的表达水平与骨钙素的表达水平呈正相关(r=0.307,P<0.05)。

3 讨 论

脂联素是由内脏脂肪分泌的一种脂肪细胞因子。人脂联素的基因全长16 kbp,包含了3个外显子和2个内含子，定位于3q27染色体[6]。有研究表明，脂联素除了由脂肪细胞分泌，多种细胞如肝细胞、骨骼细胞、胎盘组织等也分泌少量的脂联素，低水平的脂联素与肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗和子宫内膜癌的发生密切相关[7]。MA等[8]研究表明，在调整年龄、体质量指数、血糖水平等相关影响因素后，低水平的血清脂联素是子宫内膜癌发生的独立危险因素。有研究发现，脂联素主要与脂联素受体结合，从而激活了磷酸腺苷活化蛋白激酶，抑制子宫内膜癌细胞增殖，导致癌变[9-10]。本研究内膜癌组脂联素阳性表达率明显低于正常内膜组，差异有统计学意义(P<0.05)，说明脂联素参与了子宫内膜癌的发生和发展，与文献[7-8]研究结果一致。脂联素与子宫内膜癌的分化、分期、淋巴结转移及肌层浸润深度的关系目前尚无统一结论。有研究表明，脂联素与肿瘤的分化程度有关，分化程度越低，脂联素水平越低[11]，而王文文等[12]研究表明，子宫内膜癌组织中脂联素的表达与临床分期和肌层浸润深度等均无关。本研究未发现子宫内膜癌组织中脂联素的表达和病理类型、临床分期、淋巴结转移和肌层浸润深度相关。

骨钙素是成熟成骨细胞合成和分泌的一种特异的非胶原骨基质蛋白。有研究表明，当骨钙素缺乏时可导致胰岛素分泌减少、胰岛素敏感性降低、葡萄糖耐量异常及脂联素的表达降低，进而导致能量代谢的异常[13]。已有多项研究证实，骨钙素和肿瘤的发生、发展具有一定的相关性。LIU等[14]研究显示血清骨钙素水平与肝癌病情严重程度呈负相关。有研究显示，肿瘤组织中骨钙素的免疫组化测定有助于提高恶性肿瘤的诊断敏感性[15-16]。本研究内膜癌组骨钙素阳性表达率低于增生内膜组和正常内膜组，差异有统计学意义(P<0.05)，说明骨钙素和子宫内膜癌的发生有关。本研究显示，骨钙素的表达与临床分期、淋巴结转移和肌层浸润深度无关，但与子宫内膜内膜样腺癌有关，这进一步说明骨钙素和糖代谢异常、胰岛素抵抗导致的Ⅰ型雌激素依赖型子宫内膜癌密切相关。王计艳等[17]研究显示在2型糖尿病患者血清中骨钙素和脂联素的表达呈正相关。另外有研究发现，骨钙素可以通过下调CD68和单核细胞趋化蛋白1表达，抑制肥胖小鼠脂肪组织巨噬细胞聚集及单核细胞趋化蛋白1分泌,以及通过降低小鼠体质量和体内脂肪水平使胰岛素敏感性增强[18]。本研究结果显示，内膜癌组脂联素的表达水平与骨钙素的表达水平呈正相关(r=0.307，P<0.05)，推测骨钙素可通过脂联素介导能量代谢的途径作用于内膜组织，骨钙素也可以通过直接作用于子宫内膜组织从而导致病变的发生。

总之，脂联素、骨钙素的表达在子宫内膜癌的发生和发展过程中起到重要作用，二者联合检测可为子宫内膜癌的早期诊断、治疗和预后提供新的思路。