贵州山区鲟鱼规模化人工繁殖技术要点

2020-12-16张显波韩碧泽陈飞雄周其椿李建光

农技服务 2020年9期

赵飞，张显波，韩碧泽，陈飞雄，周其椿，杨兴，李建光

(贵州省农业科学院水产研究所/贵州省特种水产工程技术中心，贵州贵阳 550025)

鲟鱼隶属于硬骨鱼纲辐鳍亚纲、软骨硬鳞总目鲟形目、鲟科、鲟属，是现存最古老的脊椎动物之一，有活化石之称[1]。鲟鱼生存的温度为1～35℃，最适温度为15～25℃[2]。贵州山区水资源丰富，水质优良。据不完全调查，贵州地下水年排泄量为259亿m3，深层地下水储量181亿m3，大部分水温保持在15～20℃，全省还具有大量大中型水库、河流等养殖鲟鱼的良好资源条件，是养殖鲟鱼的理想地。1999年贵州开始引进鲟鱼进行商业养殖试验，并陆续在全省各地推广，取得了良好的效果[3-8]。近年来，贵州鲟鱼养殖年产量位居全国前列，并对鲟鱼人工繁殖进行了研究[9-10]，取得了一定效果，但目前养殖的鲟鱼苗种大部分从外省购入。鉴于此，笔者等对鲟鱼人工繁殖进行深入研究，总结出规范化繁殖技术，有助于提升省内苗种供应能力，促进贵州渔业发展。

1 亲鱼培育

1.1 亲鱼来源

经多年养殖试验表明，具有生长速度快、适宜贵州水环境条件的鲟鱼种类主要是西伯利亚鲟(Acipenserbaeri)、史氏鲟(Acipenserschrenckii)和杂交鲟3种[3，11-15]。亲本应来源于经国家批准的苗种繁育场，并经检验合格的纯种鲟鱼。鲟鱼亲本需达8龄以上，体重20 kg以上，体质健壮，无病无伤。亲鱼入场后对其进行被动集成应答器(passive integrated transponder，PIT)标记[16]，便于后期对亲本的生长、繁殖情况做记录。PIT标记后及时对伤口清理消毒，避免伤口感染病菌。

1.2 亲鱼饲养管理

1.2.1 鱼池亲鱼培育池以长方形水泥池为佳，一般规格为20 m×4 m×1.5 m，有条件的尽可能修建大些。亲鱼培育池主要由流水渠、鱼池和排水渠3个部分组成，之间有20～30 cm高程差，便于排放残饵和粪便。鱼池进、出水口设置2层拦网，防止杂质入塘和鱼外逃。水体主要采用连通器原理进行交换，以便于调节水位和排出底部污物。

1.2.2 水源其要求水质较好和水量充足，如山泉水、水库水或河水等。鲟鱼为亚冷水性鱼类[5]，水花阶段最适水温15～19℃，苗种阶段为10～22℃，pH 6.5～8.0，溶氧>6 mg/L。

1.2.3 饲养鲟鱼亲鱼饲料要求高蛋白(一般使用动物源蛋白)，含量在40%以上；低脂肪，含量在8%～10%；添加维生素如华罗多维、Vc、EPA/DHA等[17-18]。若有条件，最好添加优质鱼油自制颗粒饲料，其营养全面、均衡，适口性好，便于吸收，满足性腺发育所需营养，培育亲鱼的效果好，其鱼卵饱满度、成熟度高于投喂配合饲料。水温16℃以上时投喂饲料，投饲率约为鱼体重的1%左右，不宜太高，否则会导致脂肪过剩，减弱鲟鱼的催产效应。水温低于16℃停止投喂饲料，让亲鱼停食过冬，消耗体内过多脂肪。次年3月水温升高到18℃时进行人工繁殖。

1.3 亲鱼筛选

1.3.1 外部观察选择体质健壮、无病无伤、游动活泼的亲鱼，通过外观初步判断雌雄性别。成熟雌鱼腹部饱满膨胀、柔软有弹性，肚皮薄，生殖孔红润外突；成熟雄鱼腹部较瘦小，稍呈凹槽状，性腺发育好的个体，轻压其腹部有精液从生殖孔流出，精液用显微镜观察是否有精子运动，遇水精子游动迅速说明精子活力强。

1.3.2 穿刺法观察采用穿刺方法从鲟鱼亲本活体分离卵粒[19]，观察鱼卵大小、色泽及发育状态，雌性亲本需选择性腺发育处于IV期中以上，卵为椭圆形、深褐色，卵粒大小均匀，色素圈明显。用小刀顺着动物极与植物极切开，测量PI值(卵径和核的极化程度)，其值越小说明卵子成熟越好，即卵黄偏离中心(卵径在3 mm左右，极斑明显，边缘清晰)。注意卵穿刺处要消毒。

轻压雄鱼腹部没有精液流出，也需要进一步采用穿刺法检测精巢发育状态。用取卵器取出少许精槽组织洒在水中立即散开，说明精巢发育到IV期末期或V期，可用于繁殖。

2 人工催产

2.1 催情

人工养殖环境缺乏适宜的水流、温度、产卵场等刺激，亲鱼不能产生足量的性激素，达到性成熟的鲟鱼很难自行排卵、排精，不能实现自然繁殖，需要外源促性激素的作用。

2.1.1 催情剂选用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2，宁波第二激素厂生产)催情的效果较好[20-21]。催情效应时间长短主要由亲鱼性腺的发育程度、催产时机、水温等综合因素决定，在同一温度范围，效应时间24 h左右排出的卵子质量较好，受精率、孵化率均较高；效应时间30 h以上的卵子质量较差，受精率、孵化率均偏低。因此，要控制好影响催情效应时间长短的因素，确保效应时间在24 h左右。

2.1.2 注射雌鱼采用二次注射，第1次注射LRH-A2总剂量的1/3左右，12～14 h后注射第2次。雄鱼采用雌鱼剂量的一半一次性注射。首次催情亲鱼建议采用最低剂量3 μg/kg，对同一尾鱼的催情剂量逐年提升，年龄大的亲鱼应加大剂量。注射部位为背骨板左右两侧两骨板之间的肌肉部位或胸鳍基部。催情后的亲鱼放置于产卵池，定时观察池中有无鱼卵。

2.2 授精与脱黏

2.2.1 采精、采卵发现产卵池底有深褐色游离卵粒出现时准备采卵采精设备，1～2 h开始采集，采精采卵最好同时进行，保证精子活力，提高鱼卵受精率。用担架将亲鱼抬至手术台，充分擦干生殖孔及周边区域水分。挤压雌鱼腹部挤出鱼卵，1 000～2 000 mL时换盛卵盆，及时授精。排出一定鱼卵后会排卵不畅，应根据鱼体大小在生殖孔前端4～6 cm处纵向切开1～2 cm，形成出卵口，挤压腹部使成熟卵经伤口排出。鱼卵基本排净后抬高亲鱼尾部，用生理盐水500～1 000 mL从伤口处灌洗腹腔，以排出腹腔的游离卵并清洗腹腔。手术期间要不断向鱼鳃内淋水，保证鱼呼吸，避免造成亲鱼死亡。取卵结束后缝合伤口，对伤口及周围进行局部消毒、消炎处理。

相比采卵，采精简单快捷，用导管从雄鱼生殖孔插入，精液沿导管流出，盛于干燥容器，显微镜观察精子活力，活力高的可用于授精。

2.2.2 授精以干法授精为佳，用量为每1 000 mL鱼卵配比10 mL精液。盛卵盆中装卵1 000～2 000 mL(8万～10万粒)后立即加入精液，搅动约30 s；再按精卵体积的1/2加入清水进一步激活精子，搅拌约3 min后倒掉悬浮液，用清水快速漂洗3次。

2.2.3 脱黏将漂洗干净的鱼卵快速放入20%的滑石粉悬浮液，充分搅拌60 min脱黏，每20 min换滑石粉液1次，使鱼卵完全不粘手为止。鱼卵脱黏后用水清洗干净，转入孵化器中孵化。若孵化过程中受精卵结团，主要是脱黏不彻底和滋生水霉导致。

3 人工孵化

鱼卵脱黏后采用瓶式孵化器孵化，最大放卵量(无水情况下)可占据孵化器的1/5。流水培育的流量视情况而定，以保证所有鱼卵不沉底即可，但不宜太大，避免鱼卵沿出水口冲出。鲟鱼卵孵化水温为16～19℃，约110 h后开始出膜。孵化最好使用曝气的地下水，水温恒定、水质好，减少细菌和寄生虫的感染。孵化过程中经常翻动受精卵，及时剔除死卵，防止水霉发生。

鱼苗出膜后可随流水在孵化器中游动，可从顶部排水口随流水游出。收集游出的水花，转入苗种培育池培养。

4 亲鱼产后护理

亲鱼经过人工繁殖后体表有受伤充血现象，体色变淡无光泽，游动缓慢并有停歇现象，无食欲，尤其是雌鱼，经历长时间挤卵且有手术创伤，身体损耗极大，加上产前亲鱼有相当一段时间无摄食。因此，产后要加强亲鱼护理，减少伤口感染，避免亲鱼死亡。一般对产后亲鱼注射复方氨基酸、氟苯尼考、硫酸庆大霉素等消炎药，根据说明书使用，持续注射1～2周。亲鱼活力增强，体色有所恢复，受伤部位明显好转时放回亲鱼池正常饲养。