实时荧光定量PCR在食品致病菌检测中的应用

2020-12-13古丽米娜

临床检验杂志(电子版) 2020年2期

古丽米娜

（新疆塔城地区疾病预防控制中心，新疆塔城 834700）

传统的检测方法通常需要培养病原体才能开始检测。且比较昂贵，缓慢且效率低下，并且难以满足现代食品安全测试的要求。PCR技术检测方法能够快速，准确地发现各种致病菌，具有快速、准确、灵活、有效的优点，目前已广泛应用于食品致病菌检测领域。

1 基本资料

1.1 PCR技术简介 PCR技术是美国科学家于1985年创建的一种体外酶促合成技术，用于快速生长特定的DNA片段。与通过培养皿检测微生物的传统方法相比，可以快速检测特定的微生物。PCR技术的最大优势是能够快速发现不同种类的微生物，并且具有快速而灵活的特应性优势。因此，PCR技术在各种致病菌检测中起着越来越重要的作用[1]。食源性致病菌的检测是PCR技术在食品安全性测试中的重点。尽管PCR技术在该领域使用的时间较短，但近年来已逐渐得到推广，进展非常迅速。现在利用这一技术可以检测到大多数致病菌。传统的细菌分离培养方法在检测病原细菌方面效率较低，准确性较低，而PCR技术很好弥补了这些缺点。现在，PCR技术已经成为检测食源性致病菌的最重要方法。经过相应的开发之后，可以生产14-16种食源性致病菌PCR检测试剂盒。

1.2 技术优势传统的检测方法需要培养各种致病菌。该过程需要大量的人力和物力，操作非常繁琐，并且各种微生物的生长环境所需的pH，温度和营养培养基都不相同。在检测过程中，需要花费几天的培养时间，在鉴定过程中必须仔细观察细胞特征和革兰氏染色，并鉴定其生物学特征。而区分每种微生物是一个困难的过程，尤其是对于不稳定的菌株而言，更难以发现。因此，与传统的检测方法相比，PCR技术具有以下2个优点。

1.2.1 方便与传统方法相比，PCR技术中使用的设施和设备操作更简单，整个过程更加便捷。

1.2.2 快速传统的检测方法需要培养数天的样品，导致效率较为低下。PCR技术可以快速产生检测结果，可以更好地应用于工业生产。

1.3 方法分析实时荧光定量PCR在常见食品致病菌的检测效果。

2 结果

2.1 在金黄色葡萄球菌检测中的应用该致病菌突变后，就会很难去除相对较大的金黄色葡萄球菌。在大多数情况下，普通农药残留很难完全清除。如果使用过量的农药，将存在农药残留，直接影响人类的身体健康。因此有必要仔细检查水果和蔬菜中的金黄色葡萄球菌，以有效去除金黄色葡萄球菌的存在。金黄色葡萄球菌可以在水果和蔬菜中繁殖，并产生对人体有害的SE型毒素。这种毒素在进食时会引起直接食物中毒，PCR可用于明确检测这一致病菌。在大多数情况下，通过PCR技术都能准确检测出金黄色葡萄球菌的实际含量，可检测出±1 pg的金黄色葡萄球菌，保证了总体检测结果准确，符合实际情况[2]。

2.2 在绿脓杆菌检测中的应用在我们目前食用的食物中，还有着绿脓杆菌这一种对人体极为有害的微生物。食物中绿脓杆菌的长期存在会对人体造成极大伤害。PCR技术可用于扩增食品和药品的基因序列，并可快速检测食品中是否含有绿脓杆菌。同时，这一技术还可以通过检测食品中的毒素基因来确定其是否存在绿脓杆菌。一旦产生了毒素，毒素A基因就是绿脓杆菌独特的基因，并且可以通过该基因进行有效判断。无论食物中是否含有绿脓杆菌，该方法都大大改善了对食物中是否含有绿脓杆菌的检查准确性。

2.3 在大肠杆菌检测中的应用大肠杆菌是食物中最常见的微生物之一，也是最知名的微生物之一。但是这种微生物对人体非常有害。如果使用传统的食品检测方法，则难以准确地检测食品中所含大肠杆菌的准确值。需要意识到大肠杆菌和其他微生物是不同的，并且繁殖能力非常快。一旦未准确检测出大肠杆菌的值，则在一段时间后，大肠杆菌的值将呈指数增长。通过PCR技术，可以对食品中的大肠杆菌进行多重筛选，并且发现了毒素的序列基因。从而迅速发现大肠杆菌的基因序列，以确保通过PCR技术获得的大肠杆菌值是最准确的。

2.4 在沙氏门菌检测中的应用在大多数情况下，沙门氏菌含量过多会导致肠道感染，而沙门氏菌感染如果不接受及时治疗就会危及生命。传统的食品检测技术很难快速检测食品中存在的外源DNA。然而PCR技术的使用则有所不同，PCR技术自身的灵敏度相对较高，可以快速检测出各种食品中可能存在的沙门氏菌，减少了因检测失误引起错误。但是，还应该注意的是，使用PCR检测技术时仍然存在错误的可能性。为此，沙门氏菌的检测还需要进一步的优化和改进，以确保PCR技术能够真正精准检测沙门氏菌的数量，确保人们的生命安全。