重组人5型腺病毒注射液联合半相合自然杀伤细胞免疫治疗卵巢癌恶性腹腔积液1例

查竺芹，雷开键

（宜宾市第二人民医院 肿瘤科，四川 宜宾 644000）

1 病例资料

女性患者，54 岁，2017年9月因反复咳嗽、咳痰、胸痛、腹胀于宜宾市第二人民医院就诊，胸腹部CT 示胸腹腔积液；左中上腹可见多个囊实性肿块，最大长径约6.4 cm，考虑多为腹膜转移瘤。血CA125＞600 u/ml。胸水及腹水中均找到癌细胞，免疫组织化学染色示：P53（+++）、CA125（+）、WT-1（+）、HBME-1（+）、ER（+）、PAX8（+）、CK7（+）、Vim（-）、CEA（-）、CK5/6（-）、PR（-）、CK20（-）、Villin（-）、CDX-2（-）、CR（-）、TTF-1（-）、NapsinA（-）及Ki67（+，约50%），支持该细胞来源于卵巢（浆液性腺癌）。临床诊断为：卵巢癌伴腹腔、胸膜腔广泛转移，晚期。由于患者要求不脱头发，分别2017年9月给予吉西他滨静脉+卡铂腹腔灌注化疗，2017年10月给予吉西他滨静脉+卡铂胸腔灌注化疗。2017年11月复查提示卵巢癌原发病灶及腹膜病灶均较前缩小或减少，胸腹腔积液较前减少。后由于患者化疗后骨髓抑制严重，分别于2017年11月、2017年12月行吉西他滨+奈达铂静脉化疗2 周期；复查示病灶较前进一步缩小或减少。患者无法耐受双药静脉化疗，于2017年12月、2018年1月行吉西他滨静脉+卡培他滨口服化疗2 周期。随后患者由于静脉化疗血管条件差，要求只行卡培他滨口服化疗，口服1 疗程后未再来医院复查。

2018年8月再次来院就诊，胸部CT 示左侧少量胸腔积液，双侧肺门及纵隔多发肿大淋巴结，较前明显增多、增大。2018年8月27日行全腹部核磁共振提示右侧卵巢长径约为4.9 cm，左侧卵巢长径约为6.2 cm，卵巢表面凹凸不平，符合卵巢癌表现，较前稍增大，腹膜广泛非均匀增厚，提示腹膜转移瘤；腹腔中、大量积液（见图1）。肿瘤相关抗原CA125 169.7 u/ml。人附睾分泌蛋白HE4 1159.1 pmol/L。提示肿瘤复发，患者为癌症晚期，无手术机会，既往多次化疗，效果欠佳，患者拒绝静脉化疗。在征得患者及家属同意及签署知情同意书后，患者自愿加入本试验。经筛查后符合纳入条件，2018年9月16日抽取患者儿子外周静脉血200 ml 于实验室进行NK 细胞培养增殖，使培养扩增NK 细胞数单次回输达到5×109个，纯度＞90%，活性＞90%，杀伤活性≥80%，培养扩增需14 ～16 d。2018年8月27日—2018年9月16日腹腔置管引流腹水5 100 ml。2018年9月18日予以H101 4 支（5×10 11 vp/0.5 ml/支）+0.9%生理盐水20 ml 腹腔注射。2018年9月17日—2018年9月28日累计腹腔引流量1 000 ml（每次注射H101 前需将腹水引流至少量，这样既不会因无腹水导致药物局限于一处，也不会因腹水过多导致药物稀释药效降低）。2018年9月29日再次采取上述配置方法给予H101 腹腔注射，注射后72 h，也就是待NK 细胞培养快结束时（约2 周左右），2018年10月2日回输半相合NK 细胞（5×109个/d）连续4 d（2018年10月2日—2018年10月5日），2018年9月28日—2018年10月6日腹腔引流量800 ml。NK 细胞的培养及质控由杭州康万达医药科技有限公司派的专家指导完成。休息1 周后，10月13日再次同上述配置方法予以H101 注射，10月16日—10月19日NK 细胞连续回输4 d。之后未再引流腹水。整个治疗结束后10 d 左右复查胸部CT 提示右侧胸腔中量积液，左侧胸腔少量积液。10月30日复查腹部核磁共振提示右侧卵巢长径5.5 cm，左侧卵巢长径6.3 cm，卵巢表面凹凸不平，较前稍增大，腹膜广泛非均匀增厚，病变较前稍微增大；腹腔少量积液、较前减少（见图2）。

图1 腹部MRI

图2 腹部MRI

2 讨论

90%以上高级别浆液性卵巢癌与P53 突变有关[1]。H101 是利用基因工程技术删除人5 型腺病毒E1B-55 kD 和E3 区部分基因片段而获得的溶瘤性腺病毒，可在P53基因突变的肿瘤细胞中复制，但不能在正常细胞中复制[2]。H101 在大量复制的同时，原位裂解肿瘤细胞释放病毒元素、肿瘤抗原及表达相关因子通过直接溶瘤、打破免疫耐受、表达调控基因等机制发挥抗肿瘤作用[3-5]。但是肿瘤局部微环境是一个免疫抑制状态，全身免疫细胞在数量、功能及活性上均有不同程度缺陷，仅仅依靠自身的免疫系统很难有强大的抗肿瘤免疫反应。结合H101 在肿瘤局部释放招募信号的抗肿瘤作用，溶瘤病毒肿瘤局部注射并联合半相合NK 细胞回输，其抗肿瘤作用可相补。有学者报道半相合NK 细胞过继治疗具有抗原性弱，发生排斥反应少，安全性好等优点[6-7]。

患者治疗期间注射H101、回输半相合NK 细胞后，出现不同程度乏力、低热，最高体温38.2℃，予以退热等对症处理。患者治疗期间腹水引流量从平均255 ml/d 下降至90 ～100 ml/d，最后腹水消失，无腹水时间达到2 个月，疗效好。总体来说H101 联合半相合NK 细胞治疗卵巢癌腹水是有效和成功的，副作用可耐受，安全性较好。