血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平对婴幼儿呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的诊断价值

谢祥红，段 峰

毛细支气管炎是婴幼儿较为常见的下呼吸道感染性疾病之一，患儿临床症状与肺炎类似，但主要表现为憋喘，甚至反复的喘息发作，可发展为哮喘[1]。引起毛细支气管炎的主要病原体种类较多，病毒、细菌、支原体均可导致毛细支气管炎，但超过80%的致病病原体为呼吸道合胞病毒(RSV)。

维生素D、IgE及IL-10与人体内免疫系统功能调节的相互作用近年来越来越受到关注，它们在婴幼儿毛细支气管炎的发生、发展过程中也发挥着重要的作用[2]。本研究通过分析血清25(OH)D3、IgE及IL-10的水平与婴幼儿呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的相关性，旨在探讨血清25(OH)D3、IgE及IL-10对呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的早期诊断价值，为临床治疗效果评估提供参考。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2018-06至2020-06我院收治的呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿220例作为病例组研究对象，年龄38 d～3岁，平均年龄(5.78±2.84)个月，平均年龄差异无统计学意义(t=1.456，P>0.05)。病例组女86例(39.09%)，男134例(60.91%)，性别构成差异无统计学意义(χ2=0.040，P>0.05)。病例的诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》(第7版)[3]，临床表现为喘息、咳嗽以及发热、气促,可闻及哮鸣音及湿性啰音，且鼻咽拭子直接免疫荧光法(DFA)法检测RSV抗原阳性。同时选取同一时期至我院儿保科行常规体检的健康婴幼儿250例作为对照组。对照组婴幼儿年龄30 d～3岁，平均年龄(6.11±2.05)个月，对照组女100例(40.00%)，男150例(60.00%)。病例组纳入标准：(1)年龄范围0～36月；(2)X线胸部正位片显示支气管周围斑片状阴影、存在炎症征象；(3)双肺闻及喘鸣音、可伴湿罗音。排除标准：(1)伴发其他感染性疾病；(2)合并原发性免疫缺陷或先天性肺部、心脏疾病；(3)最近一次呼吸道感染与本次感染间隔<30 d。根据《毛细支气管炎诊断、治疗与预防专家共识(2014年版)》[4]将病例组患儿分为轻度、中度及重度病变组。所有入组婴幼儿均获取了监护人知情同意，研究项目经本院伦理委员会审查通过。

1.2 方法

1.2.1 样本采集及检测 采集病例组及对照组婴幼儿入院当日空腹静脉血6 ml，2 h内对样本以3000 r/min离心15 min，将分离的血清置于-20 ℃冰箱保存待测。25(OH)D3、IgE及IL-10的检测试剂盒均购自美国伯乐公司(Bio-rad)，按照试剂盒说明书进行实验准备及操作，采用ELISA法检测25(OH)D3、IgE， IL-10的检测按照Bio-plex assays 试剂盒要求采用悬液芯片法。

1.2.2 分析方法 对病例组及对照组进行血清25(OH)D3、IgE及IL-10的水平差异比较，同时比较不同病情严重程度患儿三项指标的差异及相关性。

2 结 果

2.1 病例组与对照组血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平 病例组与对照组相比较，病例组血清25(OH)D3水平低于对照组，而IgE及IL-10表达水平高于对照组(P<0.001，表1)。

表1 两组婴幼儿呼吸道病毒毛细支气管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平

2.2 不同病情患儿血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平的差异 25(OH)D3水平重度组低于中度组及轻度组，而IgE及IL-10重度组高于中度组及轻度组(P<0.001)。见表2。

表2 不同病情婴幼儿呼吸道病毒毛细支气管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平的差异

2.3 不同病情患儿血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平的相关性 患儿血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平与病情程度均存在相关性，25(OH)D3与病情严重程度呈负相关，IgE及IL-10与病情严重程度呈正相关(P<0.05，表3)。

表3 不同病情婴幼儿呼吸道病毒毛细支气管炎患者血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平的相关性

3 讨 论

RSV是导致婴幼儿发生急性下呼吸道感染最为常见的病原体[5]，好发于2.5岁以下的婴幼儿，患者多为1岁以内的婴儿，尤其以6个月以内婴儿更为常见。患儿临床症状与肺炎类似，但主要表现为憋喘，甚至反复的喘息发作，可发展为哮喘[6]，严重者可发展为呼吸衰竭或心力衰竭，甚至有部分毛细支气管炎患儿会进展为哮喘凹，严重威胁着婴幼儿的生命健康。引起毛细支气管炎的主要病原体种类较多，病毒、细菌、支原体均可导致毛细支气管炎，但超过80%的致病病原体为呼吸道合胞病毒(RSV)。RSV的流行无明显季节性，全年均可发生流行，并且目前全球针对RSV的感染尚无有效的疫苗及特效药。因此RSV感染后发生的毛细支气管炎，寻找适合的血清学指标，能够对疾病早期诊断、治疗效果的评估起到重要的作用。

近年来，随着对维生素D的研究不断深入，其参与免疫调节级炎性反应及修复的病理生理过程也逐渐得到了认识[7]。25 (OH)2D3是人体内维生素D的主要活性形式，能够稳定地存在于血液循环当中，能够间接、真实地反映人体内维生素D的水平[8]，是衡量人体维生素D水平的重要指标[9]。既往已有研究显示，维生素D水平与肺结核、支气管哮喘等多种呼吸道感染性疾病有关，并与感染严重程度相关[10]。而补充维生素D，则可以降低病毒感染风险，提高病毒感染的免疫应答效果，控制炎症反应[11，12]。在对婴幼儿毛细支气管炎的临床研究中也发现，辅助维生素D进行治疗后，患儿病程明显缩短[13]。IgE属于分泌型的免疫球蛋白，由人体呼吸道固有层的浆细胞产生，能够介导Ⅰ型变态反应[14]。人体在感染RSV后，可通过多种途径刺激B淋巴细胞产生特异性抗体，从而导致IgE水平升高。既往已有研究表明，RSV感染所致的毛细支气管炎与下呼吸道过度的免疫反应有关，其主要机制与Th1/Th2型细胞因子、促炎/抗炎细胞因子之间的平衡变化有关[15]。IL-10属于抑制性的细胞因子，能够发挥抑制急性炎性反应、调节免疫反应平衡的作用[16，17]。

本研究结果显示病例组及对照组之间血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平存在明显差异，毛细支气管炎患儿血清25(OH)D3低于对照，而IgE及IL-10高于对照。同时对不同病情严重程度患儿比较后发现，病情严重程度与血清25(OH)D3负相关，与IgE及IL-10表达水平正相关。提示血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平能够反映毛细支气管炎的患病及病情严重程度，结论与国内外同类研究较为一致，且IL-10表达水平的相关系数高于同类研究报道结果[18-19]。其机制可能与患儿本身体内较低的维生素D水平导致免疫力下降，更容易发生感染有关。有研究发现，缺乏维生素D可降低Toll 样受体介导的防御素、抗菌肽LL-37的表达，导致呼吸道抵抗力降低[20]。同时，维生素D的缺乏可通过影响呼吸道黏膜上皮细胞的分化以及影响呼吸道纤连蛋白等因素，从而影响呼吸道的屏障作用，降低呼吸道分泌及清除的能力，同时可导致气道高反应[21]。此外，维生素D还能够通过影响B细胞的增殖及分化，从而影响体液免疫功能，影响抗体的生成[22]。患儿感染RSV后，通过各种途径刺激B细胞的增殖、分化及成熟，从而产生IgE，促进IgE的分泌。通常婴幼儿重症的感染与Th2反应增强有关[23]，患儿IL-10表达水平升高，其机制可能与IL-10影响Th1/Th2的免疫平衡，降低免疫损伤的保护机制有关。

总之，血清25(OH)D3、IgE及IL-10表达水平与婴幼儿RSV所致的毛细支气管炎有关，能够反映感染的发生及发展情况，对于协助早期诊断、评估病情发展及治疗效果具有实际意义。