急性心肌梗死患者血浆miRNA-423-5p与整合素连接激酶水平表达对评价近期临床预后的价值

达 晶,张 超,吴红葵,刘 刚,王文科,孙向阳

（1.宝鸡市中心医院老年心脑血管病科，陕西宝鸡，721000；2.达州市中心医院心内科，四川达州 635000）

急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是引发急性胸痛的主要原因。早期明确诊断与对症治疗有助于降低急性心肌梗死的死亡率[1]。在急性心肌梗死患者中，冠心病、高血压等易增加急性心肌梗死并发心力衰竭的可能性，是导致心肌梗死患者死亡的主要原因。miRNA-423-5p属于单链非编码小分子RNA，具有基因表达可调控性，高度保守性。有研究发现：miRNA-423-5p能够参与心肌梗死、心力衰竭、高血压等多种心血管疾病的发生与发展；miRNA-423-5p可作为急性心肌梗死生物标志物，用于疾病诊断与治疗，其与急性心肌梗死后心室重构存在密切关联性，尤其在急性心肌梗死预后效果预测中具有重要价值[2]。整合素连接激酶属于Ser/Thr蛋白激酶，位于细胞表面，能够参与多种信号转导。整合素连接激酶与心血管疾病发生与发展存在密切关联性，整合素连接激酶能够增加血管内皮生长因子的表达，提高心肌梗死周围微血管密度，以促进血管新生，具有心肌梗死后心脏功能保护作用。miRNA-423-5p与整合素连接激酶与急性心肌梗死之前存在的关联性，决定其可成为急性心肌梗死生物学标记物，为早期诊断提供依据[3]。既有研究汇总分析后，miRNA-423-5p，整合素连接激酶在心肌梗死诊断与预后的作用鲜见报道。本研究旨在对miRNA-423-5p，整合素连接激酶在急性心肌梗死近期预后的作用进行分析。

1 材料与方法

1.1 研究对象 将宝鸡市中心医院老年心脑血管病科2016年1月～2018年1月收治的80例急性心肌梗死患者编入实验组，同一时期收治的80例稳定性心绞痛患者编入对照组。诊断标准：①《急性心肌梗死诊断和治疗指南》中规定的相关诊断标准[1]。②选择性冠状动脉造影诊断结果（心绞痛诊断金标准）。纳入标准：①经临床诊断，确诊为稳定性心绞痛者；②在发病后12h内成功接收经皮冠状动脉介入术的急性心肌梗死患者（首次发作ST段抬高型EMI患者）；③患者知情同意，签署知情同意协议，经由医院伦理委员会批准者。排除标准：①并发严重肝、肾功能障碍者；②血液疾病、感染、外伤、脑卒中及其他严重疾病者；③近期使用激素者；④心律失常者。实验组男性49例，女性31例，年龄60～83岁，平均年龄67.9±5.4岁。对照组男性48例，女性32例，年龄59～85岁，平均年龄67.8±5.3岁。经检验，实验组与对照组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 仪器与试剂 电子天平（上海台衡仪器仪表有限公司）；低温离心机（湖南恒诺仪器设备有限公司）；低速离心机（美国Eppendorf公司）；低温（超低温）冰箱（浙江捷盛低温设备有限公司）；PCR仪（北京麦克奥迪公司）；实时荧光定量PCR试剂盒（锐赛生物）；整合素连接激酶检测试剂盒（上海沪震实业有限公司）；BCA蛋白试剂盒（Pierce公司）；标准品溶液；十二烷基硫酸钠；苯甲基磺酰氟溶液等。

1.3 研究方法

1.3.1 临床资料采集：采集研究对象临床资料，包括性别、年龄、既往病史、体重、身高等。记录研究对象乳酸脱氢酶（LDH），天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血清肌钙蛋白I(cTnl)、尿肌红蛋白（Mb）、心肌酶（CKMB）、左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期容量（LVEDV）、左室收缩末期容量（LVESV）和左心室舒张末期内径（LEVDd）等。

1.3.2 检测方法与流程：研究实施期间采用的血浆miRNA-423-5p检测方法为实施荧光定量PCR法[4]。患者在PCI手术实施前后接受心室重构相关指标检测，检测期间，检测探头的频率控制在1.7～3.4MHz之间，检测指标以左心室舒张末期内径、左心室舒张末期容积、左心室收缩末期容积及左心室射血分数等指标为主。心肌酶谱、cTnl指标、Mb指标及CK-MB指标的检测工作也以抽血检测为主，实验组、对照组同时采血，血液样本采集完成以后分离血清，进行心电图记录，cTnl和Mb检测的方法以免疫荧光法为主，CK-MB的测定采用酶速率法。整合素连接激酶为局部心肌组织检测整合素连接激酶，按照试剂盒操作说明书进行操作。在检验工作实施期间，相关人员需要根据阳性对照与阴性对照控制试验条件，出于保证实验结果的准确性的需要，检验期间使用的待检样品被分为两份。根据研究需要，实验组患者分为高表达组与低表达组。高表达组与低表达组的分组依据为miRNA-423-5p的相对表达量。相对表达量≤0.39的急性心肌梗死患者编入低表达组，相对表达量＞0.39以上的患者编入高表达组。研究期间利用自制生活质量量表，分析患者的生活质量,生活质量评分涉及到环境维度、社会维度、心理维度及生理维度等方面[4]。

1.3.3 治疗方案：对照组为心绞痛患者，采取改善心肌缺血、缓解症状、提高生活质量，预防急性心肌梗死的治疗方式。实验组为急性心肌梗死患者，采取扩张冠状动脉、消除治病的阻塞物，减轻心脏负荷，如：卧床休息＋吸氧。在其接诊之后提供经皮冠状动脉介入治疗。

1.4 统计学分析 本次研究数据利用SPSS21.0版统计学软件进行处理，计量资料用均数±标准差（±s），组间比较采用t检验，计数资料以数（n）或率（%）描述统计，行χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 miRNA-423-5p，心肌酶谱、心肌损伤指标情况比较 见表1。治疗前，两组miRNA-423-5p，心肌酶谱指标、心肌损伤指标比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，实验组miRNA-423-5P，心肌酶谱指标、心肌损伤指标水平均高于对照组，差均异具有统计学意义（均P＜0.05）。

表1 实验组与对照组miRNA-423-5p，心肌酶谱、心肌损伤指标比较（±s）

表1 实验组与对照组miRNA-423-5p，心肌酶谱、心肌损伤指标比较（±s）

项目 实验组 对照组 t P miRNA-423-5p表达水平 0.6±0.2 0.3±0.1 12.000 0.000心肌酶谱指标 LDH（U/L） 250.4±1.5 222.3±0.7 43.768 0.000 AST（U/L） 49.4±0.3 40.7±0.7 102.176 0.000 CK（U/L） 210.5±3.2 191.4±1.2 26.433 0.000 ALT（U/L） 60.3±2.1 41.4±4.6 33.430 0.000心肌损伤指标 cTnl（ng/ml） 20.9±14.9 0.2±0.1 12.426 0.000 Mb（ng/ml） 647.4±203.2 24.1±14.3 27.368 0.000 CK-MB（ng/ml） 136.0±42.9 14.1±3.2 57.593 0.000

2.2 整合素连接激酶表达水平 治疗前，两组整合素连接激酶表达水平对比，无显著差异（P＞0.05）。治疗3个月后，对照组的整合素连接激酶表达水平为1.8±0.1，实验组的整合素连接激酶表达水平为3.2±0.4，实验组的整合素连接激酶的表达水平高于对照组，差异具有统计学意义（t=30.370,P＜0.05）。

2.3 高表达组与低表达组心室重构情况 见表2。治疗前，实验组中高表达组、低表达组的心室重构情况差异无统计学意义（t=0.043～0.468，均P＞0.05）。治疗3个月后，高表达组与低表达组LEVD，LVEDV，LVESV，LVEF水平之间对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表2 高表达组与低表达组LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF水平比较（±s）

表2 高表达组与低表达组LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF水平比较（±s）

项目 高表达组 低表达组 t P LEVDd（mm） 治疗前 50.8±1.3 50.7±1.4 0.468 0.640治疗后 55.1±1.1 51.0±1.6 14.280 0.000 LVEDV（ml） 治疗前 121.65±10.3 120.71±10.4 0.043 0.966治疗后 135.72±9.63 123.16±8.37 41.880 0.000 LVESV（ml） 治疗前 55.4±7.4 55.3±7.5 0.085 0.932治疗后 60.8±6.4 56.1±8.2 4.890 0.000 LVEF（%） 治疗前 39.8±4.1 39.7±4.0 0.152 0.880治疗后 45.2±2.1 50.1±1.2 12.893 0.000

2.4 生活质量评分 见表3。治疗前，两组患者各项生活质量评分对比，无显著差异（P＞0.05）；治疗后，对照组生活质量评分高于实验组，比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表3 治疗后实验组与对照组生活质量评分比较（±s）

表3 治疗后实验组与对照组生活质量评分比较（±s）

项目 实验组 对照组 t P环境维度 11.4±1.2 18.7±1.8 30.182 0.000社会维度 11.2±0.8 18.6±1.1 48.662 0.000心理维度 12.7±0.9 19.5±1.8 30.222 0.000生理维度 13.2±1.5 19.1±0.4 28.231 0.000

3 讨论

miRNA-423-5p为高度保守的单链非编码小分子RNA，能够参与心肌梗死、心力衰竭、高血压等多种心血管疾病的发生与发展[5-6]。根据既有研究，miRNA-423-5p在急性心力衰竭中有显著表达[7]。本研究中，实验组、对照组的miRNA-423-5p表达量存在显著差异，表明miRNA-423-5p水平与急性心肌梗死之间具有较为密切的联系。对照组miRNA-423-5p水平高于实验组，可能与患者心肌损伤存在密切关联性。本次研究证实，miRNA-423-5p表达与心肌损伤程度、心室重构存在类似正相关的关系，患者经治疗心肌酶谱指标（LDH，AST，CK，ALT）、心肌损伤指标（cTnl，Mb，CK-MB）改善，心肌功能恢复，缺血坏死心肌细胞减少，可能其释放的miRNA-423-5p的表达下降[8-9],使得心室重构（LEVDd，LVEDV，LVESV，LVEF）得以改善[10]。根据miRNA-423-5p的变化，可了解急性心肌梗死发展过程，并对急性心肌梗死预后情况进行评估，miRNA-423-5p的变化反映了心肌梗死的发展过程。心肌细胞凋亡是急性心肌梗死发生、发展的重要基础，高表达整合素连接激酶有助于改善患者的心功能[11-12]。本次研究中，治疗后急性心肌梗死患者的整合素连接激酶表达水平明显高于稳定性心绞痛患者，其原因可能与心室重构过程中出现的心腔内压力变化相关。整合素连接激酶属于Ser/Thr蛋白激酶,是位于整合素下游的多功能细胞内信号蛋白，可与整合素β-1，β-3亚单位胞浆区结合,参与心肌收缩、心脏细胞肥大等多种信号传导[13]。急性心肌梗死使心肌细胞凋亡，在进行心肌重构过程中，会出现收缩障碍、舒张障碍。整合素连接激酶可通过提高心肌梗死周围微血管密度，促进血管新生，控制心肌细胞凋亡，进行心脏功能保护[14]。因此，治愈后急性心肌梗死患者整合素连接激酶的表达降低，所以根据整合素连接激酶水平变化，可以判断患者急性心肌梗死症状的发展趋势[15]。

本次研究中，对照组的生活质量评分高于实验组（P＜0.05），表明对照组心室重构情况的变化更能使患者心脏功能得到改善，并让患者的临床症状得到一定程度的缓解。当患者临床症状缓解后，可以在影响患者生理状况的过程中，促进患者心理状况的变化，患者心理情绪变化也会使其在环境领域及社会领域的评分有所提升，从而改善患者生活质量。随着患者生活质量评分的变化，患者治疗后的生活能力得到一定程度的改善，故而生活质量变化可作患者疾病预后的反映。本次研究而言，观察治疗3个月后指标的变化，时间较短，故而今后需要开展长时间的随访研究工作，有待进一步验证研究结果。

综上，miRNA-423-5p，整合素连接激酶对急性心肌梗死患者近期预后状况具有一定的预测价值，可通过miRNA-423-5p，整合素连接激酶水平监测，判断患者的近期预后状况，并同步调整治疗方案，以保障其病情控制效果。