2015-2019年武汉地区儿童急性呼吸道感染常见病毒流行研究

吴泽刚 黎知青 顾 剑 吴 青 李 艳,*

在发展中国家，急性呼吸道感染(ARI)是引起儿童较高发病率和死亡率的主要疾病之一[1]。在全球范围内，虽5岁以下儿童肺炎死亡率从2000年的13.6‰下降到2015年的6.6‰[2]，但肺炎仍然排在5岁以下儿童死亡原因的首位[3]。2015年，WHO统计显示非洲国家5岁以下儿童肺炎死亡率最高(50万)，其次是东南亚国家(20万)[2]。在中国，5岁以下儿童肺炎相关死亡占所有儿童死亡的12.4%，而肺炎相关死亡占所有产后婴儿死亡的23.1%[3,4]。因此，无论是在发展中国家还是发达国家，ARI都是家庭和整个社会巨大的人力和经济负担[5,6]。目前普遍认为[7-9]，ARI可由多种病原体引起，主要病原体有细菌(最常见的是肺炎链球菌)、非典型性细菌如肺炎支原体(Mycoplasma Pneumonia，MP)以及病毒如甲型流感病毒(Influenza A Virus，FluA)、乙型流感病毒(Influenza B Virus，FluB)、副流感病毒1-3型(Parainfluenza Virus，PIV1-3)、呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)、腺病毒(Adenovirus，ADV)等，不同地区和人群的病原体不完全相同，特别是在发展中国家ARI的病原学流行趋势不一。因而呼吸道病毒的快速检测对指导ARI的正确合理治疗极为重要。目前，国内以及武汉地区有关呼吸道病毒的报道很少，本研究通过对2015-12—2019-11武汉市35 552例ARI患儿咽拭子中七种病原体抗原检测结果进行分析，旨在为该地区呼吸道病毒的流行病学调查及临床确诊和制定合理的治疗方案提供重要依据。

1 资料与方法

1.1 对象与分组

2015-12—2019-11于武汉大学人民医院儿科住院，伴有流涕、打喷嚏、咳嗽、头昏、头痛以及全身乏力等ARI症状，共35 552例。年龄1月—12岁，平均年龄37个月，其中男患儿21 188例，女患儿14 364例。

按照儿童的生长发育以及机体免疫系统发育状况等特点，将患儿分成四组：<1岁组，7 401例；1岁—3岁组(含1岁)，10 833例；3岁—6岁组(含3岁组)，11 766例；≥6岁组(学龄期组)，5 552例。

1.2 试剂与仪器

D3呼吸道病毒检测试剂盒为美国Diagnostic Hybrids,inc.公司生产，批号：160435；EUROStarⅡ型(德国)荧光显微镜。

1.3 检测方法

采用咽拭子采集管采集受试者咽拭子标本后，立即将标本转送至武汉大学人民医院检验科(如果没有立即检测将保存在4℃冰箱中，标本存放不超过24h)，采样前1周内患儿均未使用抗病毒药物治疗，采用免疫荧光法同时检测咽拭子样本中RSV、FluA、ADV、FluB、PIV1、PIV2、PIV3七种常见上呼吸道感染病毒抗原，具体步骤严格按照操作说明书进行。

1.4 统计学处理

采用SPSS 19.0统计软件。计数资料采用频数、百分率(n，%)表示，率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各种病原体检出情况

35 552例标本中，有6 955例至少检测出一种病原体，检出率为19.56%，其中RSV检出率最高(8.55%)，其次是PIV3，检出率3.28%，其它病原体(FluA、ADV、FluB、PIV1、PIV2)检出率分别为2.81%、2.14%、1.74%、0.82%、0.29%，如表1。

表1 七种呼吸道病毒抗原检出率

男患儿检出4 199例(19.82%)，女患儿检出2 756例(19.19%)，不同性别检出率差异无统计学意义(χ2=2.17，P>0.05)。

2.2 各种病原体流行季节性

FluA主要流行于秋冬季(2016年秋季、2017年冬季和2018年冬季)；FluB主要流行于冬春季，春季最明显(2016、2017和2019年春季，2017年冬季)；ADV春夏季较其它季节检出率高(2016、2017和2019年春夏季)；PIV不同的亚型之间流行趋势有一定差异，PIV1春夏秋检出率均较高(2016年夏、2017年春和2018年秋冬季、2019年秋季)，PIV2主要流行于夏秋季(2016年夏季、2017和2019年秋季)，PIV3主要流行于春夏季(2016年夏季，2017、2018和2019年春夏季)；RSV主要流行于冬季(2015、2016、2017和2018年冬季)。见图1(A、B、C、D、E、F、G)。

图1 七种呼吸道病毒季节性变化

2.3 各种病原体混合感染模式

35 552例受检者中同时检出2种病原体25例，检出率为0.07%，其中RSV+PIV3混合感染检出率最高，共6例，其次为RSV+FluA，RSV+PIV1和PIV3+FluA均检出3例，具体情况见表2。

表2 35 552例受检者呼吸道七种病原体混合感染情况

2.4 各年龄组七种病原体检出率分布情况

各年龄组七种病原体的检出特点如图2所示，各年龄组总检出率分别为：30.98%、22.00%、15.25%、10.54%，各组间总检出率差异有统计学意义(χ2=1 063.10，P<0.01)，<1岁组的呼吸道病毒检出率最高，明显高于其它各组(χ2均>186.20，P<0.01)。七种病原体的检出率在各年龄组之间差异有统计学意义(χ2均>9.80，P<0.05)，其中，RSV和PIV3在<1岁组中检出率明显高于其它组(χ2均>51.80，P<0.01)，FluB在6-12岁组的检出率明显高于其它组(χ2均>29.50，P<0.05)，而ADV和FluA<1岁组中检出率明显低于其它组(χ2均>11.80，P<0.05)，PIV2和PIV3在6-12岁组的检出率明显低于其它组(χ2均>4.10，P<0.05)。

图2 各年龄组呼吸道七种呼吸道病毒检出率

3 讨 论

为了解本地区0-12岁呼吸道病毒感染的病毒谱和流行性，本研究分析了35 552例ARI患儿呼吸道常见七种病毒。结果表明，七种呼吸道病毒总阳性检出率为19.56%，低于国内一些文献报道(36.6-54.9%)[10,11]。总的检出率的不同与检出病原体的种类数以及检测方法有关，另外不同的地区及气候条件也会对检出率有影响[12]。在住院患儿呼吸道病毒感染中RSV最常见(8.55%)，与广州地区(13.7%)和地中海地区(16.1%)报道[13,14]不尽相同。本研究同时检测出2种及以上呼吸道病毒混合感染中以RSV+PIV3模式最多见，而Feng等[11]类似的研究报道Flu+RSV是主要的混合感染。发生混合感染可能是因一种病原体感染机体后使气道黏膜细胞受损，导致其它病原体更容易入侵；也可能与患儿体质差免疫功能低下，病程长、住院期间与其他患儿接触，交叉感染机会增加有关，因此儿童在住院期间应该有相应的隔离措施，避免院内交叉感染。

本研究中各种呼吸道病毒感染呈现出一定的季节性，其中FluA主要流行于秋冬季，特别是2017年冬季，而Liu等[15]报道FluA主要流行于春秋季；FLuB主要流行于冬春季，与Finianos等和Cheng等[16,17]报道报道相似。RSV主要流行于冬季，与Rodríguez-Martínez[18]和Fagbo[19]报道相似。PIV3流行季节较明显，主要于春夏季；ADV在夏季较其它季节检出率稍高，均与Feng等[11]报道的相似。本研究部分呼吸道病毒的流行季节跟其它报道不一致可能是由于地域气候以及人群差异引起的。

本研究中，不同年龄组总检出率差异明显(P<0.01)，<1岁组幼儿检出率最高，随着年龄的增大，PIV和RSV感染率呈下降趋势，其原因可能是由于儿童机体的免疫力随着年龄的增大而增强。然而，ADV、FLuA和FLuB这三种病毒感染随着年龄的增大有上升趋势，可能与这些呼吸道病毒的感染特点相关，以发生在人员密集区(如学校)易交叉感染，特别是在幼儿园阶段(3-6岁)。各年龄组中RSV和PIV3检出率差异明显(P<0.05)，其中<1岁组的幼儿更易感染，该结果与意大利的Kuhdari等[20]报道相似，<1岁组的幼儿RSV感染占0-14岁儿童80.02%，可能与RSV和PIV3的易感人群以及该年龄段患儿免疫力低等特点有关。

总之，本研究采用IFA快速检测了2015-2019年武汉地区小儿ARI的常见呼吸道病毒的分布，通过分析结果，使我们对本地区的小儿ARI的病毒病原学及流行程度有了一定的认识，为ARI患儿的病原学诊断提供重要依据。本研究虽然对常见七种呼吸道病毒进行检测，但在其它报道中人类偏肺病毒感染症(hMPV)，人博卡病毒(hBoV)，人鼻病毒(hRV)，冠状病毒(CoV)[21,22]也有一定的检出比例，因而本研究对本地区ARI的部分呼吸道病毒感染谱及季节流行性及混合感染模式提供了参考依据。