DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系分析

马秀丽　陈庆明　陈登荣　张洁民

[摘要] 目的 分析DR-NM23在浸潤性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系。方法 该院于2016年2月—2019年6月方便择选研究病例共50例，均是浸润性乳腺癌病患，收集整体临床资料，取病理癌组织，以免疫组织化学法对所取癌组织中所含DR-NM23情况进行检测，同时分析该基因在癌症中的表达以及其和临床病理参数之间的关系，以期能为疾病的治疗提供相应的参考依据。结果 经检测发现，50例患者中有13例DR-NM23在癌组织中呈阳性状态，即阳性表达率为26.0%;另外经免疫组织检测发现，有43例患者DR-NM23在癌旁组织中呈阳性，其表达率为86.0%。通过多因素Logistic回归分析可知，浸润性乳腺癌组织中所含DR-NM23蛋白和雌激素受体表达、组织学分级、TNM分期和淋巴转移表达之间为负相关状态，差异有统计学意义（P<0.05）。DR-NM23和患者年龄、Her-25受体、肿瘤体积大小以及PR受体之间存在的关系不明显（P>0.05）。通过统计学软件的比较检验发现，癌组织中DR-NM23表达水平较癌旁组织DR-NM23表达水平而言，明显要低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在浸润型乳腺癌的临床诊疗中对患者癌组织中DR-NM23进行检测，可为了解疾病的发生和发展提供相应的参考资料，为治疗方案的明确提供更为合理的理论依据，使疾病的诊疗更为科学、准确。

[关键词] 浸润性乳腺癌;临床;表达;病理参数;DR-NM23

[中图分类号] R737.9          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2020）09（b）-0025-03

The Expression of DR-NM23 in Invasive Breast Cancer and Its Relationship with Clinicopathological Parameters

MA Xiu-li， CHEN Qing-ming， CHEN Deng-rong， ZHANG Jie-min

Department of Pathology， People's Hospital of Wuwei City， Wuwei， Gansu Province， 733000 China

[Abstract] Objective To analyze the expression of DR-NM23 in invasive breast cancer and its relationship with clinicopathological parameters. Methods From February 2016 to June 2019， the hospital convenient selected a total of 50 research cases， all of whom were patients with invasive breast cancer. The overall clinical data was collected， and the cancer tissues of the cases were collected， and the cancer tissues were analyzed by immunohistochemistry. The condition of DR-NM23 contained in the DR-NM23 is detected， and the expression of the gene in cancer and its relationship with clinical pathological parameters are analyzed at the same time， in order to provide a corresponding reference basis for the treatment of the disease. Results It was found through testing that 13 of 50 patients were positive for DR-NM23 in cancer tissues， that is， the positive expression rate was 26.0%. In addition， immune tissue testing found that there were 43 patients with DR-NM23 in adjacent tissues. It was positive in C， and its expression rate was 86.0%. Through multivariate logistic regression analysis， it can be seen that the expression of DR-NM23 protein and estrogen receptor， histological grade， TNM stage and lymphatic metastasis expression contained in invasive breast cancer tissue are negatively correlated， and the difference is statistically significant（P<0.05）. The relationship between DR-NM23 and patient age， Her-25 receptor， tumor size and PR receptor is not obvious（P>0.05）. The comparative test of statistical software found that the expression level of DR-NM23 in cancer tissues was significantly lower than that in adjacent tissues， and the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion The detection of DR-NM23 in the cancer tissues of patients in the clinical diagnosis and treatment of invasive breast cancer can provide corresponding reference materials for understanding the occurrence and development of the disease， and provide a more reasonable theoretical basis for the clarification of the treatment plan. The diagnosis and treatment of diseases is more scientific and accurate.

[Key words] Invasive breast cancer; Clinical; Expression; Pathological parameters; DR-NM23

近年来，乳腺癌的发病率呈逐年上升趋势，严重威胁女性患者的生命健康，是女性最常见的恶性肿瘤之一，其中，浸润性乳腺癌是其最主要的分型。DM23是首个被发现的肿瘤转移抑制基因，DR-NM23位于16q13染色体上。有研究显示，DR-NM23与多种肿瘤的生长、增殖、分化、凋亡、转移等过程相关，并参与神经细胞瘤细胞、骨髓细胞瘤细胞等瘤细胞的分化和凋亡，而营养干预、维持正常体重等一级干预可减少乳腺癌的发生[1-2]。该研究方便选取2016年2月—2019年6月该院收治的50例女性患者为研究对象，分离其乳腺癌组织，通过免疫组化及试剂来检测DR-NM23蛋白表达，进一步探讨DR-NM23与乳腺癌的关系，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便择选研究50例浸润性乳腺癌患者，均满足浸润性乳腺癌诊断标准，所有病例均在知情的条件下，签订同意书。该次研究已征得医院伦理委员会的审批。为确保研究的准确性以及可信性，将以下患者排除：伴其他严重器质性、血液性疾病患者;合并其他恶性肿瘤威胁到生命安全的患者;有精神病史患者;有语言沟通交流障碍患者。该次研究全部病例标本的检测均由两名以上专业医生完成。患者年龄在45～71岁范围内，平均年龄为（56.42±6.21）岁;病程1～5年，平均病程为（3.42±1.02）年。

1.2  方法

收集整理患者临床资料，该次研究所需的试剂主要如下：兔抗人的DR-NM23多克隆抗、免疫组化试剂盒、小鼠抗人β-actin单克隆抗体、RIPA裂解液、BCA蛋白测定试剂盒以及上样缓冲液等，上述试剂均由专业医药公司所制。借助于免疫组织化学法对浸润性乳腺癌中DR-NM23表达情况进行检测，以1：50对DR-NM23抗体进行稀释，操作过程如下：施予脱腊水化，进行抗原修复，而后封闭，等待一段时间后添加已稀释过的DR-NM23抗体，接着再将HRP标记的链霉亲和素添加至此，通过DAB显色，最后在进行复染脱水和封片。整个操作过程必须要做好相应的消毒工作，确保数据的准确性。

1.3  观察指标

经免疫组织化学法对DR-NM23表达的检测，其结果的判定标准如下：于低倍镜下对免疫组织切片进行观察，初步判断染色达标情况和有无DR-NM23表达的异质性。参照《乳腺癌DR-NM23检测指南，若>10%的肿瘤细胞为不完整且微弱细胞膜着色则为阴性;若>10%的肿瘤细胞为完整且细胞膜呈弱到中等程度着色，或者≤10%的肿瘤细胞为强且完整的细胞膜着色则是不确定。根据染色强度进行计分，即0分对应的是无色，1分对应的是黄色，2分对应的是棕色，3分对应的是褐色;接着再根据阳性细胞在癌组织中所占百分比进行计分，1%所对应的是1分，2%所对应的是2分，3%对应的是3分......以此类推100%对应的是100分。若染色强度的分数与阳性细胞计数的分数相乘所得到的结果≥20，则表示结果呈阳性[4]。根据免疫组织化学切片情况事先明确可能存在扩张浸润癌区域，接着再100倍物镜下对DR-NM23进行观察分析。所有数据均由两位以上专业医师处理分析。

1.4  统计方法

利用专业SPSS 19.0 统计学软件处理和分析数据。计数资料用[n（%）]表示，组间比较用χ2检验;计量数据用（x±s）表示，采用t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。借助于Logistic回归分析DR-NM23在癌组织中和临床各病理参数之间的关系。

2  结果

2.1  DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达分析

通过免疫组织化学法对浸润性乳腺癌病例癌组织中DR-NM23的检测发现，在癌组织以及癌旁组织中DR-NM23基因不管是阳性表达，还是阴性表达，多表达在细胞胞浆内，在50例患者中有13例在癌组织中呈阳性，其表达率为26.0%;在癌旁组织中有43例患者DR-NM23表达呈阳性，其表达率为86.0%。经过分析，二者差异无统计学意义（P>0.05）。13例癌组织中DR-NM23为阳性的患者，其免疫组化平均分数（15.73±8.15）分;43例癌旁组织中DR-NM23呈阳性的患者，其免疫组化平均分数（134.29±54.01）分，通过统计学软件的处理分析发现，癌组织中DR-NM23表达水平和癌旁组织中DR-NM23表达水平相比较，前者明显要低，二者数据比较差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2  DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系分析

DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数之间的关系见表1，通过表1数据的分析发现，癌组织中DR-NM23的表达和雌激素受体水平、组织学分级、TNM分期和淋巴结转移，差异有统计学意义（P<0.05）。DR-NM23和患者年龄、Her-25受体、肿瘤体积大小以及PR受体差异无统计学意义（P>0.05）。通过多因素Logistic回归分析发现，癌组织中DR-NM23的表达和雌激素受体水平、组织学分级、TNM分期和淋巴结转移之间呈负相关，见表2。

3 讨论

浸润性乳腺癌指的是癌细胞已经穿破乳腺导管或者小叶腺泡基底膜且侵入间质的恶性肿瘤，大部分浸润性乳腺癌都是腺癌，起源乳腺实质上皮细胞，尤其是乳腺末梢导管小叶细胞。大量临床实践研究和相关文献报道表示，浸润性乳腺癌存在很多形态学表型，同时根据自身所特有的预后或者临床体征被明确划分成为不同的组织病理学，有报道研究表示，高组织学分级肿瘤在某些化疗方案产生的反应上要比一些低组织学分级肿瘤好。引起浸润性乳腺癌的病因有很多，其中一个主要高危因素就是乳腺癌家族史，另外还包含饮食、相关基因突变、生育和激素失调等，其主要临床表现为乳腺肿块、乳头溢液、皮肤改变、腋窝淋巴结肿大或者乳头、乳晕异常等。目前在浸润性乳腺癌的临床诊断中，多经乳腺X线摄影、乳腺磁共振检查或者彩超等完成。NM23基因家族编码的蛋白质为二磷酸核苷激酶（NDPK），其最早发现于酵母菌和鸽子胸肌中，而后有报道证实该蛋白质活性为该家族共同活性，和细胞分化、增殖活动有着密切的关系[3]。DR-NM23又被叫做NME3或者NM23-H3，该基因表达产物NDPKG的产物以及结构大致一样，仅于氨基末端位置有多个氨基酸，而这些氨基酸能组成疏水性基团，处于表面的NDPKG具备膜连接活性，不管是在体外，还是在体内，借助于膜连接活性均能够使C亚基和A/B亚基结合成为异六聚体[4]。由以上结果可知，50例患者经检测有13例DR-NM23在癌组织中呈阳性状态，即阳性表达率为26.0%;另外经免疫组织检测发现，有43例患者DR-NM23在癌旁组织中呈阳性，其表达率为86.0%，这与林宇等[8]学者在相关研究中得出，68例女性乳腺癌患者经检测，DR-NM23阳性表达率为30.4%，经免疫组织检测发现，在癌旁组织中DR-NM23的阳性表达率为78.6%，与该文所得结果相近。同时，有文献报道表示乳腺癌NM23基因的表达出现异常，提示肿瘤转移抑制的基因NM23降低和肿瘤转移的可能性存在密切的关系，其作用机制可能和癌细胞外基质粘附性下降以及基因突变造成组氨酸蛋白激酶活性下降、癌细胞侵袭生长因子、信号转导能力减弱等因素相关[6-8]。

综上所述，在浸润性乳腺癌中DR-NM23表达水平低，加强DR-NM23的表达和临床病理参数之间关系的研究可为疾病的转移预测以及靶向治疗提供合理的参考依据，确保疾病治疗的安全性。

[参考文献]

[1]  张华成，张丽婷，吴文艺， 等.环指蛋白43在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志，2019，36（12）：2264-2268.

[2]  于秀艳，万广财，孙洪帅， 等.纤维蛋白原与乳腺癌患者预后关系的Meta分析[J].吉林大学学报：医学版，2019，45（5）：1092-1097.

[3]  王阳，屈翔，葛智成，等.绝经后浸润性乳腺癌患者的乳腺密度与病理学指标及分子分型的关系[J].癌症进展，2019，17（19）：2302-2305.

[4]  罗莉，魏曙光，常辽， 等.乳腺癌BRCA1相互作用蛋白1基因功能区单核苷酸多态性与习惯性流产的相关性[J].西安交通大学学报：医学版，2019，40（6）：959-961，972.

[5]  林宇，胡海燕，李清漪， 等.乳腺癌组织中乳腺癌扩增序列2与β-连环蛋白的表达及其相关性研究[J].中國临床药理学杂志，2019，35（19）：2318-2320.

[6]  邱志敏， 傅颖媛. 程序性死亡因子配体1（PD-L1）在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数关系和预后分析[C]//上海：全国免疫学学术大会，2018.

[7]  袁建良，蒋晓波.DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系[J].现代肿瘤医学，2018（23）：3760-3763.

[8]  高玉霞， 沈媛. P53及nm23在不同分子亚型浸润性乳腺癌中的表达及意义[J].诊断学理论与实践，2015（1）：58-61.

（收稿日期：2020-06-17）

[作者简介] 马秀丽（1983-），女，硕士，主治医师，研究方向：乳腺及妇产临床病理。