新辅助化疗乳腺癌对ER、PR、HER-2、Ki-67表达的影响及意义

黄湘秦

【摘要】 目的：探讨乳腺癌患者行新辅助化疗对癌组织ER、PR、HER-2、Ki-67表达的影响。方法：择取2015年6月-2019年6月本院66例乳腺癌外科手术病例，全部患者术前均接受新辅助化疗。化疗前穿刺活检，术后病理组织学检查，测定患者癌组织ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白，比较观察阳性表达情况。结果：ER、PR、HER-2新辅助化疗前后阳性率比较（47.62% vs 49.21%、63.49% vs 65.08%、79.37% vs 77.78%），差异均无统计学意义（字2=1.754、1.622、2.315，P>0.05）。Ki-67新辅助化疗后阳性率（65.08%）明显低于化疗前（77.78%），差异有统计学意义（字2=3.452，P<0.05）。结论：乳腺癌患者行新辅助化疗基本不会改变癌组织ER、PR、HER-2表达，但会造成Ki-67表达水平降低，可用于预测乳腺癌新辅助化疗效果。

【关键词】 乳腺癌 新辅助化疗 雌激素受体 孕激素受体 阳性表达

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.26.019 文獻标识码 B 文章编号 1674-6805（2020）26-00-03

Effects and Significance of Neoadjuvant Chemotherapy for Breast Cancer on ER， PR， HER-2， Ki-67 Expression/HUANG Xiangqin. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（26）： -54

[Abstract] Objective： To explore the effect of neoadjuvant chemotherapy on the expression of ER， PR， HER-2， Ki-67 in breast cancer. Method： From June 2015 to June 2019， 66 cases of breast cancer surgery in our hospital were selected. All patients received neoadjuvant chemotherapy before operation. The expression of ER， PR， HER-2， Ki-67 protein in cancer tissue were measured and compared. Result： There were no statistically significant differences in the positive rates of ER， PR and HER-2 before and after neoadjuvant chemotherapy （47.62% vs 49.21%， 63.49% vs 65.08%， 79.37% vs 77.78%; 字2=1.754， 1.622， 2.315; P>0.05）. The positive rate of Ki-67 after neoadjuvant chemotherapy （65.08%） was significantly lower than that before chemotherapy （77.78%）， the difference was statistically significant （字2=3.452， P<0.05）. Conclusion： The expression of ER， PR and HER-2 in breast cancer tissues will not be changed by neoadjuvant chemotherapy， but the expression level of Ki-67 will be decreased， which can be used to predict the effect of neoadjuvant chemotherapy.

[Key words] Breast cancer Neoadjuvant chemotherapy Estrogen receptor Progesterone receptor Positive expression

First-authors address： Fujian Provincial Jinshan Hospital， Fuzhou 350001， China

乳腺癌是常见恶性肿瘤，临床以女性多见，占比达99.0%。WHO下属国际癌症研究中心（IARC）数据显示，乳腺癌发病率位列世界女性癌症之首，年龄标准化发病率达43.1/10万人，占女性新发肿瘤的35.3%。国内癌症中心发布数据显示，乳腺癌发病率与死亡率分别位居女性癌症的第1位和第6位，而且受生活方式改变、环境改变等因素影响，分别以每年约3.9%和1.1%的速率持续增长，是严重威胁女性生命安全的重大疾病[1]。化疗是乳腺癌重要治疗手段，特别是新辅助化疗的临床应用，可以降低肿瘤分期，为乳腺癌局部治疗创造了有利条件，提高手术治疗率，在改善进展期乳腺癌患者预后方面发挥了重要价值[2]。雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER-2）、增殖细胞核抗原Ki-67是反映乳腺癌生物学特性的重要标志物，可用于明确乳腺癌与激素关系、了解肿瘤细胞增殖活性、判断乳腺癌进展等，可以为指导临床治疗、预测疗效及评估预后提供重要生物学依据[3]。目前，临床对于乳腺癌新辅助化疗是否影响ER、HR、HER-2、Ki-67表达仍存在争议，本研究现择取本院近年收治病例进行分析探讨，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从2015年6月-2019年6月本院肿瘤科收治的乳腺癌患者中择取66例为研究对象。纳入标准：（1）病理组织学检查证实乳腺癌，TNM分期ⅡA～ⅢB期;（2）女性;（3）初治病例;（4）符合2019CSCO乳腺癌诊疗指南术前新辅助治疗标准，以EC-T化疗方案进行治疗。排除标准：（1）治疗方法禁忌或不耐受;（2）临床资料不全。年龄27～69岁，平均（52.18±13.64）岁。未绝经患者36例，绝经患者30例。肿瘤最大径0.9～5.6 cm，平均（2.71±1.54） cm。病理类型：浸润性导管癌54例，浸润性小叶癌9例，其他3例。TNM分期：ⅡA期9例，ⅡB期25例，ⅢA期20例，ⅢB期12例。分化程度：高分化34例，中分化19例，低分化13例。本研究患者签署知情同意书，经医院伦理委员会批准同意。

1.2 方法

新辅助化疗前，全部患者均行超声引导乳腺肿块穿刺活检，以弹射式空心针获取2～3条组织标本，测定ER、PR、HER-2、Ki-67表达情况。新辅助化疗采用EC-T方案，表柔比星（瑞辉制药，国药准字H20000496）90 mg/m2+环磷酰胺（山西普德药业，国药准字H14023683）600 mg/m2+序贯多西他赛（齐鲁制药，国药准字H20041129）75 mg/m2，均为静脉注射3周。后择期行乳腺癌改良根治术或保乳根治术。取术后大体标本行病理组织学检查，同法测定上述指标。

ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白检测采用免疫组化EnVision两步法，检测所用试剂及单克隆抗体均购自DAKO公司。样本组织以酒精梯度脱水，石蜡包埋制成组织块，6 μm层厚连续切片备用。取切片样本脱蜡至水，PBS缓冲液冲洗3次，每次3 min。滴加3%双氧水室温孵育10 min，灭活内源性酶，同法PBS冲洗。滴加一抗，室温下孵育60 min或4 ℃过夜，PBS缓冲液冲洗。滴加二抗，37 ℃孵育30 min，PBS缓冲液冲洗。滴加配制的DAB溶液显色，镜下观察3～5 min，待特定部位阳性表达，自来水冲洗，苏木素复染。酒精梯度脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。

1.3 观察指标与评价标准

参照WHO实体瘤疗效评价标准，评价患者新辅助化疗效果。完全缓解：所有靶病灶消失;部分缓解：靶病灶长径之和较前减少≥30%;进展：出现新病灶，或靶病灶长径之和较前增加≥20%;稳定：介于部分缓解与疾病进展之间[4]。临床缓解率=（完全缓解+部分缓解）/总例数×100%。

镜下观察组织标本ER、PR、HER-2、Ki-67蛋白染色情况。结果判读：以细胞核内可见清晰的棕黄色着色为阳性，根据着色的阳性细胞数分级，阳性细胞数占观察总细胞数百分率<10%为阴性（-），10%～25%为弱阳性（+），26%～75%为中等度阳性（++），>75%为强阳性（+++）[5]。比较观察新辅助化疗前穿刺活检测定的指标阳性表达与术后病理组织学测定的指标阳性表达差异性。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 21.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

經新辅助化疗，患者临床完全缓解12例（18.18%），其中病理完全缓解（pCR）3例（4.55%），部分缓解26例（39.39%），稳定20例（30.30%），进展8例（12.12%），临床缓解率57.58%（38/66）。3例病理完全缓解者无法获得有效病理样本行免疫组化检查，未参与评价，其余患者新辅助化疗前后ER、PR、HER-2、Ki-67表达情况见表1。

化疗后ER阳性表达减弱1例，转阴1例，阳性率（47.62%）较化疗前（49.21%）差异无统计学意义（字2=1.754，P=0.069）;PR阳性表达增强1例，阳性表达转阴1例，化疗后阳性率为63.49%，化疗前为65.08%，差异无统计学意义（字2=1.622，P=0.074）;HER-2阳性表达增强2例，阴性表达转阳1例，阳性率（79.37%）高于化疗前（77.78%），差异无统计学意义（字2=2.315，P=0.055）;Ki-67阳性表达下降9例，阳性表达转阴8例，化疗后阳性率（65.08%）低于化疗前（77.78%），差异有统计学意义（字2=3.452，P=0.043）。

3 讨论

新辅助化疗是乳腺癌重要全身治疗方法，指在局部治疗前予以肿瘤患者全身性细胞毒性治疗，可以缩小癌灶，降低分期，为局部治疗创造条件、提供可能，同时杀灭转移癌细胞，提高治疗敏感性。

根据肿瘤细胞生长、增殖是否受内分泌调控影响，乳腺癌可分为激素依赖性和非激素依赖性两种，其判断标准为正常乳腺上皮细胞发生癌变时，ER和PR有无保留和缺失[6]。其中，细胞仍保留ER和PR的激素依赖性乳腺癌肿瘤生长较为缓慢，全身转移相对少且晚，靶细胞受体含量较高，对内分泌治疗多有疗效反应，预后相对理想，ER和PR出现部分和全部缺失的非激素依赖性乳腺癌则肿瘤生长相对较快，对内分泌干预疗效反应低，更易出现全身转移，预后相对欠理想[7]。因此明确乳腺癌ER和PR表达情况，对评估乳腺癌病情、指导内分泌治疗、评估疗效及判断预后具有重要价值。对于新辅助化疗对乳腺癌组织ER、PR表达的影响，临床研究存在较大争议，尚无定论。有研究表明，乳腺癌新辅助化疗后不会对ER和PR的阳性表达造成明显影响[8]。本研究中，新辅助化疗后ER和PR阳性率较前差异无统计学意义，与文献报道结论一致。不过也有研究显示，新辅助化疗会造成ER、PR受体明显变化，但具体变化趋势在不同的文献报道中也表现出差异性。而且，目前临床尚不明确化疗改变ER表达的内在机制，有研究认为与化疗杀灭了大量ER阴性细胞有关，但具体尚有待进一步认证[9]。另有研究认为，新辅助化疗前后ER、PR表达改变可能与标本取样不同有关，是否受新辅助化疗影响，尚缺乏证据

支持[10]。

HER-2是具有络氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，具有调节细胞增殖与分化的作用，其表达状态与肿瘤发生、进展、对化疗敏感性及预后均密切相关，是研究证实的乳腺癌化疗耐药与预后差的预测因子。本研究中，新辅助化疗后患者HER-2阳性率无明显变化，提示HER-2表达与新辅助化疗疗效无明显相关性。另有研究指出，新辅助化疗后患者HER-2阳性表达明显降低，与本文研究结论不一致，考虑与该研究使用赫赛汀靶向治疗，与本研究用药存在差异有关[11]。Ki-67是乳腺癌热门研究生物指标之一，表达水平同乳腺癌病理分期和组织学分级有关，常被用于检测肿瘤细胞增殖活性，其高表达多提示肿瘤恶性程度高，侵袭性强，预后不良。有研究指出，Ki-67表达水平能反映肿瘤细胞浸润程度，可以用预测到乳腺导管原位癌预后[12]。对于Ki-67阳性表达的患者，目前研究多认为行新辅助化疗疗效更好。国外有研究证实，新辅助化疗有效缓解的乳腺癌患者Ki-67表达阳性率显著高于稳定和进展病例[12]。另有研究显示，新辅助化疗前后Ki-67阳性下降或转阴达55.6%，本研究中患者新辅助化疗后Ki-67阳性表达明显下降，与文献[13]报道结论一致。研究认为，Ki-67表达水平下降常提示肿瘤细胞化疗敏感及自身数量减少，利于患者预后。

综上，乳腺癌患者行新辅助化疗基本不会改变癌组织ER、PR、HER-2表达，但会造成Ki-67表达水平降低，可用于预测乳腺癌新辅助化疗疗效。不过，造成新辅助化疗前后生物学因子改变的因素有很多，本研究结论可能存在一定片面性，有待深入研究，进一步完善。

参考文献

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（收稿日期：2020-04-01） （本文編辑：何玉勤）