花生连作田中土壤微生物群落数量变化分析

李章辉

一、材料与方法

（一）供试土壤

1.大田土壤。2015年4月5日试验安排在延津县马庄乡，土壤类型为沙壤土，土壤肥力一致，采用5点取样法，土层深度10～20 cm。分别取没有种植过花生（简称0年）的土样，上年种植过花生（1年）的土样，连作花生2年（2年）的土样，连作花生3年（3年）的土样，连续3年种植小麦（3年麦）田土样共5种类型。

2.根际土壤。将上述0年、1年、2年、3年的土样用盆栽花生，供试品种为豫花15号。在花生长到团棵期取花生根际土壤，2015年5月16日取花生根际土。

（二）试验方法

1.土壤悬浮液的制备。将采集的土样在自然条件下风干，用研钵研碎过筛。称取过筛细土10 g，放入盛有90 mL无菌水的三角瓶内，即成10-1土壤悬浮液，振荡30 min，趁悬浮液沉淀静止前吸取10 mL，加入另一个盛有90 mL无菌水的三角瓶内，依次稀释至10-6。

2.培养基。真菌用PDA培养基，细菌用牛肉膏蛋白胨培养基。在分离前3 d将制备的培养基倒入灭过菌的培养皿（直径为9 cm），14～15 mL制成平板。

3.接种。真菌用10、10两个浓度，取土壤悬浮液0.05 mL，加入上述制成的培养基平板中，并加入1%链霉素0.05 mL，用“L”形玻璃棒涂抹均匀。细菌取10、10两个浓度，取土壤悬浮液0.05 mL，加入上述制成的培养基平板中，并加入1%链霉素0.05 mL，用“L”形玻璃棒涂抹均匀。细菌取10、10两个浓度，取土壤悬浮液0.05 mL，并加入1%治霉片溶液0.05 mL（以上操作均在无菌条件下进行），每个处理重复3次。

4.菌落培养计数。将接过种的培养皿，用白布盖着停放6 h，然后倒置于28 ℃恒温箱内培养，以后每天定时记录，细菌记录5次，真菌记录7次（菌落数不再发生变化）。

二、结果与分析

（一）花生不同连作年限大田土壤微生物中主要种类（真菌、细菌）的数量变化

花生连作，由于花生根系分泌物、残留在土壤中的植株及管理方法的相同，形成了特定的连作花生土壤微生物区系，其中突出的特点是真菌随着连作年限的增加而大量增加，细菌随着连作年限增加而大量减少（见表1）。由表1可知，种植1年的花生土壤中真菌数量比种植0年的花生土壤中真菌数量增长37.9%，种植3年的花生土壤中真菌数量比种植0年的花生土壤中真菌数量增长144.8%。连作1年的花生土壤中细菌数量较种植0年的花生土壤中真菌数量降低14.8%，种植3年的花生土壤中细菌数量比种植0年的花生土壤中真菌数量降低50.6%，表明土壤微生物中真菌和细菌的平衡发生了较大改变。

种植0年的花生土壤中的细菌数量与真菌数量的比值为512.6，而种植3年的花生土壤中，其比值为103.3。可见连作使土壤由细菌型向真菌型改变，导致地力衰竭，花生生长不良，植株矮小。真菌中的許多菌是花生病害的病原菌，连作花生田根腐病、茎腐病明显增加。

（二）花生不同连作年限根际土壤中微生物主要种类（真菌、细菌）的数量变化

1.花生不同连作年限根际土壤中真菌的数量变化。花生根际土壤中真菌受花生和土壤两方面的影响，由于连作造成花生植株长势、根系活性的差异及土壤本身与土壤中基数的差异，根际土壤中真菌也受到明显变化。花生根际土壤中真菌数量的变化，总的趋势是随着连作年限的增加而增加（见表2），由表2可知，种植1年花生的根际土壤中真菌数量增长26.7%，种植3年花生的根际土壤中真菌数量增长120%。真菌数量的增加，表明土壤有机质和潜在养分的释放量减少。

2.不同连作年限根际中土壤细菌数量的变化。土壤中根际细菌也受到花生和土壤的影响，根际微生物中细菌的代谢作用加速了有机物的分解，促进了植物营养元素的转化，代谢产生的酸类，促进土壤中磷素和其他矿物质养料的可给性。由表2可知，花生根际土壤中细菌数量的变化，总的趋势是随着连作年限的增加而减少，种植1年花生的根际土壤中细菌数量降低27.8%，种植3年花生的根际土壤中细菌数量降低72.9%。

三、小结与讨论

随着花生连作年限的增加，土壤中真菌数量增加，细菌数量减少，细菌数与真菌数的比值减小，证明连作使细菌型土壤向真菌型土壤转化。根际微生物也随着连作年限的增加促使真菌数量增加，细菌数量减少。

由于花生连作使土壤中的微生物出现微生物总数减少（真菌数量增加，细菌数量减少）的趋势，通过补充生物肥料来解决微生物总数减少的问题，微生物总数增加的同时有害微生物数量也会增加，通过施用抑制菌或抗生素药物对其进行抑制或拮抗，可达到增产的目的。