咽拭子核酸检测的那些疑惑

2020-11-13应雨妍

祝您健康 2020年11期

应雨妍

● 样本是如何采集的

在进行咽拭子核酸检测时，采样人员一般会让大家微微仰头，张大嘴巴。然后，他们会用一根长棉签在双侧扁桃体和舌根后较深处的咽后壁刮擦采样。采集结束之后，采样人员会把棉签放进有采样液的采样管里，然后拧紧盖子。过程非常简单，受试者可能会有干呕、咳嗽的反应，不过采集结束后很快就可以恢复。

● 为什么使用咽拭子

核酸检测可以采集的部位或分泌物有很多，如鼻咽部位、支气管和肺泡灌洗的灌洗液、痰液和血液。那么，为什么要采用咽拭子核酸检测呢？

在这些方法中，血液通常不大能检测出新冠病毒。血液能检测到的是身体针对新冠病毒产生的抗体，但产生抗体只能说明受试者感染过病毒，不能判断他目前是否是感染者。而且抗体的产生需要时间，在感染之初，可能无法检测到抗体的存在。因此，用血液样本进行筛查是不可行的。

其余的几种方法中，支气管和肺泡灌洗液的敏感性最高，可以達到93%;痰液样本稍弱，为72%。通俗地说，敏感性评判的是检测方法准确判断感染者的成功率，93%就相当于在100个感染者中，通过支气管和肺泡灌洗液检测可以成功发现93个。

但这三种方法显然都更适合已经确诊且住院的患者，而且采样人员需要更高级别的安全防护，对于大规模的筛查来说并不太现实。根据研究，新冠病毒的受体ACE2在上皮细胞和平滑肌细胞上有丰富的表达，在上呼吸道（包括鼻、咽、喉部）中，病毒有很高的复制水平。因此，鼻拭子和咽拭子提取的上呼吸道上皮细胞和分泌物中可以捕捉到病毒。

很多人在网上看过鼻拭子采集示意图。进行鼻拭子采集时，采样人员要把棉签插入到受试者的鼻腭处，还要转动拭子，充分采样后鼻拭子再退出。如果达不到足够的深度，很可能采集不到足够的病毒，无法检测受试者是否受到感染。鼻拭子可能导致的不适反应包括疼痛、呕吐反射和流泪，相对咽拭子来说，生理上的不适感和心理上的抵触感会更强烈，而且对采样人员也有更高的专业要求。

根据目前的研究，鼻拭子与咽拭子的准确程度一般是等同的，或略高于咽拭子。《自然》杂志上的一项研究发现，在患者感染病毒刚刚出现轻微症状时，咽拭子检测就已经呈阳性了，在之后的7天里，咽拭子提取到的病毒载量都很高，峰值在第4天出现。而在整个病程中，鼻拭子和咽拭子的病毒载量和检出率是没有差异的。

因为新冠病毒的感染途径主要经由上呼吸道，这表明，在感染之初，病毒可能在上呼吸道中大量复制，然后随着疾病的进程，通过呼吸道黏膜进入人体，深入到其他器官。在上呼吸道中病毒载量下降，载量过低的情况下，就无法呈现阳性结果了，所以，在接触病毒后的感染早期，单次咽拭子采样结果作为大规模初筛的方式是可行的，但不能用于最终确诊的依据。

● 咽拭子采样后，如何确认是否感染

为什么咽拭子核酸检测可以帮助我们判断是否感染新冠病毒？实际上，仅仅依靠咽拭子本身是不行的，我们需要依靠的是PCR，也就是聚合酶链式反应。它的原理主要是把拭子采集到的遗传物质RNA提取出来，经过逆转录变成与RNA互补的DNA（cDNA），然后用PCR进行扩增。PCR体系里包含一段由特异性序列组成的探针，被荧光基因标记，遇到要检测的代表病毒的靶序列时，就会与它结合，发出荧光。每扩增一条这样的DNA链，就会产生一个荧光分子。

检验人员用荧光定量PCR仪进行检测时，会设置一个荧光分子数的阈值，监测达到阈值需要多少次循环扩增，需要的循环次数越少，样本中病毒核酸浓度越高。在检测中循环次数小于某个固定值的，就会被判定为阳性结果。