血清胆红素、肌酸激酶同工酶MB质量与新生儿日龄的相关性

郑高明， 苏晓茹

（杭州师范大学附属医院医学检验科，浙江 杭州 310015）

由于胆红素生成过多，肝脏对胆红素摄取和结合能力下降，肠-肝循环增加，因此新生儿高胆红素血症较为常见[1]。国内外关于高胆红素血症引起心肌酶升高的报道很多，但新生儿高胆红素血症是否伴随心肌损伤及其机制仍存在争议。目前，对正常新生儿血清胆红素、肌酸激酶同工酶MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）水平与日龄的关系研究较少。探讨正常状态新生儿日龄与血清胆红素、CK-MB水平的关系有助于完善新生儿胆红素血症及心脏损伤机制，对建立新生儿胆红素和CK-MB参考区间也有一定的价值。因此，本研究选取日龄为0～28 d的新生儿，通过检测血清总胆红素（total bilirubin，TB）、直接胆红素（direct bilirubin，DBil）和肌酸激酶同工酶MB质量（creatine kinase isoenzyme MB mass，CK-MB mass）水平，探讨血清胆红素和CK-MB mass与日龄的相关性。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2018年12月—2019年12月杭州师范大学附属医院新生儿科新生儿106名，其中男婴53名，日龄（6.98±5.51）d；女婴53名，日龄（8.21±6.00）d；根据出生天数分为3组：≤5 d组[48名，出生体质量（3.32±0.60）kg]、＞5～≤10 d组[32例，出生体质量（3.29±0.70）kg]、＞10～≤28 d组[26例，出生体质量（3.34±0.50）kg]。所有新生儿均符合：（1）胎龄满37周～＜42周，出生体质量≥2 400 g，无宫内窘迫及生后窒息史；（2）无先天性心脏病、缺血缺氧性脑病、严重感染等影响心肌酶测定结果的疾病。3组胎龄和出生体质量差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

本研究所用的血清样本均为完成其他检测后的剩余血清。采用重氮法检测TB和DBil，试剂盒均购自美国贝克曼库尔特公司（批号分别为2588、2587）。采用胶乳免疫比浊法测定CK-MB mass，试剂盒购自北京九强生物技术股份有限公司（批号为19-0916）。检测仪器为AU5800全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特公司）。

1.3 统计学方法

采用SPSS 25.0软件进行统计分析。呈非正态分布的数据以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，组间比较采用非参数Wilcoxon秩和检验。相关性分析采用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同出生天数新生儿血清TB、DBil、CKMB mass水平的比较

＞5～≤10 d组血清TB水平明显高于≤5 d组和＞10～≤28 d组（P＜0.001），＞10～≤28 d组血清DBil水平明显高于≤5 d组和＞5～≤10 d组（P＜0.001），≤5 d组、＞5～≤10 d组、＞10～≤28 d组血清CK-MB mass水平依次降低（P＜0.05）。见表1。

表1 不同出生天数新生儿血清TB、DBil、CK-MB mass水平的比较

2.2 血清TB、DBil、CK-MB mass水平与新生儿日龄的相关性

TB与日龄无相关性（r=0.038，P＞0.05），DBil与日龄呈正相关（r=0.469，P＜0.05），CK-MB mass与日龄呈负相关（r=-0.559，P＜0.05）。见图1。

图1 血清TB、DBil、CK-MB mass水平与新生儿日龄的相关性

3 讨论

胆红素在体内具有保护和损伤的双重作用。生理浓度的胆红素既是强氧化剂又是自由基清除剂，对心、脑、血管等多种组织器官具有保护作用，但浓度过高时又可对机体造成不同程度的损伤[2]。高胆红素血症是新生儿的常见疾病之一，早产儿发病率约为80%，足月儿发病率约为60%，若不及时进行有效治疗，不仅会引起患儿神经系统损伤，还可能引发神经外器官或组织损伤，对新生儿的健康造成严重影响[3-4]。

目前，临床主要通过检测新生儿血清胆红素水平来指导新生儿高胆红素血症的治疗。当血清TB＞221.0 μmol/L 或每日升高≥85.0 μmol/L，且血清结合胆红素＜34.0 μmol/L，便可确诊为高胆红素血症。然而，对高胆红素血症是否伴随器官损伤及其诊断方案并未统一，且脏器损伤常与胆红素升高不完全一致，这给临床的诊断和治疗带来一定的困难。由于多数高胆红素血症新生儿心肌损伤的临床表现不明显或因其他系统受累导致心肌损伤症状被忽视，因此临床希望能有一种可灵敏地反映心肌损伤的标志物。

目前常用的心肌损伤标志物有心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白I、CK-MB等。CK-MB绝大部分存在于心肌细胞的外浆层，心肌以外的细胞中含量甚微，因此血清 CK-MB水平的高低可较特异性地反映心肌损伤的程度[5]。由于肌钙蛋白在心肌损伤发生6 h以内时敏感性较低[6]，因此肌钙蛋白与CK-MB联合检测可以提高心肌损伤诊断的准确性。传统的CK-MB活性检测建立在忽略肌酸激酶同工酶BB干扰的基础上，具有一定的局限性。本研究采用质量法检测CK-MB mass，用单克隆抗体直接识别CK-MB，排除了肌酸激酶同工酶BB、巨肌酸激酶及腺苷酸激酶的干扰，特异性和敏感性均高于传统的CK-MB活性检测[7-8]。

目前，新生儿高胆红素血症是否伴随心肌损伤及其机制仍存在争议。有研究结果显示，新生儿病理性黄疸可出现心肌损伤，患儿心肌酶升高与黄疸的严重程度和持续时间呈正相关（r=0.902）[9]，原因可能是未结合胆红素为脂溶性的，可以透过细胞膜进入细胞内，干扰细胞的代谢，导致心肌细胞损伤，与文献报道[10-11]一致。然而，也有研究结果显示，高胆红素血症患儿的CK-MB水平与血清TB水平并无明显关联[1]，新生儿高胆红素血症不会对CK-MB产生明显影响，CK-MB 与日龄呈负相关（r=-0.375，P＜0.001）[12]，与本研究结果一致。

本研究结果显示，＞5～≤10 d组血清TB水平明显高于≤5 d组和＞10～≤28 d组（P＜0.001），DBil与日龄呈正相关（r=0.469，P＜0.05）。原因可能是随着新生儿成长，肝脏快速发育成熟，对胆红素摄取和结合能力逐步提高，导致DBil逐渐升高，而由于各种生理或病理原因导致非结合胆红素存在及升高，使得＞5～≤10 d组TB水平显著高于其他2个组，因此要格外关注日龄为＞5～≤10 d的新生儿非结合胆红素升高导致的高胆红素血症。此外，本研究结果还显示，CKMB mass与日龄呈负相关（r=-0.559，P＜0.05）。随着日龄的增长，新生儿CK-MB mass逐渐降低。这表明新生儿CK-MB mass升高不一定是由心肌损伤导致的，可能是由新生儿早期特殊的生理特点导致的暂时性增高，需关注新生儿的CK-MB参考区间，并结合其他检查或肌钙蛋白等指标综合评判高胆红素血症新生儿是否存在心肌损伤。关于新生儿高胆红素血症是否伴随心肌损伤目前存在2种不同的研究结论，这可能是由于新生儿有其特殊的生理、病理特点，不同的研究结论基于不同的病例数、病例选取的局限性等原因导致的。

总之，新生儿血清DBil、CK-MB mass水平与日龄有一定的关系。由于本研究的样本量较小，所用样本为其他检测后的剩余血清，量极少，且由于方法学问题和样本种类的要求，未能检测心肌肌钙蛋白等心肌损伤标志物。后续将扩大样本量，进一步研究新生儿高胆红素血症与心肌损伤的关系，同时建立新生儿相关标志物的参考区间。