60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂高效液相色谱分析

俞建忠，邵贵芳，陈列忠，侯佳音，俞瑞鲜，胡秀卿，赵学平

(浙江省农业科学院农产品质量标准研究所 部省共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室(筹)农业部农药残留检测重点实验室，浙江 杭州 310021)

噁唑菌酮(famoxadone)是美国杜邦公司研制的一种新型高效、广谱性杀菌剂，主要通过阻断泛醌醇酶，抑制病原菌的孢子释放，起到杀菌作用，可用于防治多种作物的白粉病、晚疫病、霜霉病、锈病等，且对后茬作物安全、无药害[1]。氰霜唑(cyazofamid)是日本石原产业研发的一种磺胺咪唑类杀菌剂，具有高效、低毒、环境友好等特点，主要用于防治卵菌类病害，如疫病、霜霉病等，目前已在大白菜、番茄、黄瓜、荔枝树、马铃薯、葡萄、西瓜等作物上登记使用[2-3]。

目前，噁唑菌酮的检测方法有气相色谱法和液相色谱法[4-6]，氰霜唑的主要分析方法为液相色谱法[2，7]，二者复配制剂的分析法已有报道，采用气相色谱法进行分析[8]，但适用性更为广泛的液相色谱法尚未见报道。本文采用高效液相色谱法同时对噁唑菌酮和氰霜唑进行定性和定量。该方法操作快速、准确、便捷，适用于该产品的质量检测。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪Agilent1100，具有二极管阵列检测器和色谱工作站；色谱柱为ZORBAX Eclipse-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；过滤器(孔径0.45 μm有机膜)。BSA224S电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司)；超声波清洗机(昆山舒美有限公司)。噁唑菌酮标准品(质量分数98.0%，沈阳化工院研究有限公司)；氰霜唑标准品(质量分数97.2%，沈阳化工院研究有限公司)；乙腈(色谱纯，德国默克公司)；纯净水(杭州娃哈哈公司)；60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂试样(农药厂提供)。

1.2 液相色谱操作条件

流动相：乙腈+水(体检比70∶30)；检测波长：220 nm；流量为1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；进样体积5 μL；保留时间：氰霜唑约8.7 min，噁唑菌酮约10.0 min。典型的噁唑菌酮和氰霜唑标样及试样高效液相色谱图见图1～2。

图1 噁唑菌酮和氰霜唑标样高效液相色谱

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

称取噁唑菌酮标样约0.065 g(精确至0.000 1 g)和氰霜唑标样约0.05 g(精确至0.000 1 g)置于100 mL容量瓶中，加入适量乙腈溶解，超声波振荡5 min后冷却至室温，再用乙腈稀释至刻度，摇匀备用。

图2 60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂高效液相色谱

1.3.2 试样溶液的配制

称取60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂试样约0.2 g(精确至0.000 1 g)置于100 mL容量瓶中，加入适量乙腈溶解，超声波振荡5 min后冷却至室温，再用乙腈稀释至刻度，摇匀过滤备用。

1.3.3 测定

在上述高效液相色谱仪器条件下，仪器基线走稳后，连续注射标样溶液，直至标样溶液的峰面积响应值相邻两针相对变化小于1.2%后，按照一针标样溶液、两针试样溶液、一针标样溶液的进样顺序进行含量测定。

1.3.4 质量分数计算

试样中按式(1)计算：

(1)

式中：ω1为试样中噁唑菌酮或氰霜唑的质量分数(%)，A2为试样溶液中噁唑菌酮或氰霜唑峰面积的平均值(将测得的两针试样溶液中噁唑菌酮或氰霜唑面积分别进行平均)，m1为标样的质量的数值(g)，ω为标样中噁唑菌酮或氰霜唑的质量分数(%)，A1为标样溶液中噁唑菌酮或氰霜唑峰面积的平均值(将测得试样前后两针标样溶液中噁唑菌酮或氰霜唑面积分别进行平均)，m2为试样的质量的数值(g)。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

通过Agilent 1100高效液相色谱仪二极管阵列检测器的全波段扫描功能，获得氰霜唑和噁唑菌酮的紫外吸收光谱图(图3～4)。

图3 氰霜唑紫外吸收谱

图4 噁唑菌酮紫外吸收谱

从紫外吸收谱图中可知，氰霜唑最大吸收波长在280 nm处，噁唑菌酮最大吸收波长在230 nm处。为避免溶剂对其干扰，且两者均有较强的紫外吸收，试验选择220 nm为检测波长。根据噁唑菌酮和氰霜唑的物理化学性质，考虑到被试物的溶解性，选用溶剂乙腈溶解样品，选择乙腈和水混合溶液作为流动相，将流动相按乙腈+水不同体积比进行分离试验，最终确定流动相为Ψ(乙腈∶水)=70∶30，流速为1.0 mL·min-1。在该条件下，各组分分离良好，色谱峰峰形尖锐、对称，分离时间较短。

2.2 方法的线性相关性试验

准确称取噁唑菌酮标样0.0 961 g和氰霜唑标样0.0 514 g，置于同一25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀备用。用移液管分别移取上述标样溶液0.5、1.0、2.0、2.5、5.0 mL于5个10 mL容量瓶中，用乙腈稀释到刻度，摇匀，配制噁唑菌酮、氰霜唑标准溶液。待仪器稳定后，在上述色谱条件下，按浓度从低到高的顺序进样，每个浓度进样2次。以噁唑菌酮(氰霜唑)的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到噁唑菌酮线性回归方程y=14.992x+202.8，线性相关系数为0.999 4；氰霜唑线性回归方程y=8.8518x+33.83，线性相关系数为0.999 5。试验结果表明该方法线性关系良好。

2.3 方法的精密度试验

在上述高效液相色谱操作条件下，准确测量5个60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂试样的含量，计算标准偏差和变异系数。表1显示，噁唑菌酮标准偏差为0.11，变异系数为0.32%；氰霜唑标准偏差为0.22，变异系数为0.86%，表明该方法精密度较好。

表1 精密度试验结果

2.4 方法的准确度试验

准确称取5份已知含量的60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒剂试样，在每份试样中分别加入一定量的噁唑菌酮和氰霜唑标样，在相同条件下测定其含量，计算标样添加回收率。表2显示，测得噁唑菌酮平均回收率为99.31%；氰霜唑平均回收率为99.81%，表明该方法准确度较高。

表2 准确度试验结果

3 小结

使用高效液相色谱法同时检测混剂中噁唑菌酮和氰霜唑的含量。该方法在测试浓度范围内线性关系良好，分析时间短，方法精密度和准确度高，操作简单、快速，是噁唑菌酮和氰霜唑复配制剂理想的分析测定方法。