非酒精性脂肪肝病患者血清LAC、FFA与胰岛素抵抗的关系研究

2020-11-03鄂建飞李贵星

国际检验医学杂志 2020年20期

鄂建飞，何訸，贺勇，罗薇，李贵星△

(1.德阳市人民医院检验科，四川德阳 618000；2.四川大学华西医院实验医学科，四川成都 610041)

近年来，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)已经成为全球重要的公共卫生问题，并成为我国第一大慢性肝病[1]。来自北京、上海等地区的流行病学调查结果显示，NAFLD患病率近10年从15.0%增加到31.0%[2]。四川成都地区普通成人NAFLD的患病率为17.1%，代谢综合征(MS)患者的NAFLD患病率更是达到了58.0%[3]。BALLESTRI等[4]研究显示，NAFLD患者发生糖尿病的风险较非NAFLD者高，同时，NAFLD患者发生MS的风险也高于非NAFLD患者(P<0.05)。ALLEN等[5]使用多态模型研究NAFLD对病死率的影响，结果显示NAFLD患者10年病死率为10.2%，明显高于对照组的7.6%，NAFLD患者预期寿命缩短了4年。因此，探讨NAFLD发病机制对于延长患者的生命具有重要意义。本研究探讨了NAFLD患者血清乳酸(LAC)和游离脂肪酸(FFA)与胰岛素抵抗(IR)的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2018年10月至2019年10月就诊于四川大学华西医院的NAFLD住院患者102例作为病例组，年龄16～69岁。NAFLD的诊断符合《非酒精性脂肪性肝病防治指南》中的临床诊断标准[1]。选取同期四川大学华西医院体检中心100例体检健康者作为对照组，年龄20～70岁。排除标准：(1)重症感染、手术、外伤等引起的继发性肝功能损伤者；(2)有过量饮酒史，男性摄入的乙醇量每周≥140 g，女性每周≥70 g；(3)有下列任何一项可导致肝脏脂肪沉积的特定疾病，包括病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、药物性肝病、肝豆状核变性病等；(4)服用保肝药、降脂药或可造成肝脏脂肪沉积的药物者；(5)不符合纳入标准、临床数据资料不完整影响判断者。病例组与对照组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法通过调查问卷收集研究对象基本信息。研究对象于检测前3 d内避免高脂饮食，检测前1 d 24:00后禁食。抽取所有研究对象空腹静脉血，放置30 min后，置于离心机以3 000 r/min离心15 min，上机检测。采用罗氏Cobas 8000全自动生化分析仪及配套试剂检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、空腹血糖(FBG)、LAC。FBG和LAC检测使用氟化钠抗凝采血管采集标本。采用北京利德曼试剂检测FFA；采用罗氏Cobas E601化学发光分析仪及配套试剂检测空腹胰岛素(FINS)。检测相关指标所用方法：(1)TC采用氧化酶法；(2)TG采用氧化酶法；(3)HDL-C采用氧化酶法；(4)LDL-C采用氧化酶法；(5)ALT采用酶法；(6)AST采用酶法；(7)FBG采用己糖激酶法；(8)LAC采用氧化酶法；(9)FFA采用氧化酶法；(10)FINS采用化学发光法。依据FBG和FINS计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：HOMA-IR=FBG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5。

2 结果

2.1两组间生化指标比较病例组FBG、FINS、HOMA-IR、TG、ALT、AST、FFA、LAC水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；病例组HDL-C水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；病例组和对照组TC、LDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 病例组和对照组间生化指标的比较

组别nHDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)FFA(mmol/L)LAC(mmol/L)ALT(U/L)AST(U/L)病例组1021.18±0.332.86±0.851.35±0.552.01±0.8862.0±38.037.0±17.0对照组1001.66±0.352.67±0.560.95±0.481.08±0.5322.0±10.021.0±6.00t-9.8811.8385.4299.1487.6057.748P<0.0010.068<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2NAFLD患者血清LAC、FFA水平与各因素相关性分析 Pearson相关分析显示，血清LAC与HOMA-IR、TG、FFA呈正相关(r=0.714、0.349、0.408，P<0.05)。血清FFA与HOMA-IR、TG、LAC呈正相关(r=0.521、0.260、0.408，P<0.05)，与HDL-C呈负相关(r=-0.349，P<0.05)，见表2。

表2 血清LAC、FFA水平与各因素相关性分析

2.3多元逐步回归分析以LAC为因变量，以FBG、FINS、HOMA-IR、TG、HDL-C、ALT、AST、FFA为自变量进行多元逐步回归分析。结果显示，LAC与HOMA-IR、FFA呈正相关(P<0.05)，见表3。以FFA为因变量，以FBG、FINS、HOMA-IR、TG、HDL-C、ALT、AST、LAC为自变量进行多元逐步回归分析。结果显示，FFA与HOMA-IR、TG、LAC呈正相关(P<0.05)，见表4。

表3 血清LAC与各变量关系的多元逐步回归分析

表4 血清FFA与各变量关系的多元逐步回归分析

3 讨论

本研究结果显示，病例组患者LAC水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，同时，Pearson相关分析显示，血清LAC与HOMA-IR呈正相关(r=0.714，P<0.05)，表明IR与NAFLD患者血清LAC升高密切相关。QVISTH等[6]发现在注射胰岛素后，LAC水平增加，并且在脂肪组织中比骨骼肌组织中增加得更为明显，表明在高胰岛素状态下，LAC水平是由肌肉以外葡萄糖代谢率决定的。研究表明，IR使线粒体丙酮酸利用减少，糖无氧酵解作用增加，导致LAC生成增多[7]。当机体出现IR，机体能量供应由红细胞葡萄糖酵解补充，秦永军等[8]报道，脂肪肝组红细胞水平较非脂肪肝组显著增加，红细胞利用葡萄糖增加，LAC水平升高。另外，研究发现LAC可以通过丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)诱导白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎性因子的表达，引起氧化应激，进而引起脂肪变性的肝细胞反生炎症、坏死甚至纤维化，加重NAFLD患者的病情[9]。本研究结果显示，病例组患者FFA水平为(1.35±0.55)mmol/L，对照组FFA 水平为(0.95±0.48)mmol/L，病例组患者血清FFA水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，表明FFA与NAFLD的发生密切相关。Pearson相关分析显示，血清FFA水平与HOMA-IR呈正相关(r=0.521，P<0.05)，与张旭艳等[10]提出IR与血清FFA升高密切相关结果一致。SANYAL等[11]利用高胰岛素正常葡萄糖钳夹试验观察到IR出现时伴有血清FFA升高。另外，LAGATHU等[12]发现，增多的FFA可通过使胰岛素的信号转导抑制因子3高表达而加重IR。FFA代谢异常贯穿于NAFLD的整个发病过程[13]。FFA在NAFLD的发生、发展中起着重要的作用，FFA水平增加是NAFLD的特征表现，也是引起脂质过氧化、肝细胞损伤、炎症激活、能量代谢障碍、脂肪细胞凋亡等的关键因素。

本研究以LAC为因变量进行多元逐步回归分析，结果显示，LAC与HOMA-IR、FFA呈正相关(P<0.05)，表明LAC水平升高与IR、FFA密切相关。以FFA为因变量进行多元逐步回归分析，结果显示，FFA与HOMA-IR、LAC呈正相关(P<0.05)，表明FFA水平升高与IR和LAC密切相关。其可能的机制为IR导致LAC水平升高，LAC通过乳酸脱氢酶转化为丙酮酸，丙酮酸通过丙酮酸脱氢酶复合体生成乙酰辅酶A(CoA)，乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下转化成丙二酸单酰CoA，再经过缩合、还原、脱水，再还原基本反应循环合成脂肪酸。催化反应的乙酰CoA羧化酶是脂肪酸合成的关键酶，并且胰岛素能够通过蛋白磷酸酶的去磷酸化作用，使磷酸化的乙酰CoA羧化酶脱磷酸激活，高浓度胰岛素促进乙酰CoA向丙二酸单酰CoA转化[14]。MUOZ等[15]通过动物实验发现，IR后葡萄糖酵解通量增加，导致LAC释放增加，并指出间接途径(葡萄糖-乳酸-3-磷酸甘油)是脂肪沉积的重要途径。