自拟活血软坚方辅治慢性乙型肝炎肝纤维化疗效及对T 淋巴细胞亚群的影响

张莉莉 李月翠 李成行 胡伟跃

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染可致机体免疫缺陷，慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者可逐步由肝纤维化进展为肝硬化、肝癌[1]。肝纤维化形成机制复杂，目前西医治疗只针对病因进行抗病毒、保肝等措施，疗效欠佳[2]。中医认为CHB 基本病机为正虚血瘀，导致肝胆瘀滞，临床治疗多在活血化瘀，清利湿热的基础上兼以补肾，以标本兼治[3-4]。本研究探讨自拟活血软坚方辅治CHB 肝纤维化患者临床疗效及其对T 淋巴细胞亚群的影响，报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 连续选取2018 年1 月—2019 年6月浙江省永康市第一人民医院感染性肝病科诊断为CHB 伴肝纤维化患者100 例，依据随机数字表法分为对照组和研究组，各50 例。本研究经本医院临床课题医学伦理审查，符合《赫尔辛基宣言》，所有患者均签署知情同意书。

1.2 纳入标准 （1）符合CHB 伴肝纤维化的诊断标准[5]；（2）符合《中医内科学》[6]气虚血瘀型诊断标准；（3）年龄18～65 周岁；（4）近6 个月内未服用抗病毒药物和（或）近1 个月内未服用保肝降酶药物者。

1.3 排除及剔除标准 排除标准：（1）同时伴有其他类型病毒感染；（2）由药物中毒或其他原因引起的肝炎及自身免疫性肝炎者；（3）伴有严重心、脑、肾、肺、内分泌和造血系统原发性疾病者；（4）妊娠及哺乳者；（5）对本研究相关药物过敏者。剔除标准：（1）未按时服药或未完成完整检查者；（2）使用其他治疗而影响结果评估者；（3）出现严重药物不良反应者。

2 方 法

2.1 治疗方法 对照组予恩替卡韦分散片（苏州东瑞制药有限公司，规格：0.5mg/片，批号18061711、160517104）0.5mg 口服，1 次/天，双环醇片（北京协和药厂，规格：25mg/片，批号171004、181205）50mg 口服，3 次/天；研究组在对照组基础上加用自拟方活血软坚免煎颗粒剂，药物组成：鳖甲、三棱、莪术各8g，三七粉1g，丹参12g，淫羊藿10g，黄芪25g，党参、女贞子、墨旱莲各12g，灵芝粉2g，甜叶菊3g（中药颗粒均由广州一方制药有限公司生产）口服，1 天1 剂，早晚分服。两组疗程均为48 周。

2.2 观察指标

2.2.1 证候积分 参照《肝硬化中西医结合诊治共识》[7]，于治疗前后评估胁痛、腹胀、黄疸、肝脾肿大、舌质等主要证候，量化评分按照无（0 分）、轻度（2分）、中度（4 分）、重度（6 分）计算；次要证候评估乏力、纳差、肝掌蜘蛛痣、口干口苦，量化评分按照无（0分）、轻度（1 分）、中度（2 分）、重度（3 分）；证候总积分为上述证候量化积分之和。

2.2.2 生化指标检测 治疗前、治疗48 周所有患者清晨抽取空腹肘静脉血，采用全自动生化分析仪（SIEMENS，型号：ADVIAI2400）测定肝功能[丙氨酸氨基转移酶（ALT）、为天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（TBIL）]；采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法测定肝纤维化指标[Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）、透明质酸酶（HA）；采用流式细胞计数仪（BD，型号：FACSCanto Ⅱ）测定T 淋巴细胞亚群百分率（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）。

2.2.3 不良反应 记录48 周内所有药物相关不良反应。

2.3 疗效标准[8]痊愈：证候总积分下降≥95%；显效：证候总积分下降≥70%≤95%，证候均明显改进；有效：证候总积分下降≥30%≤70%，证候均改进；无效：证候总积分下降＜30%，证候加重。痊愈、显效、有效均作治疗有效计算。于治疗后进行疗效评估。

2.4 统计学方法 应用SPSS 17.0 软件统计。计量资料以均数±标准差（） 表示，正态分布数据比较采用两独立样本t 检验和配对t 检验，非正态分布数据比较采用轶和检验；计数资料比较采用χ2检验（双侧）。P＜0.05 为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 两组CHB 伴肝纤维化患者一般资料比较 研究期间对照组2 例患者未完成总疗程而剔除，纳入48 例；研究组无剔除，纳入50 例。两组患者性别、年龄、病程一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组CHB 伴肝纤维化患者一般资料比较

3.2 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后证候总积分变化 治疗48 周后，两组患者证候总积分均明显下降（P＜0.01），两组间比较，研究组下降更明显（P＜0.01）。见表2。

表2 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后症候总积分比较（分，）

表2 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后症候总积分比较（分，）

注：对照组予以恩替卡韦分散片联合双环醇片；研究组在对照组基础上加用活血软坚方；CHB 为慢性乙型肝炎；与同组治疗前比较，aP＜0.01；与对照组治疗后比较，bP＜0.01

3.3 两组CHB 伴肝纤维化患者临床疗效比较 治疗48 周后，研究组临床疗效高于对照组（P＜0.05）。见表3。

表3 两组CHB 伴肝纤维化患者临床疗效比较[例（%）]

3.4 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝功能指标比较 治疗后，两组患者肝功能各指标（ALT、AST、GGT、TBIL）明显改善（P 均＜0.01），研究组较对照组改善更明显（P＜0.05，P＜0.01）。见表4。

3.5 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝纤维化指标比较 治疗后，两组患者肝纤维各指标（Ⅳ-C、PCⅢ、LN、HA）明显改善（P 均＜0.01），研究组改善更明显（P＜0.05，P＜0.01）。见表5。

表4 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝功能指标比较（）

表4 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝功能指标比较（）

注：对照组予以恩替卡韦分散片联合双环醇片；研究组在对照组基础上加用活血软坚方；CHB 为慢性乙型肝炎；ALT 为丙氨酸氨基转移酶；AST 为天冬氨酸氨基转移酶；GGT 为谷氨酰转肽酶；TBIL 为总胆红素；与同组治疗前比较，aP＜0.01；与对照组治疗后比较，bP＜0.05，bbP＜0.01

表5 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝纤维化指标比较（μg/L，）

表5 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后肝纤维化指标比较（μg/L，）

注：对照组予以恩替卡韦分散片联合双环醇片；研究组在对照组基础上加用活血软坚方；CHB 为慢性乙型肝炎；Ⅳ-C 为Ⅳ型胶原；PCⅢ为Ⅲ型前胶原；LN 为层粘连蛋白；HA 为透明质酸酶；与同组治疗前比较，aP＜0.01；与对照组治疗后比较，bP＜0.01

3.6 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后T 淋巴细胞亚群比较 治疗后，两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显升高（P 均＜0.01），CD8+明显下降（P＜0.01），研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高更明显（P＜0.05，P＜0.01），CD8+下降更明显（P＜0.05）。见表6。

表6 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后T 淋巴细胞亚群比较（）

表6 两组CHB 伴肝纤维化患者治疗前后T 淋巴细胞亚群比较（）

注：对照组予以恩替卡韦分散片联合双环醇片；研究组在对照组基础上加用活血软坚方；CHB 为慢性乙型肝炎；CD3+与同组治疗前比较，aP＜0.01；与对照组治疗后比较，bP＜0.05，bbP＜0.01

3.7 两组CHB 伴肝纤维化患者药物不良反应发生率比较 两组患者在治疗期间均未发生药物相关不良反应。

4 讨论

HBV 通过介导肝细胞及体液免疫，引起肝脏发生局部炎性反应，继而出现肝纤维化，肝纤维化是人体对肝损伤的修复反应，也是进展为肝硬化前的重要阶段[8]。对于肝纤维化患者的治疗不应仅局限于抗肝炎病毒和控制病情层面，应注重患者肝脏、机体免疫功能的改善[9]。

自拟活血软坚方中鳖甲软坚散结滋阴；灵芝粉解毒扶正；淫羊藿温而不燥，既能补气益肾元，又可填补阴水；配以活血之品三七粉、三棱、莪术、丹参活血破血养血、散结消癥，再佐以补气养阴之黄芪、党参益气滋阴柔肝，全方共奏活血化瘀、软坚散结、益气扶正功效。本研究显示，研究组较对照组证候总积分明显下降（P＜0.01），临床总疗效明显提高（P＜0.05），显示本方对CHB 伴肝纤维化患者症状有改善作用。本研究显示，研究组患者肝功能、肝纤维化指标下降更明显，表明能降低肝细胞炎症，修复损伤的肝细胞，减少纤维物质沉积和增生，并且可降解胶原等物质，在一定程度上可逆转肝纤维化。药理研究，制鳖甲、丹参、三七粉、三棱和莪术活血养血化瘀改善肝内微循环，加速血流，抑制纤维物质的沉积，降解胶原的物质，从而阻止纤维化的进程[10-11]。淫羊藿、黄芪、党参、女贞子、墨旱莲则可发挥抗氧化作用，保护肝细胞膜，修复损伤细胞，加速肝星形细胞的凋亡并抑制其增值活化[12]。从免疫反应分析，T 淋巴细胞亚群所占比例是维持机体免疫的重要标志，CD4+能促进B 细胞分化，调节细胞及体液免疫，而CD8+由细胞毒性与抑制性T 淋巴细胞组成[13]。研究发现，CD4+/CD8+值高低是患者HBV 感染后炎症程度及是否慢性化的重要辅助指标[14]。本研究结果显示，与对照组治疗后比较，研究组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显升高，CD8+明显降低。表明该方对患者T淋巴细胞亚群具有良好的调控作用，可诱导CD4+合成分化增多，使肝细胞表面抗原表达增强；CD8+数量减少导致免疫抑制因子减少。

综上所述，自拟活血软坚方联合西医治疗CHB患者肝纤维化较单纯西医治疗能进一步改善患者临床证候，调节肝功能及免疫功能，改善肝纤维化水平，且未发现相关药物不良反应。但由于本研究样本量相对较少，观察时间短，且对免疫功能影响只考虑了T 淋巴细胞亚群，观察指标不够完善，还需进一步加大样本量作后续研究。