无偿献血者血液病原体ELISA与核酸检测结果分析

河南省驻马店市中心血站（463000）孙四力

临床中救治患者的一种重要手段即为输血，无偿献血为救死扶伤和无私奉献的崇高行为，其不仅可以将患者的病痛有效解决，而且可发挥挽救患者生命安全的作用[1]。为此针对无偿献血的血液样本开展积极有效的检测措施，提升血液合格率具有重要意义。酶联免疫吸附试验（ELISA）为临床中无偿献血者血液病原体检测中较为常用的方式之一，且临床常将该项检验措施应用于病毒抗体检测或者病毒抗原检测当中，但是该项检测在处于感染窗口期患者中存在较高的漏诊率[2]。核酸检测可以将ELISA检测当中的漏检情况避免，但是该项检测措施的操作方法较为繁琐，且需要较高的检测成本[3]。本次研究为明确ELISA与核酸检测在无偿献血者血液病原体检测中的应用价值，特抽选部分无偿献血者血液样本进行分析，其详细研究内容整理如下。

1 资料、方法

1.1 资料 本次研究特抽选14752例无偿献血者血液样本作为观察对象，样本接收时间均在2017年1月～2018年12月期间。依据性别，男性例数占8662例，女性例数占6090例；年龄范围：19～50岁，年龄平均值为（35.49±2.08）岁；上述献血者均为自愿献血，经过干式生化分析筛查和乙肝金标试纸筛查合格；本次研究排除对ELISA检测存在反应性的标本以及经检验明确有丙氨酸氨基转移酶ALT不合格情况存在的标本。

1.2 方法

1.2.1 样本处理方法 在无偿献血的过程当中，留取两支血液标本，每支5毫升，分别使用EDTA-K2抗凝管（开展ELISA检测）和核酸专用采血管（开展核酸检测）采集血液，开展核酸检测的血液样本于采集血液以后4小时之内完成离心操作，随后保存于冰箱当中，并且在72小时之内将相关检测工作完成。

1.2.2 ELISA检测方法 以双试剂检测，分别采用法国伯乐和厦门新创公司生产的ELISA试剂开展HBsAg检测，分别采用北京万泰和珠海丽珠公司生产的ELISA试剂开展HCV检测，分别采用法国伯乐和厦门新创公司生产的ELISA试剂开展HIV抗原或抗体检测，使用HAMILTION STAR加样仪和全自动酶联免疫分析仪开展检测工作。

1.2.3 核酸检测方法 使用上海浩源血液核酸检测系统开展检测工作，使用PCR方法对HIV-RNA、HCV-RNA以及HBV-DNA等进行检测。首先对血液样本开展ELISA检测，将双试剂检测均呈现阳性的血液样本剔除，随后对剩余的阴性血液样本以及单试剂阳性样本开展核酸检测工作。

1.3 观察指标 观察并统计ELISA检测的阳性检出情况，分析ELISA检测阴性或者单试剂阳性的核酸检测结果。

1.4 统计学处理 本次研究中的相关观察指标数据经过分析和汇总以后均使用SPSS20.0统计学软件处理，阳性率数据用“%”表示，用卡方检验。组间差异明显且具统计学意义以P＜0.05表示。

2 实验结果

2.1 本次研究中的14752例无偿献血者血液样本当中，ELISA检测阳性例数为207例，其阳性率为1.40%。上述阳性样本当中，抗TP占比＞HBsAg占比＞抗HCV占比＞抗HIV占比，详细结果见附表1。

2.2 ELISA检测为阴性或者单试剂阳性的14545例血液样本当中，核酸检测阳性例数为15，其阳性率为0.10%，其中HBVDNA阳性占比＞HIV-RNA阳性占比＞HCV-RNA阳性占比，详细结果见附表2。

附表1 分析ELISA检测无偿献血者血液病原体阳性情况（n=14752）

附表2 分析核酸检测经ELISA剔除样本的阳性检出情况（n=14545）

3 讨论

输血为目前临床中抢救和治疗患者的重要手段之一，血液质量同输血的安全性之间有密切关联[4]。人体血液具备运输功能、维持机体内环境稳定功能和防御保护功能等，机体当中的各种物质均依据血液运输，因此血液对于人体健康而言具有重要作用[5]。与此同时，血液亦为传播疾病较为常见的途径之一，例如HIV病毒、HCV病毒和HBV病毒均可通过血液途径传播。为此将无偿献血者血液当中病原体测定的力度加强，对于预防感染性疾病以及降低感染性疾病发生率方面具有重要作用[6]。

ELISA检测的阳性率为1.40%，其中抗TP阳性占比最高，抗HIV阳性占比最低。由此结果可发现，在无偿献血者血液病原体检测中应用ELISA检测的效果显著，其可以将阳性标本的检出率提升。因ELISA检测可以对可溶性抗体与抗原于聚苯、乙烯相互结合进行有效的利用，完成相关检查步骤以获得免疫能反应，并且结合颜色开展定量分析和定性分析。该项检测方法对于生物酶活性的催化作用良好，且具有较高的敏感度，具备操作简便、价格低廉等优势，为此在临床中属于检测血液病毒抗原的首选措施[7]。但是经临床实践发现，ELISA检测常难以将窗口期和病毒变异时抗原测出，具有较高的漏诊情况。

本研究中，经过ELISA检测确定为阴性或者为单试剂阳性的标本实施核酸检测以后，阳性率为0.10%，其中HBV-DNA阳性占比最高。核酸检测即为借助扩增血液病原体核酸检测技术，对血液病原体当中是否有病毒核酸进行检测，对其是否有病原体感染情况存在进行判断，该项检测措施实施过程中可以明显缩短病毒的窗口期，例如HBV和HCV的检测窗口期通常为50天和72天，采用核酸检测可以将其窗口期缩短为25天和59天，该项检测措施的实施可以将ELISA检测当中存在的缺陷有效弥补[8]。为此，针对无偿献血者血液病原体开展测定操作时可首选ELISA检测，若有难以确诊的情况存在，可进一步开展核酸检验，以充分发挥上述两种检测措施的各自优势，提升不合格血液标本的检出率，将医源性感染的发生率降低[9]。

综上所述，无偿献血者血液病原体ELISA检测和核酸检测具有互补作用，合理应用可以将输血相关风险降低。