江香薷配伍的中药牙膏添加物的研发与应用*

★ 洪滔 李翊 李龙雪 雷丹 彭聪 丁龙艳 付宜谦 王中和 王庆鹏 陈雪刘志勇*（.江西中医药大学 南昌 330004；.江西省人民医院 风湿免疫科 南昌 330006）

江香薷M.chinensis-jiangxiangru 为唇形科植物香薷的干燥地上部分带根全草或地上部分，是江西道地中药材，味辛，性微温，归肺、胃经［1］。为常用中药，入药有发汗解表、化湿和中、利水消肿的功效，《中国药典》（2005 版）将江香薷收载在内，江西省宜春、分宜县和渝水区等地是有分布或种植，为肠炎宁的成分之一。药理药效的研究表明，江香薷中含有很多活性成分，具有解热和抗炎等药理作用，江香薷中含有芳香物质，该芳香物质不仅对口内细菌、厌氧菌、病毒及产酸酶有直接的杀灭作用，而且能抑制细菌、病毒、厌氧菌和产酸酶的活性［2］。国内中草药牙膏由于副作用小，发展时间长，很多中药被研发成为添加剂加入牙膏［3-7］，我们探索将江香薷做为主要成分，配伍其他中药材后，形成一款新型的中草药牙膏的添加物。

1 材料与方法

1.1 药品和实验动物 江香薷，黄芪，金银花，杭菊由江西汇中饮片公司提供，100 %的乙醇、椰油醇（SDS）、CaCO3、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、甘油生产厂家为国药集团有限公司，纯度为分析纯。雌性和雄性SD 大鼠各60 只，体重（200±20）g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，生产合格证号SCXK（湘）2016-0002，实验场地为江西中医药大学动物实验部SPF 级环境，使用许可证为SYXK（赣）2017-0004。

1.2 主要设备 DHG -型鼓风干燥箱（型号9055A，上海昕仪）；分析天平（ME204E）；磁力热搅拌器（DF101S）；智能恒温电热套（ZNHW-II）；高精度智能酸度计（S -320）。

1.3 配伍思路 选用药食两用中药材的江香薷、杭菊花、金银花，与黄芪一起配伍，作为调整口腔菌群、防治口腔异味和牙周炎牙槽骨过度吸收的中药组合物，其中江香薷利水消肿、和中化湿、消炎，为君药；黄芪利水消肿、除毒生肌，是辅助君药江香薷加强治疗主病和主证的药物，并针对兼病或兼证起治疗作用的药物，它可以改善因为炎症导致的牙槽骨的过度吸收的问题，为臣药；杭菊清热解毒抗菌，是协助君药江香薷、臣药黄芪加强治疗作用和直接治疗次要兼证的作用；金银花宣散风热、清解血毒、芳香透达又可祛邪，是本方中引经药，可引方中诸药直达病所的药物并调和诸药的作用，使其合力祛邪。诸味原料通过配伍，共同发挥预防和调整口腔菌群的作用，从而改善口腔状况，并预防牙周病牙槽骨的过度吸收。

1.4 江香薷组合物的制备 江香薷250 g、黄芪200 g、杭菊150 g、金银花75 g，首先将各中药原料（干品）进行粉碎；其次将粉碎后的各中药原料混合均匀并加水浸泡1 h；对浸泡后的中药原料加水煎煮3 次，三次煎煮时间分别为1 h、0.5 h、0.5 h，过滤得煎煮滤液；然后合并煎煮滤液，并在真空小于-0.08 MPa 条件下进行减压浓缩，至药液中含生药10 g/mL 时停止浓缩成为中草药牙膏的添加物。对此物按下面方法做实验观察效果。

1.5 相关效果的检测

1.5.1 对9 种标准菌株的影响实验 江香薷组合提取物，用氯化钠注射液稀释成所需要的浓度，采用试管对倍稀释法，考察不同浓度组合物的提取物对 9 种标准菌株（金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、具核梭杆菌、变形链球菌、黏性放线菌、中间型普氏菌）的抑菌情况，并测出其最低抑菌浓度。同时选用甲硝唑注射液和市面上某口腔炎喷雾剂做对照。

1.5.2 对口腔溃疡的影响 将40 只大鼠随机分为4 组：模型对照组、白云山汤阴东泰药业有限责任公司冰硼含片组（阳性对照组）、本组合大剂量组、本组合小剂量组，每组个数为10 只。大鼠用戊巴比妥钠麻醉，仰卧四肢固定于鼠板。以小棉球置于直径为4 mm 的玻璃管的一端，其棉球端浸透在质量分数为900 g/L 的苯酚溶液中后取出，将其置于大鼠一侧颊黏膜上约一分钟。玻璃管移去时可见该区域有直径4 mm 左右的白色损害；次日可见大鼠口唇潮湿，流口水，颊黏膜处呈红肿表现判为口腔溃疡造模成功。本组合大剂量组：给本组合用相当于临床人日用量的15 倍为限，即用1 250 μL/100g平均分5 次滴入造模的溃疡处，2 h 的间隔频率用药。本组合小剂量组：给本组合415 μL/100g 体质量（相当于人日用量的5 倍），平均分2 次滴入患处，间隔4 h。冰硼含片组：冰硼含片粉末的使用量为1.5 mg/g，平均分5 次投于患处，间隔2 h，模型对照组大鼠不给药。对于上述的大剂量组、小剂量组、冰硼含片组，每次用药后严格禁食、禁水30 min，不间断给药6 d。每日给药前仔细观察口腔患处愈合状况，连续记录6 d 口腔溃疡面直径的变化（以mm 表示）及口腔溃疡愈合的时间以及数量变化。愈合的判定标准：溃疡直径<1 mm 判为愈合，溃疡直径≥1 mm 判为未愈合。

1.5.3 对牙周炎大鼠牙槽骨的影响 选用48 只无龋坏及牙周病的牙体牙列完整的5 周龄SD 大鼠，雌雄兼用，体重（200±20）g。随机分成模型对照组和正常对照组，复方氯己定含漱液（阳性治疗组，江苏晨牌邦德药业有限公司，国药准字H20058018），中药组合物A 组（按剂量分成低中高组）：组合物A 低剂量组0.5 mg/kg，组合物A 中剂量组1.5 mg/kg，组合物A 高剂量组4.5 mg/kg，每组8 只大鼠。以罗礼君文献方法加以改进：使用大镊子为开口器，眼科用弯剪实施对两侧牙齿周围牙龈进行划割剥离术，以10%的白砂糖水代替饮水、白砂糖水浸泡的软饲料代替常规饲料，直至造模结束后改用正常饮食，并给予治疗，并给予治疗，每只动物按0.1 ml/100g 每天两次口腔内滴注各受试药物，用药后禁食4h 后再喂食和水。试验结束取动物牙槽骨做病理切片观察牙槽骨状况。

1.5.4 对口腔粘膜的刺激性 20 只大鼠随机分为本中药组合组和正常对照组2 组，每组10 只。江香薷中药组合2 500 μL/100g （人用量的30 倍），分5 次滴入大鼠两侧颊黏膜处，4 h 内完成。正常对照组大鼠不给任何药物。24 h 后，观察记录给药部位充血情况和水肿情况，并依据水肿和充血情况进行评分，同时需要观察动物有无全身不良反应，持续7d 给药和观察，停药后继续观察7 d。

1.5.5 牙膏的小试生产 委托牙膏企业对江香薷配伍制剂生产牙膏小样。按照配方比例，顺序将SDS、CaCO3、CMC-Na 等原料称好，研磨，然后将糖精钠、甘油、等原料溶于定量的去离子水中，搅拌50 min 后可基本无颗粒存在，即可加入江香薷提取物组合，不另外加香精，继续搅拌30 min 完成制膏的过程，经真空去泡成型后装管。

2 结果

2.1 江香薷配伍制剂的抗菌效果比较 江香薷组合活性提取物对需氧和厌氧菌都有较显著的抑菌作用。其中对大肠埃希氏菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯氏菌的抑菌效果要明显好于口腔炎喷雾剂；对变形链球菌、中间型普氏菌的抑菌效果要明显好于甲硝唑注射液；而对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果与口腔炎喷雾剂基本一致；只有对具核梭杆菌和黏性放线菌的抑菌效果稍差于甲硝唑注射液，结果见表1。

表1 对需氧菌的抑菌效果比较

2.2 江香薷配伍制剂有助于溃疡的愈合 与模型对照组对比，连续给药6 d，本组合大、小剂量组大鼠口腔溃疡面直径减小，口腔溃疡愈合大鼠数量增加，差别均有统计学意义（P<0.01 或P<0.05），结果如表2 所示。

表2 各组大鼠口腔溃疡面直径对比（，n=10）

表2 各组大鼠口腔溃疡面直径对比（，n=10）

注：与模型组比较，※P＜0.01；与阳性对照组比较，﹟P＜0.05。

2.3 江香薷配伍制剂有利于预防牙周炎牙槽骨的过度吸收 江香薷组合物明显抑制了实验性大鼠牙周炎的牙槽骨的吸收，见图1。

图1 各组药物对实验性大鼠牙周炎的影响

2.4 江香薷组合制剂对大鼠口腔黏膜的刺激性实验 粘膜充血、水肿评分标准见表3～4 所示，结果见表5。

表3 粘膜刺激性反应及评分标准

表4 粘膜刺激强度赋分后的评价标准

表5 各组多次给药后口腔黏膜刺激反应平均分值（n =10）

从表5 实验结果可知：江香薷中药组合物对大鼠口腔黏膜无刺激性，是一个安全的中药组合。

2.5 江香薷配伍制剂牙膏的生产应用 制备的江香薷牙膏pH 大致呈中性，经过100 次摩擦过后的载玻片无划痕，表明试样牙膏无过硬颗粒，该牙膏符合牙膏行业的标准要求。50 ℃的烘箱中稳定性实验前后对比基本无变化，常温条件下储存 1 月的牙膏样品比较也无差异，说明江香薷牙膏样品具备较强的稳定性。

3 讨论

口腔是细菌、病毒、真菌进入人体的主要途径之一，除此以外，还有大量的内源性微生物菌群寄生在口腔、牙齿和粘膜表面，这些菌群中有不少是有害菌，影响口腔的健康。另外一方面口腔菌群的失衡也是导致口腔问题的出现。牙膏是维护口腔健康的日化产品，中药牙膏自1988 年问世以来，得到迅速推广发展。中草药牙膏占据了中国55%左右的市场份额，其市场规模也已超过122.1 亿元。

中药药源丰富，相对安全，副作用少。用现代科学技术对中草药进行提取，精制其有效成分加入到牙膏中可抑制有害细菌从而保护口腔健康，江香薷在稀释倍数为1∶128 倍时对白色念珠菌有较好的抑制作用，在1∶32 倍时对变形链球菌有很好的的杀灭作用，且都优于对照组，而这与杨清岭比较了含有田七总皂甘的田七特效牙膏、洋甘菊提取物的益达牙膏甘菊怡神、含丁香油康齿灵高级中草药牙膏的主要抑制变形链球菌和白色念珠菌的作用类似［5］，本研究以江香薷为主要成分进行中药配伍组合形成的牙膏添加物，实验显示有很好的抑制有害细菌作用。

牙龈炎严重影响牙周和牙槽骨的健康，严重的会导致牙槽骨的丢失，使牙失稳，是早期掉牙的重要原因，更重要的是持续的炎症所分泌的炎症因子随着血流影响全身，控制牙周炎包括牙龈炎是中草药牙膏的目标之一［8-9］。本研究把江香薷和金银花，黄芪和菊花配伍后形成的添加物，发现其对于牙周炎下抗牙槽骨的吸收有很好的作用，但其作用机制有待进一步研究。

目前两面针中药牙膏、芳草中药牙膏、黄岑、草珊瑚、三七、马鞭草等各种用途的中药牙膏各有特点，其中多以中药的抗炎、止血、抗过敏等作用为主，而市场调查发现多功能的药物牙膏或具有美白作用的美容药物牙膏要比单一功能牙膏更能迎合消费者的需求。江香薷是江西道地中药材，具有很好的安全性，又是药食同源中药材，同时具有显著的抗菌消炎作用，以其添加到牙膏中，不管是水提液或精油都是一个很有前景的牙膏添加物，利用中药配伍的理论形成的中药配合物形成的中草药牙膏具有更多的功能。