Ki67在三阴性乳腺癌中的表达及其与临床预后相关性的分析

陈莉杰

(湖州妇幼保健院乳腺科，浙江 湖州 313000)

乳腺癌是全球范围内严重威胁女性身心的一种恶性肿瘤，临床调查显示其发病率呈不断上升趋势[1]。随着人们健康意识的不断提高，乳腺钼靶X线、MRI、乳腺超声、乳房自检等乳腺癌诊断策略使得越来越多女性接受，从而为早发现和早治疗提供了更多可能。三阴性乳腺癌是一种特殊类型的乳腺癌，占乳腺癌总数的15%～20%，其表现为人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor，HER2)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)和雌激素受体(estrogen receptor，ER)均表达为阴性[2]。三阴性乳腺癌具有侵袭性强、恶性程度高、容易出现远处转移及预后不佳等特点，故而早发现、早治疗尤为重要。Ki67是细胞周期活性相关蛋白，与细胞生长分数具有良好相关性，并且在多种恶性肿瘤中均有表达[3]。本文探讨Ki67在三阴性乳腺癌中的表达及其与临床预后相关性分析，旨在为临床诊断和治疗三阴性乳腺癌提供参考。

1资料与方法

1.1 一般资料

收集湖州妇幼保健院于2015年5月至2017年5月收治的三阴性乳腺癌患者113例。纳入标准：①经穿刺活检或乳腺癌根治术，且经病理证实为三阴性乳腺癌；②术前均未行放化疗和内分泌治疗；③均为女性。排除标准：①其他类型乳腺癌或恶性肿瘤者；②手术禁忌者；③精神疾病者。113例患者年龄32～78岁，平均年龄(58.93±7.25)岁；临床分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期54例，Ⅲ期41例；平均肿瘤大小(3.25±0.87)cm。

1.2方法

1.2.1 免疫组化法测定Ki67表达

取所有患者乳腺癌组织标本，经10%甲醛溶液固定24h、脱水、石蜡包埋，以免疫组化法测定Ki67表达。其中以PBS溶液代替一抗作为阴性对照，以已知阳性的乳腺癌组织标本作为阳性对照组。

1.2.2 结果判定

Ki67表达于细胞核，染色后以细胞核内棕色颗粒为阳性，取5个高倍视野，每个视野计数100个，根据Ki67阳性细胞数占细胞总数的比例判定其表达情况：①(-)：所占比例<15%；②(+)：所占比例≥15%且<30%；③(++)：所占比例≥30%且<45%；④(+++)：所占比例≥45%且<60%；⑤(++++)：所占比例≥60%。

1.3 随访

所有患者均随访至2020年5月31日，采用门诊定期随访复查方式，以随访末或死亡为随访终点，观察3年无病生存期(disease free survival，DFS)和总生存期(overall survival，OS)，其中以手术确诊之日至出现远处转移、局部或区域复发的时间为DFS，以手术确诊之日至由于任何原因造成患者死亡的时间为OS。

1.4 统计学方法

运用统计学软件SPSS 22.0软件处理数据，计数资料采用例数和百分比表示，组间比较采用卡方检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1 Ki67在三阴性乳腺癌中表达情况

113例三阴性乳腺癌组织中，其中Ki67阳性表达患者69例，阳性表达率为61.06%；Ki67阴性表达患者44例，阴性表达率为38.94%，见表1。

表1 Ki67在三阴性乳腺癌中表达情况

2.2 Ki67表达与临床病理因素的关系

Ki67阳性表达与年龄、临床分期和肿瘤大小无显著相关性(均P>0.05)，腋窝淋巴结转移患者Ki67阳性表达率显著高于无腋窝淋巴结转移者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 Ki67表达与临床病理因素的关系[n(%)]

2.3 Ki67表达与患者3年DFS关系

三阴性乳腺癌113例患者至末次随访时，3年DFS患者87例，占76.99%；3年OS患者97例，占85.84%。Ki67阴性表达3年DFS患者39例，占88.64%，Ki67阳性表达3年DFS患者48例，占69.57%，Ki67阴性表达者3年DFS率显著高于Ki67阳性表达者，差异有统计学意义(P<0.019)，见表3。

表3 Ki67表达与患者3年DFS关系[n(%)]

2.4 Ki67表达与患者3年OS关系

Ki67阴性表达3年OS患者42例，占95.45%，Ki67阳性表达3年DFS患者55例，占79.71%，Ki67阴性表达者3年OS率显著高于Ki67阳性表达者，差异有统计学意义(P<0.019)，见表4。

表4 Ki67表达与患者3年OS关系

3 讨论

3.1 三阴性乳腺癌治疗的难点

乳腺癌是高度异质性的一种恶性肿瘤，在生物学行为、免疫表型及组织学形态等发面存在较大差异。三阴性乳腺癌以浸润性导管癌为主，呈高组织学分级，肿瘤侵袭性强，很容易出现局部复发及浸润转移，且该类患者预后较差[4]。目前，对三阴性乳腺癌患者无法针对PR受体和ER受体阳性进行内分泌治疗以及HER2阳性的靶向治疗，临床上三阴性乳腺癌治疗方案较少[5]。因此，三阴性乳腺癌患者应用内分泌治疗、放疗和化疗等方法效果并不十分理想，而其中化疗是唯一的全身性治疗，乳腺癌治疗指南中尚无针对三阴性乳腺癌制定标准的治疗方案[6]。

3.2 Ki67与三阴性乳腺癌的关系

临床研究报道显示，三阴性乳腺癌分子生物学特征对制定有效治疗方案以及判断肿瘤预后具有重要意义[7]。Ki67主要是细胞核内分裂增殖相关蛋白，并且是具有增殖活性的细胞核中表达的一种核抗原，组成包含15个外显子和14个内含子，分子结构具有特异性。Ki67抗原在有丝分裂经磷酸化及去磷酸化，在细胞周期的G0期不表达，而在细胞周期的G1、S、G2和M期均有不同程度表达。Ki67在细胞核内随细胞周期改变，定位形式复杂，特异性明显。Ki67在肿瘤细胞增殖活性判断中具有较高的灵敏度，能够准确反映细胞增殖状态，以及与肿瘤发生、发展及增殖转移有关[8]。细胞增殖失控且向周围侵袭转移是恶性肿瘤最基本的生物学特性，Ki67表达越高，则细胞增殖活性也越高。本文研究结果显示，113例三阴性乳腺癌组织中，其中Ki67阳性表达率为61.06%。Ki67阳性表达与患者年龄、临床分期和肿瘤大小无显著相关性(P>0.05)，而腋窝淋巴结转移患者Ki67阳性表达率显著高于无腋窝淋巴结转移者(P<0.05)。研究报道显示Ki67表达在恶性肿瘤中远高于正常组织，且其与恶性肿瘤发展和预后密切相关[9]。多数研究证实Ki67表达程度在乳腺良、恶性肿瘤鉴别中具有重要作用，且可作为判断肿瘤侵袭能力的新型的一种分子蛋白标志物[10]。此外，本研究结果结果还发现Ki67阴性表达者3年DFS率、3年OS率均显著高于Ki67阳性表达者(P<0.019)，提示Ki67表达与患者预后密切相关，Ki67阳性表达越高生存越短。Pan等研究发现，三阴性乳腺癌患者Ki-67高表达与复发风险和预后相关，是DFS或OS的独立变量，这与本研究结果相似[11]。

综上所述，Ki67在三阴性乳腺癌中高表达，且与预后密切相关，Ki67阳性表达率越高生存率越低。