2019年湖南省规模牛场4种疫病血清学调查

2020-10-10唐小明王卫国何世成胡巧云胡时均鲁杏华王昌建

中国动物检疫 2020年10期

唐小明，王卫国，何世成，林源，胡巧云，彭志，胡时均，鲁杏华，王昌建

（1.湖南省动物疫病预防控制中心，湖南长沙 410014；2.平江县动物疫病预防控制中心，湖南平江 414500）

牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea，BVD），牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhinotracheitis，IBR），牛结核病（bovine tuberculosis，bTB），牛副结核病（bovine paratuberculosis）是危害当前养牛业的重要疫病，可对牛场生产和经济效益产生巨大影响。其中，BVD是一种以发烧、腹泻、黏膜病、呼吸道症状、生殖功能障碍、生育能力受损、产奶量下降和免疫功能障碍等为主要症状的病毒性牛传染病，在世界范围内流行；IBR是一种出现呼吸道症状以及结膜炎、生殖道感染、繁殖障碍等症状的牛传染病；bTB是一种以组织器官的结核结节性肉芽肿和坏死病灶干酪样化、钙化为症状的人兽共患慢性消耗性传染病；牛副结核病是一种以慢性卡他性肠炎、顽固性腹泻、渐进性消瘦为主要特征的牛及其他家养和野生反刍动物传染病。本次调查采用血清学方法，对湖南省规模牛场开展血清学检测，旨在了解湖南省规模牛场4种疫病的流行状况，以期为此类疫病防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检样品 2019年10—12月，对全省14个市州74个未免疫以上4种疫病疫苗的规模牛场，每场随机采样至少10份牛全血，共计采集牛全血样品770份。对采集的牛全血样品分离血清，-20 ℃保存，待检。

1.1.2 主要检测试剂牛病毒性腹泻病毒（BVDV）抗体检测试剂盒（批号Q391）、传染性牛鼻气管炎病毒（IBRV）gB抗体检测试剂盒（批号Q651）、牛分枝杆菌抗体检测试剂盒（批号19015）与副结核分枝杆菌抗体检测试剂盒（批号JR298）；均购自美国爱德士（IDEXX）公司。

1.1.3 主要仪器设备酶标仪、离心机、纯水仪、单道移液器、多道移液器等。

1.2 方法

对74个牛场的770份样品均进行BVDV、IBRV-gB血清学抗体检测，对其中41个中、大型规模牛场和3个小规模牛场的450份血清样品进行牛分枝杆菌和副结核分枝杆菌血清抗体检测。BVDV、IBR-gB、牛分枝杆菌、副结核分枝杆菌血清抗体ELISA检测，按试剂盒说明书进行，试验成立的情况下，分别计算阳性样品数量，运用Excel 2013软件对试验数据进行统计。

2 结果与分析

2.1 4种病原抗体检测

4种病原血清抗体检测结果（表1）显示：IBR、BVDV抗体阳率较高，场阳性率分别为74.32%、51.35%，个体阳性率分别为45.45%、23.54%；副结核分枝杆菌（MAP）和牛分枝杆菌（M.bovis）抗体阳性较低，场阳性率分别为22.73%、13.64%，个体阳性率分别为4.67%、3.11%。检测结果说明，湖南省规模牛场中IBRV、BVDV感染较为严重，半数以上牛场存在病原感染。

表1 湖南省规模牛场4种疫病病原抗体检测结果

2.2 不同地区抗体检测

不同地区抗体检测结果（表2）显示：全省14个市州均在牛血清样品中检测出BVD和IBR病原抗体。其中：常德和邵阳的BVDV抗体阳性率较高，场阳性率均为100%，个体阳性率分别为62.86%和50.00%，其他地区BVDV场抗体阳性率在20.00%～80.00%之间，个体阳性率在2.00%～40.00%之间。有11个市州的IBRgB抗体场阳性率在60%以上，其中衡阳、邵阳等7个市州场阳性率为100%，个体阳性率在12.00%～90.00%之间。邵阳、常德、永州和湘西州4个市州的牛场中检测到牛分枝杆菌抗体阳性，场阳性率在33.33%～50.00%之间，个体阳性率在2.50%～8.33%之间。有7个市州检测出MAP阳性抗体，场阳性率在25.00%～50.00%之间，个体阳性率在2.50%～20.00%之间。

表2 不同地区规模牛场BVDV和IBRV抗体检测结果

2.3 混合感染抗体检测

对44个不同规模牛场血清抗体阳性情况进行统计，发现20个场存在2种以上抗体阳性，其中12个场存在两种抗体，4个场存在3种抗体，4个场存在4种抗体（表4）。结果表明，湖南省不同规模牛场中4种疫病病原的多重感染现象比较严重，尤其是BVDV、IBRV的混合感染（25.00%），应引起高度重视。

表3 不同地区规模牛场牛结核和副结核抗体检测结果

2.4 不同养殖规模抗体检测

根据牛存栏量，将调查的74个规模场划分为小规模（15～50头）、中等规模（51～200头）、大规模（大于200头）3个层次，其中小规模场33个、中等规模场29个、大规模场12个。调查结果（表5）显示，大规模牛场4种疫病病原的抗体场阳性率和个体阳性率均最高。而在中等、小规模牛场中，BVDV抗体个体阳性率差别不大（P＞0.05），但小规模场的场阳性率（48.48%）高于中等规模场（37.93%）；IBR-gB抗体场阳率基本一致（P＞0.05），但中等规模牛场的个体阳率（50.69%）远高于小规模牛场（32.42%），差异显著（P＜0.05）；牛分枝杆菌抗体阳性未在小规模牛场中检出；副结核分枝杆菌的小规模牛场场阳性率（33.33%）高于中等规模牛场（17.24%），而个体阳性率相差不大（P＞0.05）。

表4 不同规模牛场4种病原混合感染抗体检测情况

表5 不同规模牛场血清样品4种病原抗体检测结果 %

3 讨论

3.1 总体感染情况

湖南省养牛业规模化程度不高，目前也未见对多种牛病进行全面系统调查的报道。本次调查时间集中、样品来源广泛、调查病种多，因此调查数据是湖南省一次难得的牛病横断面研究资料。本调查中的规模牛场均未进行相应疫病免疫，因此检出的阳性抗体即为感染抗体。本次结果说明，湖南省4种疫病在全省范围内存在不同程度的流行，尤其是BVD和IBR流行更为广泛，更为严重。2010年唐伟[1]对湖南省南部2个市州的放养牛进行检测，发现BVDV抗体阳性率为58.5%；范仲鑫等[2]2011年对湖南省2个规模奶牛场进行BVDV血清抗体检测，发现样品阳性率为92.17%。上述研究说明BVDV早已在湖南省规模牛场中流行，而且流行率较高。本研究发现，BVDV抗体场阳性率为51.35%，说明BVD分布已非常广泛，但样品阳性率低于上述2个调查的结果，这可能与抽样数量和范围有关，而本次调查范围广、样品数量多，代表性更强。

2011年王炜等[3]对全国14个省的牛主要呼吸道病毒进行血清学调查，发现IBRV血清样品阳性率为51.8%，与本研究的45.45%基本一致。2003年刘道新等[4]采用结核菌素皮内试验方法对奶牛结核病进行调查，发现平均阳性率为5.46%。本次调查发现，存栏200头以上的大型规模牛场中，1/4的场存在牛分枝杆菌抗体阳性，1/3的场存在副结核分枝杆菌抗体阳性，说明大型规模牛场中的这两种病流行比较严重。牛结核病和副结核病的传统诊断方法主要是皮内变态试验方法。该方法不仅操作繁琐、试验时间长，而且有很强的主观性，重复性差、误差大。因此，本次调查采用了 IDEXX的ELISA检测方法，其操作简单、快速，并且结果更为客观可靠。

3.2 不同地区感染情况

从本次调查来看，全省14个市州都检出BVDV和IBRV阳性抗体，说明这两种病原在全省分布广泛。其中：常德和邵阳100%的被调查牛场存在BVDV流行，个体流行率也在50.00%以上；衡阳、邵阳等11个市州60%以上被调查牛场存在IBRV流行。BVD和IBR这两种疫病都是免疫抑制性疾病，不仅会直接发病，危害动物健康，而且因机体免疫力下降，可诱发其他疾病，甚至使感染动物死亡，如不采取有效预防控制措施，就会造成严重经济损失。本次调查中发现，14个市州都不同程度地存在这两种疫病的流行，需引起相关部门的高度重视。本次调查发现，牛分枝杆菌和副结核分枝杆菌主要集中在邵阳、常德、永州、湘西等4个市州流行。这可能与这些市州近年来养牛业发展迅速，频繁从省外引种调牛有很大关系。牛结核病和副结核病都是慢性消耗性传染病，其中牛结核病还是一种严重的人兽共患传染病，可以通过乳制品等途径传染给人[3]，且这两种疫病都是世界动物卫生组织（OIE）规定的须通报动物疫病，牛场一旦发病，如不及时净化、控制，就可造成严重经济损失，所以应高度重视，切实加强引种检疫、监测净化和环境消毒。

3.3 多病原感染情况

本次调查发现，在有抗体阳性的规模牛场中，大多数场存在多种病原感染，三重、四重感染也较为普遍，说明规模牛场4种病原的混合感染较为严重。其原因可能在于，IBRV一旦感染牛，就会潜伏于三叉神经或神经节，造成病牛终身带毒和散毒。牛感染BVDV后，可出现急性出血性疾病及持续感染（PI）。研究表明，非致细胞型（NCP）持续感染在急性发病中至关重要。BVDV急性感染妊娠期母牛后，可通过子宫传染给胎儿并将其致死。但NCP型BVDV感染，可使出生胎儿存活，成为终生带毒、排毒的PI牛[8]。由于IBRV和BVDV都可持续感染且传播途径多，所以这两种病原的双重感染率最高。此外，持续感染BVDV和IBRV的牛，由于免疫应答持续性减弱，可能导致牛更容易继发感染其他病原体[9]。只要牛场卫生消毒不到位，如牛分枝杆菌和副结核分枝杆菌等在环境中生存能力较强的细菌，就可通过饲料、饮水或气溶胶等途径进入牛的体内，从而发生多重感染[9]。

3.4 不同养殖规模感染情况

本次调查发现，牛场规模越大，疫病就越复杂且感染率越高。调查的不同规模牛场中，存栏200头以上的大规模牛场4种疫病流行最为严重，而中小规模牛场差异不大。这可能与湖南省养牛业规模化程度低，自繁自养和数量上远不及北方地区有一定关系。近年来湖南省养牛业迅速发展，规模化、集约化程度也越来越高，但本地良种牛有限，不足以满足自身需求，部分牛场多从外省引种或育肥，或使用带毒的精液进行人工授精，由于检疫把关不严引入疫病，从而导致病原感染率较高。而中小型牛场以快速短期育肥为主，多数不自繁自养，牛群周转率高，感染率相对偏低。