交叉反应性糖类抗原决定簇抗IgE在过敏性疾病中的应用分析*

莫燕芳，高如秀，蔡健梅，申学基，陈雄毅

肇庆市第一人民医院检验科，广东 肇庆 526060

交叉反应性碳水化合物决定簇（CCD）是许多植物和昆虫物种细胞表面分子共有的糖基修饰部分，而哺乳动物会识别CCD为外源抗原，可产生针对它们的体液免疫应答［1］。对草和毒液过敏人群中大约20%～37%具有抗CCD的循环IgE，这些抗体通常被认为与临床过敏症状无关，但由于这些共有的糖基抗原表位会造成交叉反应，anti-CCD IgE被认为是导致临床检测sIgE假阳性、与临床不一致的血清变应原试验结果的重要原因［1-2］。故本研究将对肇庆市第一人民医院4 568例患者血清anti-CCD IgE与不同年龄段、性别、临床诊断、过敏性疾病等进行相关性分析，旨在探索血清anti-CCDIgE对临床诊断过敏性疾病的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

搜集2016年8月—2019年3月来肇庆市第一人民医院就诊的患者4 568例，其中女性患者2 094例，男性患者2 474例，年龄范围是1个月～86岁，平均年龄22.96岁，按年龄大小来分组，其中儿童组（0～6岁）1 692例，少年组（7～17岁）737例，青年组（18～40岁）878例，中年组（41～59岁）422例，老年组（60岁以上）110例。按临床诊断分鼻咽炎708例，支气管炎579例，湿疹、荨麻疹1 885例，胃肠炎467例。

1.2 方法

（1）试剂、仪器、过敏原种类。试剂：包被过敏原的检测膜条（欧蒙医学实验诊断股份公司，吸入性及食物性过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒）、酶结合物、通用缓冲液、底物液；仪器：特定的温育盘（ZD 9897-0130）、欧蒙印迹法自动操作仪(EURO BlotMaster)；过敏原种类：霉菌组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）ms1、树组合2（柳树/杨树/榆树）ts20、淡水鱼组合1（鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼）fs34、羊肉f88、海鱼组合1（鳕鱼/龙虾/扇贝）fs33、普通豚草w1、艾蒿w6、尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨）ds1、黄豆f14、屋尘h1、鸡蛋白f1、猫毛e1、狗上皮e2、蟑螂i6、葎草u80、蟹f23、牛奶f2、花生f13、牛肉f27、虾f24、交叉反应性糖类决定簇（CCD）。（2）过敏原检测步骤。由护士采集患者手臂静脉血4 m l于含分离胶的灰盖管，分离血清置于2～8℃可保存14天。严格按照过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒（欧蒙印迹法）说明书进行，由欧蒙印迹法自动操作仪(EUROBlotMaster)进行检测，检测完成后取出膜条进行风干扫描。（3）结果判断。软件判断结果请参见EUROLineScan的操作指南，条带颜色的深浅用EAST类别0～6表示，酶过敏原吸附试验（Enzyme-Allergen-Sorbent Test,EAST）采用的浓度等级等同于过敏原诊断公认的RAST（放射过敏原吸附）系统。anti-CCD IgE阳性分级综合考虑患者的临床症状，见表1。

1.3 统计学方法

建立2016年8月—2019年3月期间就诊患者血清anti-CCD IgE阳性人数的数据库并分类统计，应用SPSS 19.0统计分析软件对数据进一步处理分析。血清an

ti-CCD IgE阳性分布特点主要用频数分布和百分率表示；组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清anti-CCD IgE阳性级别的差异性分析

收集病例4 568例，其中血清anti-CCD IgE阳性有335例，阳性率是7.33%。按表1分级标准：1级249例，占74.33%，2级39例，占11.64%，3级23例，占6.87%，4级15例，占4.48%，5级8例，占2.39%，6级1例，占0.30%。采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，各阳性级别所占的比例之间差异有统计学意义（χ2=980.851，P＜0.05）。

2.2 血清sIgE阳性的项目数目和血清anti-CCD IgE的关系

anti-CCD IgE阳性的患者中，各变应原的血清sIgE阳性的项目数目为0的有33例，血清sIgE阳性的项目数目为1的有37例，血清sIgE阳性的项目数目为2～5的有128例，血清sIgE阳性的项目数目＞5的有137例，见图1。

图1血清s IgE阳性的项目数目和血清anti-CCD IgE的关系

2.3 性别和年龄分组患者血清anti-CCD IgE阳性率比较

女性anti-CCD IgE阳性率是74.64%，男性anti-CCD IgE阳性率是72.35%，两组间比较差异无统计学意义，而不同年龄间anti-CCD IgE阳性率比较差异有统计学意义，中老年组患者阳性率最高为13.03%，见表2。

2.4 sIgE检测的总体情况

anti-CCD IgE阳性中各变应原的阳性率最高的是尘螨组合1 ds1（屋尘螨/粉尘螨）（52.84%）、其次是蟑螂i6(50.45%)、普通豚草w1（41.79%）、蟹f23(41.79%)，见表3。

2.5 血清anti-CCD IgE阳性患者的吸入和食物性过敏原sIgE的阳性分布

anti-CCD IgE阳性患者中，食物性过敏原sIgE阳性99例，阳性率为29.56%，吸入性过敏原sIgE阳性56例，阳性率为16.71%，食物性和吸入性过敏原sIgE均为阳性有

表1 anti-CCD IgE阳性级别分类

表2 性别、年龄分组患者血清anti-CCD IgE阳性率比较

表3 血清anti-CCD IgE阳性患者中各过敏原阳性比较

2.6 主要过敏性疾病中血清anti-CCD IgE阳性率分析

4 568例就诊患者中除去没有明确过敏性疾病类型和其他少数类型共有3 618例，其中最高的是皮炎、荨麻疹湿疹患者，阳性率为9.00%；各主要过敏性疾病中血清anti-CCD IgE阳性率之间比较，差异有统计学意义（χ2=85.484，P＜0.05），见表4。

表4 主要过敏性疾病中血清anti-CCD IgE阳性率情况

3 讨论

本组实验4 568例患者中有335例血清anti-CCD IgE阳性，阳性率是7.33%，表明大多数人的血清anti-CCD IgE为极低抗体滴度，但在变态反应病人群中处于较高流行率。经过上述统计，在anti-CCD IgE阳性患者中，两项及两项以上变应原呈阳性反应的有79.10%，随sIgE阳性项目数增加，anti-CCDIgE阳性率有增高趋势，即多种变应原阳性时，anti-CCDIgE抗体对sIgE检测的干扰的可能性就越大。所以临床上遇到多项sIgE阳性时除了考虑一是患者可能是易过敏体质，本身对多种变应原过敏；二是在过敏性疾病中，某些炎症因子和变应原相关分子表达过于活跃［3］，还要考虑交叉反应的影响。

本研究结果显示，女性患者anti-CCD IgE阳性率稍高于男性患者，但是不同性别阳性率之间没有差异。另外，不同年龄间anti-CCD IgE阳性率间差异有统计学意义，中老年组患者阳性率最高为13.03%，但总体而言，随着年龄的增加，anti-CCD IgE阳性率呈上升的趋势，故对于临床上有过敏性症状的患者，在评估变应原时，特别是中年人群，应该多加考虑anti-CCD IgE的影响。但有些文献表示不同性别anti-CCD IgE阳性率之间有差异［2-4］，认为在临床诊断女性患者过敏原时应该充分考虑anti-CCD IgE对诊断的影响，笔者猜测可能是所采集的资料中男女比例和年龄组有差别，研究的方法不同、地域区别等从而导致统计学结果有差异。

以上分析显示，在anti-CCD IgE阳性中吸入性过敏原最高的为尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨）为52.84%，其次是蟑螂50.45%和普通豚草41.79%；食物性过敏原最高的是蟹41.79%，其次是花生34.63%和黄豆33.13%，但国内有关报道显示anti-CCDIgE表达情况与大部分变应原(混合树木、葎草、艾蒿、户尘、混合尘螨、混合 霉菌、蟑螂、狗毛、猫毛)无关联性，国外亦尚未见anti-CCDIgE表达情况与某种变应原sIgE明显相关的报道，说明anti-CCDIgE可能与临床引起过敏的变应原关系不大［5］。应该与接触变应原的频率有关，根据所调查的不同年龄阶段分布情况，儿童组就诊人数最高，所占比例为37.03%，儿童的免疫力相对较低，接触到粉尘螨容易过敏［6］；我国大部分地区过敏性疾病的主要变应原是屋尘螨/粉尘螨，另外，目前随着人们饮食习惯改变，鸡蛋、蟹等高蛋白含量的食物，也逐渐成为了主要的致敏原［7］。

anti-CCDIgE可能不仅存在于吸入性变应原中，也可能存在于食物性变应原中,anti-CCDIgE抗体亲和力较小、易解离，一般不引起相应的过敏症状［8］。anti-CCDIgE阳性患者中，食物性sIgE阳性率为29.56%，吸入性sIgE阳性率为16.71%，食物性与吸入性均为阳性的阳性率为53.73%。结果显示anti-CCDIgE对食物性sIgE造成的交叉反应影响更大一些。anti-CCD IgE阳性患者中，过敏性疾病以湿疹、荨麻疹占比例最高为9.00%，其次是胃肠炎8.15%和鼻咽炎8.05%。有研究报道，anti-CCDIgE阳性表达率最高的是被蜜蜂叮咬的患者，特别是被蜜蜂和黄蜂一起叮咬的患者［9-10］，本文未能分析anti-CCDIgE与具体类别的过敏性疾病的相关性，有待进一步研究。

综上所述，变态反应机制复杂，反应类型多，过敏性疾病以I型变态反应为主，在临床诊断过敏性疾病主要手段是结合临床症状和血清特异性IgE的检测［11］，但是由于CCD会诱导机体产生低水平的anti-CCD IgE，与多种变应原发生交叉反应，容易导致血清特异性IgE检测结果假阳性，特别是在sIgE阳性与临床症状不相符的时候，对此我们需要充分考虑到anti-CCD IgE的影响。anti-CCD IgE抗体的引入能更准确地为临床诊断过敏性疾病提供依据，实验过程中遇到anti-CCD IgE阳性的结果，必要时可以使用吸附剂预处理，从而等到更准确的结果。