高效液相色谱-串联质谱法同时检测药包9 种抗氧剂含量

2020-09-24胡佩崔萍杜云

塑料包装 2020年4期

胡佩崔萍杜云*

（1.南京大学，化学化工学院；2.南京工业大学江苏省药物研究所有限公司）

由于药物包装材料在生产、贮存和使用的过程中会因受到多方面因素影响而发生老化，导致其强度、伸长率等物理性能的大幅下降，因此在生产过程中通常会加入抗氧剂抑制或延缓其老化。故抗氧剂又被称为“防老剂”，仅少量存在时就可延缓或抑制聚合物老化并延长其使用寿命，广泛应用于橡胶、塑料、化纤等高分子材料中［1-5］。随着近年来对抗氧剂的重视度的提升，对抗氧剂的报道有很多［6-9］，但是针对药用包装材料中抗氧剂含量同时检测的报道很少［10-13］，而且由于包装材料中抗氧剂的添加量本身就微量，用普通的液相色谱法紫外检测器法有的抗氧剂灵敏度跟不上，本文从提高检测灵敏度和检测效率的角度，采用了高效液相色谱-串联质谱法对药品包装材料中的九种抗氧剂（双酚A、抗氧剂264（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚）、抗氧剂2264（2,2"-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)）、抗氧剂1035（2,2’-硫代双[3-(3,5-二叔丁基-4-羟基苯基)丙酸酯]）、抗氧剂129（2，2- 亚乙基- 二（4，6 二叔丁基苯酚））、抗氧剂1010（四［β -（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）丙酸］季戊四醇酯）、抗氧剂330（1,3,5-三甲基-2,4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羟基苄基)苯）、抗氧剂1076（β -（3,5-二叔丁基-4-羟基苯基）丙酸正十八碳醇酯）和抗氧剂168（三[2.4-二叔丁基苯基]亚磷酸酯））进行初步研究，取得了很好的实验结果，为药品包装材料中抗氧剂的研究提供了一定的参考。

1. 实验部分

1.1 仪器与试剂

LCMS-8040 三重四极杆液相色谱质谱联用仪，含SPD-M20A 二极管阵列紫外检测器和LCsolution 工作站（Shimadzu 公司）；超声波清洗器（昆山舒美KQ5200，200W，40KHz）；离心机（英泰TD6C）；超纯水仪（法国Millipore 公司）。

甲醇（色谱纯，Merck 公司）、无水乙醇为分析纯；对照品相关信息。样品：本研究收集了6个企业生产的不同包装材料，样品A（冷冻干燥注射用溴化丁基橡胶塞，湖北产）、样品B（冷冻干燥注射用溴化丁基橡胶塞，江阴产）、样品C（冷冻干燥注射用溴化丁基橡胶塞，山东产）、样品D（聚丙烯PP 输液瓶）、样品E（PVC 输液器软管部分）和样品F（三层共挤输液袋）。

1.2 实验方法

1.2.1 溶液配制

对照品储备溶液分别精密称取对照品双酚A 2.2 mg、抗氧剂264 1.71 mg、抗氧剂2246 1.6 mg、抗氧剂1035 36.6 mg、抗氧剂129 3.17 mg、抗氧剂1010 2.32 mg、抗氧剂330 4.0 mg、抗氧剂1076 5.71 mg 和抗氧剂168 2.76 mg，置于10 mL 量瓶中，甲醇溶解，稀释，定容。作为对照品储备液。

混合对照品溶液分别精密量取各抗氧剂对照品储备液适量，置于同一容量瓶中，混合均匀，即得混和对照品溶液，其中每毫升含双酚A 1.268 μ g、264 49.28 μ g、1035 1060.52 μ g、2246 0.615 μ g、129 32.37 μ g、1010 1.11 μ g、330 1.92 μ g、1076 274.26 μ g 和168 2.65 μ g。

药用溴化丁基胶塞的浸提供试品溶液分别取厂家A、B、C 的胶塞各10 只剪碎（每只约2.3 g），加入无水乙醇30 mL，在40℃下超声浸提4 h，冷却后离心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供试品溶液A、B、C。

PVC 输液器的浸提供试品溶液，取样品D 软管部分剪碎，取8 g，加入无水乙醇30 mL，在40℃下超声浸提4 h ，冷却后离心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供试品溶液D。

PP 输液瓶的浸提供试品溶液，取样品E 剪碎，取6g，加入无水乙醇30 mL，在40℃下超声浸提4 h，冷却后离心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供试品溶液E。

三层共挤输液瓶的浸提供试品溶液，取样品F 剪碎，取4 g，加入无水乙醇30 mL，在40℃下超声浸提4 h，冷却后离心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供试品溶液F。

1.2.2 色谱条件

色谱柱：岛津Shim-pack GIST C18（2.1 mm×100 mm，5 μ m）；流动相A：甲醇-水（90:10）；流动相B：甲醇，梯度程序：0~9 min，100%A；9~10 min，0%A；10~25 min，0%A；25.1 min，100%A；35 min，stop。流速：0.3 mL·min-1；检测波长：200~400 nm（220 nm）；柱温：40 ℃；进样体积：1 μ L。

1.2.3 质谱条件

离子源：电喷雾离子源ESI；负离子MRM分段扫描模式（优化参数见表 1）；DL 温度：250 ℃；接口温度：350 ℃；加热块温度：400 ℃；雾化气流量：3.00 L·min-1；干燥器流量：15 L·min-1；接口电压：-3.5 kV；转换打拿极：6.0 kV；CID 气：230 kPa。

表1 九种抗氧剂的质谱优化条件

图1 混合对照品溶液色谱图（A）、质谱图（B）

2. 结果与讨论

2.1 专属性试验

取混合对照品溶液，按“1.2.2”和“1.2.3”项下条件进样分析。色谱图见图1。

2.2 灵敏度试验

取“2.1”项下对照品溶液适量，以甲醇逐级稀释进样，按“2.2”项下条件分别进样分析，记录色谱图，分别以S/N=3、S/N=10 测得各抗氧剂的最低检测限和定量限。分别精密量取“2.1”项下九种抗氧剂对照品储备液适量，用流动相B 稀释制得系列混合溶液，按“2.2”项下条件分别进样，记录色谱图，以浓度C 为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归，结果见表2。