血管平滑肌细胞在颈动脉粥样硬化斑块形成患者中的变化

王海威 孙温伟 郭 凯

（1、潍坊市中医院，山东 潍坊261041；2、潍坊市人民医院，山东 潍坊261041）

近年来，心脑血管疾病已成为全世界内严重危害人类身心健康的重大疾病，动脉粥样硬化（AS）病变为其主要原因。AS 发生机制较复杂，多数学者认为巨噬细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞（VSMC）等多种细胞参与了AS 病变的形成[1]。既往对AS 的研究多集中在血管内膜和外膜上，近年来越来越多学者强调VSMC 在AS 发生发展中的重要作用。有研究表明，VSMC 的起源、表型转化、凋亡、钙化等均与AS 发生发展密切相关[2]。本研究探讨了VSMC 在颈动脉粥样硬化斑块形成患者中的变化，为临床如何稳定AS 斑块提供科学依据。现报道如下，

1 资料和方法

1.1 一般资料

将2018 年1 月至2019 年12 月收治的70 例颈动脉狭窄患者作为研究对象，均择期行颈动脉内膜剥脱术（CEA）。根据患者术前有无短暂性脑缺血发作（TIA）或同侧黑朦等一过性缺血症状分为有症状组，31 例，男20 例，女11 例，年龄50-76 岁，平均（64.13±7.49）岁；无症状组，39 例，男28 例，女11例，年龄50-80 岁，平均（64.43±7.54）岁。两组一般资料比较无统计学意义（P＞0.05），具有均衡性。本研究经我院医学伦理会委员批准，获患者本人及家属知情同意。

1.2 颈动脉内膜剥脱术

术前均行数字减影血管造影（DSA）检查，明确血管狭窄等情况，均由同一组外科医师完成。均接受气管插管静脉复合麻醉，仰卧位，颈肩部垫高，头伸展并转向对侧，以胸锁乳突肌前缘作切口，1%利多卡因局部封闭颈动脉窦，预防颈动脉窦反射，暴露颈总、颈外和颈内动脉，放置血管阻断带，注意保护颅神经。在全身肝素化后，分别阻断颈内动脉、颈外动脉和颈总动脉。将颈总动脉和颈内动脉纵向切开，放置颈动脉轮流管，剥脱、切除内膜斑块，应用7-0prolene 血管缝线固定漂浮的内膜片。冲洗内腔后，以人工血管补片修复颈动脉切口，在打结前将颈动脉排气后阻断，打结后依次开放颈外动脉、颈总动脉、颈内动脉。充分止血后，留置直径4mm 引流管，逐层缝合切口。

1.3 标本处理及检测

4%甲醛固定48h，10%乙二胺四乙酸脱钙处理72h，常规脱水，石蜡包埋，切片，Movat 染色[3]。以平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化染色，鉴定血管平滑肌细胞（VSMC）。在100×镜下，随机选取3 个视野，应用Image J 软件检测每个视野中SMC 积分吸光度值（IA），取平均即为平均积分吸光度值（MA）；同时检测上述3 个视野中切片面积（mm2），取平均面积，再计算SMC 在单位面积中MA（MA/mm2）。

1.4 统计方法

数据统一整理，采用SPSS17.0 统计软件进行分析，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料以n（%）表示，采用卡方检验，检验标准α=0.05。

2 结 果

2.1 症状与斑块稳定性分析

表1 可见，有症状组斑块不稳定率为77.42%，无症状组斑块不稳定率为7.69%，比较有统计学意义（χ2=27.140，P＜0.01）。

2.2 各组VSMC 的MA 分析

表2 可见，有症状组VSMC 的MA 显著高于无症状组，比较有统计学意义（t=8.126，P＜0.01）；斑块不稳定组VSMC 的MA 显著高于斑块稳定组，比较有统计学意义（t=6.209，P＜0.01）。

2.3 各组VSMC 单位面积MA

表3 可见，有症状组基底部、肩部、纤维帽的VSMC 单位面积MA 均显著高于无症状组，比较有统计学意义（t=11.988、5.241、6.053，P＜0.01）。

表1 两组斑块稳定性比较[n(%)]

表2 各组SMC 的MA 比较（±s）

表2 各组SMC 的MA 比较（±s）

组别有症状组无症状组斑块稳定组斑块不稳定组例数（n）31 39 40 30 MA 1312±142 1637±183 1572±169 1304±191 t 值 P 值8.126＜0.01 6.209＜0.01

表3 各组SMC 单位面积MA 比较（±s）

表3 各组SMC 单位面积MA 比较（±s）

组别例数（n）VSMC 单位面积MA（MA/mm2）有症状组无症状组t 值P 值31 39基底部1149±126 1632±194 11.988＜0.01肩部1455±157 1688±204 5.241＜0.01纤维帽1355±166 1608±183 6.053＜0.01

3 讨 论

VSMC 是构成血管壁组织和维持血管张力的重要细胞之一，其增值与迁移在AS 形成发展中起着关键作用，它是“纤维帽”的重要组成成分，是决定斑块“纤维帽”稳定性的主要因素[4]。在生理或病理条件下，VSMC 均会表型转化，表型转化后的VSMC 具有巨噬细胞标志物和特性。Shankman 等[5]人发现，VSMC 表型转化在AS 形成中具有重要作用，且抑制VSMC 表型转化对动脉具有保护作用。最新研究表明[6]，VSMC 通过表型转换调节自身的增值、迁移和凋亡，从而参与AS 发生发展。

AS 是一种慢性炎症疾病，随着病情发展，各种炎症因子激活血管壁内的VSMC，致使迅速增值[7]，增值后VSMC 表型转化，且在各种细胞因子刺激下，使VSMC 从血管中膜迁移至内膜，从而使血管壁增厚和斑块形成。本研究结果显示，有症状组VSMC 显著低于无症状组（P＜0.01），斑块不稳定组VSMC 显著低于斑块稳定组（P＜0.01），由此推测，VSMC 在稳定斑块高表达与斑块稳定性密切相关，其数量多少与一过性缺血性症状发生也有密切联系，与崔艺耀等[8]人报道一致。另外，有症状者斑块的基底部、肩部及纤维帽处VSMC 均显著低于无症状者，提示VSMC 分布不均与临床事件发生亦有关。然而，VSMC 增值似乎并不是斑块形成的主要驱动因素，且其迁移意义也不是十分明确，但VSMC凋亡和老化确实有助于动脉粥样硬化斑块形成，且易引起斑块破裂[9]。

综上，VSMC 在颈动脉粥样硬化斑块形成中扮演十分重要的角色，深入研究VSMC 在AS 发生发展中具体机制，为未来寻找AS 新治疗新靶点。