浓缩生长因子结合自体脂肪移植在面部年轻化治疗中的疗效

王献路 耿雅琼 田 伟 陈晓辉 曹东升

面部组织萎缩导致皱纹加深，皮肤松弛下垂，是较为常见的面部老化问题。主要的临床表现为双侧面部不对称，以及鼻唇沟变深、颧骨高突导致面部及颞部凹陷等[1]。临床上曾使用的改善面部凹陷的诸多填充材料均可导致患者发生感染的风险，甚至出现排异反应等。与其他材料相比，自体脂肪移植术(autologous fat transplantation，AFT)材料来源可靠、使用方便安全、价格亲民、术后外观形态自然[2]。但脂肪移植术术后脂肪存活问题目前仍是难题[3]。浓缩生长因子(concentrate growth factors，CGF)是一种富含生长因子的自制制剂，由患者外周血浆经自动连续变速离心机制备而成。它对各种软组织的生长与修复具有较好的促进作用[4]，作为第三代自体血浆提取物，目前已在临床应用[5-6]。本研究旨在探讨在面部年轻化治疗中CGF联合AFT的疗效，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年1月至2019年1月就诊于太和县人民医院整形美容科，接受面部年轻化诊治的60例为研究对象，均为女性，按照诊治先后进行排序，采用随机数字表法分为观察组与对照组，每组各30例。脂肪抽吸部位选择大腿根部内侧或下腹部。两组研究对象年龄、体质量指数(body mass index，BMI)差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组研究对象一般资料对比

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：①研究对象正在进行的治疗对本试验无任何影响；②研究对象均自愿签署临床试验授权书，并能积极配合；③在研究开始前至少6个月停止抗衰老治疗；④未在研究期间使用其他治疗。⑤本研究经院伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。排除标准：①伴有急性、慢性感染或心理障碍，伴有自身免疫疾病等；②依从性差；③月经期。

1.3 手术方法

1.3.1 术前准备 ①常规化验，询问研究对象有无面部外伤及治疗史；②术前沟通时询问研究对象需求，拍摄术前照片； ③预测面部治疗区域所需填充量；④根据受试者自身情况选择下腹部或大腿内侧作为脂肪供区。术前标记吸脂区及需治疗部位。

1.3.2 对照组采用AFT手术治疗 ①脂肪颗粒制备。根据研究对象情况选择下腹部或大腿根部内侧脂肪丰富处为供区并用美兰标记。常规消毒，做局部肿胀麻醉，向皮下注射肿胀液。注射器保持2 mL负压，使用10 mL注射器连接钝头吸脂针，反复扇形抽吸取出。使用离心法将吸取的脂肪组织进一步纯化，整个制作过程中严格遵循无菌操作原则[7-8]。②自体脂肪移植：使用浓度为 0.5%的利多卡因于已用亚甲基蓝标记好的部位进行局部浸润麻醉，依据部位和术前预测量的差异选择不同规格的移植注射器，采用“3M”法注射(即多通道、多点和多平面注射)，使植入的脂肪组织充分接触受区软组织。术后进行受区局部软组织按摩，使植入脂肪组织分布均匀。术后常规对治疗部位进行冰敷[9-10]。③术后处理：供区给予加压包扎，填充区仅使用敷料覆盖，并减少活动，防止新生血管受损。针孔处涂抹抗生素软膏，并口服抗生素预防感染。

1.3.3 观察组 使用CGF+AFT注射治疗，自体脂肪制备同对照组，将自体脂肪颗粒与CGF以 1∶3 的比例混合备用。注射前使用利多卡因进行局麻，具体注射方法同对照组。

制备CGF：采用未加抗凝剂的无菌Vacuette采血管，提取研究对象9 mL外周静脉血。将抽取的静脉血置入全自动连续变速离心机，并设定制备程序。整个制备过程连续变速分为4步：①30 s内加速离心机至2 700 r/min，并维持2 min；②调速至2 400 r/min，并维持4 min；③提速至2 700 r/min，并维持4 min；④调速至3 000 r/min，并维持3 min，随后在36 s内终止。离心后的采血管由上到下分三层，分别为贫血小板血浆(platelet poor plasma，PPP)层，富含CGF的纤维蛋白凝胶层，红细胞层[11]。

1.4 观察指标 ①对两组研究对象面部进行术前、术后照相存档。②每位研究对象分别于治疗前，治疗后即刻，随访1周、1个月、6个月及1年时测量注射区域脂肪厚度，采用超声浅表脂肪测量法测量，多点测量注射区脂肪厚度，并计算平均值。测量每次随访脂肪的存活率(存活率=脂肪存活体积/术后即刻脂肪体积×100%)。③末次复诊时，研究对象对自身面部情况按照非常满意、基本满意、不满意3个等级进行评估。满意度计算公式：满意度=(非常满意+基本满意)/总人数×100%。④对研究对象不同部位的皱纹改善情况进行测评，使用面部皱纹量表(facial wrinkle scale，FWS)[12]评估研究对象治疗部位1年后的情况，各个部位根据皱纹程度分为0～4分。末次随访时研究对象对皱纹填充部位进行治疗前后评分，术前评分大于术后评分为改善，前后差值越大，表明改善越明显，改善率=改善人数/总人数×100%。⑤末次随访时，记录研究对象术后并发症发生率及二次手术填充率等情况。

2 结果

2.1 两组研究对象术后脂肪存活率对比 观察组研究对象术后随访时，脂肪存活率整体高于对照组，组间效应比较差异有统计学意义(P<0.05)；组内时间效应比较差异有统计学意义(P<0.05)，即两组研究对象的术后脂肪存活率有随时间变化的趋势；时间与分组交互效应差异有统计学意义(P<0.05)，即脂肪存活率随时间变化的趋势因治疗方式而不同。见表 2。

表2 两组研究对象术后脂肪存活率对比

2.2 两组研究对象二次手术率比较 部分研究对象在术后6个月至1年内要求行二次手术填充，观察组2例(7%)行二次填充，对照组9例(30%)行二次填充，差异有统计学意义(χ2=4.007,P=0.045)。

2.3 两组研究对象满意度比较 对照组部分对象在术后 6个月至1年内移植脂肪出现明显吸收，观察组大多研究对象在术后 6个月至1年内脂肪维持情况优于对照组，两组对象脂肪存活情况在术后1年均趋于稳定。末次随访，观察组满意度(93.3%)高于对照组(56.7%)，差异有统计学意义(χ2=7.547，P=0.006)。见表3。

表3 两组研究对象满意度比较(例)

2.4 两组研究对象皱纹改善情况比较 对照组共需治疗116个部位，观察组共需治疗118个部位。观察组术后皱纹改善情况(90.7%)优于对照组(74.1%)，差异有统计学意义(χ2=11.074，P=0.001)。见表4。

表4 两组研究对象术后皱纹改善情况(例)

2.5 两组研究对象并发症发生情况比较 所有受试者术中过程顺利。观察组有2例术后出现面部轻度肿胀，术后1周恢复。对照组有10例肿胀略明显，约 4 周恢复；6例出现皮下出血反应，未作特殊处理，术后约2周自行恢复。其余研究对象未出现感染、坏死、血肿、脂肪液化等其他不良反应。两组并发症发生情况比较，差异有统计学意义(χ2=13.413，P<0.001)。

3 讨论

面部凹陷和皱纹的形成是面部衰老常见的特征，随着人们对自身形象逐渐重视，如何修复面部凹陷及改善皱纹成为当前临床的研究热点[13]。目前，临床应用较为广泛的注射填充方法为AFT。因AFT具有操作方便、填充后外形自然、无排异反应等优点[14]，受到众多临床医师和患者的青睐。但脂肪移植后的存活率较低，会导致术后疗效维持时间短，患者在植入脂肪减少后需二次手术，因此，AFT的应用效果常无法令人满意[3]。CGF由患者外周血浆经自动连续变速离心机制得，含有丰富的生长因子。是继富含血小板纤维蛋白之后的第三代血浆制品，近年来已逐渐成为临床研究热点。本研究将AFT与CGF相结合用于改善面部老化，取得了显著的效果。

Bosset等[15]指出，皱纹及面部凹陷的主要原因很大程度上与皮下脂肪的萎缩相关。这也正是利用AFT技术改善面部老化的基本原理。本项研究结果表明，观察组经治疗后，研究对象的皱纹改善率高于对照组，提示CGF联合AFT在皱纹改善方面有着比单纯使用AFT治疗更好的临床效果。并且观察组治疗后经多次随访可发现，其整体脂肪存活率明显高于对照组，二次手术率也明显低于对照组，以及皱纹改善能维持更长时间。因为CGF能在受区为移植脂肪的良好生长提供适宜的环境，并促进其长时间存活。脂肪移植至填充部位时，受区尚未形成血供，此时处于缺血状态下的脂肪细胞通过周围组织营养物质和氧气的等离子扩散生存，且仅能存活24 h。在随后的3 d内，未血管化的一部分脂肪移植物将坏死并形成油性囊肿，导致移植脂肪减少[16]。所以脂肪存活率取决于向内生长的新生血管在受体区和移植脂肪之间重新建立血供所需要的时间和新生血管质量。Scherer等[17]认为，脂肪移植后，血液中钙或凝血酶激活CGF，立即引起多种生长因子的分泌，可有效促进血管生成。故CGF既可以在早期保证脂肪的存活量，又能在移植后期维持存活脂肪的稳定，提高存活率，使面部的年轻化效果维持更长时间。

本研究结果表明，观察组有更低的术后并发症发生率，仅发生术后轻度肿胀，并在短期内缓解。其余研究对象未发生不良反应，如感染、出血、坏死等。这可能与CGF本身具备较强的抗炎及抗感染能力有关。CGF中包含的大量抗炎细胞，具有吞噬病原微生物、坏死细胞等功能[18]。同时CGF包含的多种生长因子和CD34 细胞可以激活血管内皮细胞，促进血管重建，进而减少炎性细胞的渗出，控制炎症的发展。最终由于血供的恢复减轻了皮肤及其附属器的周围炎症[19]。此外，由于CGF还可以作用于细胞黏附分子上的蛋白，如纤维蛋白、纤连蛋白等，对于细胞的迁移、粘附、增殖、变异、细胞外聚集起到关键作用。局部注射的生长因子和细胞因子依靠自体细胞和组织的生物再生功能，体现出很强的修复能力[20]。因而CGF可以早期修复有创注射时带来的损伤，减少皮下出血等不良情况的发生[21]。

综上所述，CGF联合AFT用于面部年轻化，能够有效改善面部皱纹，提高脂肪存活率，且不良反应少，二次手术率低，安全性高，注射后效果较传统脂肪移植可维持更长时间，术后满意度高，有着广阔的临床应用前景。