不同采收年份的枸杞叶的营养成分及分析

王婕 张波 周发 王梦泽 范俊峰

摘 要：研究一年生、两年生、三年生和四年生5月份的枸杞叶（LL）中的营养成分及生物活性成分，结果表明：LL中含有丰富的蛋白质、矿物质、B族维生素和牛磺酸。其中，一年生的LL中碳水化合物（38.30 mg/100 g）、脂质（0.25 g/100 g）、钠（483.25 mg/100 g）、钾（317.16 mg/100 g）、氨基酸（7.98 g/100 g）含量最高;四年生的LL中蛋白质（34.42 g/100 g）、灰分（25.18 g/100 g）、钙（385.82 mg/100 g）、甜菜碱（981.50 mg/100 g）、牛磺酸（481.02 mg/100 g）含量最高。本研究为LL的进一步开发利用提供了科学依据。

关键词：枸杞叶;营养成分;蛋白质;矿物质

新鲜枸杞叶（LL）可作为蔬菜食用，在中国古代也可以作为草药茶使用[1]。研究表明，LL的化学成分与枸杞子类似，主要有多糖类、多酚类、甜菜碱、维生素及多种微量元素，有些含量甚至比枸杞子还要高[2]。同时，LL多糖有降糖降脂的作用[3]，LL提取物有抗氧化和抗DNA损伤的功效[4]。研究表明，5月份采收的LL具有较多的生物活性物质[5-6]，但并未有人研究过不同采收年份对LL中营养物质的影响。本研究比较不同采收年份的LL中的营养成分和生物活性成分，为LL的采收及深加工提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

叶用枸杞专用品种于5月份在宁夏银川收获。收获后，在60 ℃下烘干8 h，置于4 ℃冰箱贮藏，使用时粉碎成粉末后过60目筛。无水乙醇、浓硫酸、石油醚、盐酸、氢氧化钠，北京化工厂;β-胡萝卜素标准品、甜菜碱标准品、牛磺酸标准品，天津市永大化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

真空冷冻干燥机（LL-1500），赛默飞世尔科技有限公司;紫外可见分光光度计（T6新世纪），北京普析通用仪器有限责任公司;台式离心机（TD5A-WS），长沙湘仪离心机有限公司;氨基酸分析仪（S433），赛卡姆（北京）科学仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 基本组分的测定 对不同采收年份的LL的基本组分进行了测定。水分含量的测定采用直接干燥法（GB 5009.3—2010第一法），蛋白质含量的测定采用凯氏定氮法（GB 5009.5—2016第一法），脂质含量的测定采用索氏抽提法（GB 5009.6—2016第一法），灰分的測定采用灼烧法（GB 5009.4—2010），碳水化合物的测定采用差值法[7]。

1.3.2 矿物质的测定 采用火焰原子吸收光谱法对LL中的矿物质进行了测定。测定了钙（GB 5009.92—2016第一法）、铁（GB 5009.90—2016第一法）、锌（GB 5009.14—2017第一法）、钾和钠（GB 5009.91—2017第一法）5种矿物质的含量。

1.3.3 氨基酸组成 准确称取样品5.0 g 于锥形瓶中，按照样品和去离子水比例为1∶10加入去离子水，沸水浴提取1 h，每间隔15 min振摇1次。冷却至室温，过滤，将过滤后的提取液转移至100 mL的容量瓶中，用去离子水洗涤滤渣2次，洗出液与提取液合并后定容至100 mL。取5.0 mL定容后的液体于15 mL离心管中，加入10% 磺基水杨酸溶液5.0 mL，离心15 min（8 000 r/min、4 ℃），取上清液过0.22 μ膜，利用全自动氨基酸分析仪测定氨基酸种类和含量[8]。

1.3.4 维生素的测定 对不同采收年份的LL中的维生素进行了测定。分别测定了硫胺素（维生素B1）（GB/T 5009.84—2003）、核黄素（维生素B2）（GB/T 5009.85—2003第一法）、烟酸（维生素B3）（GB 5009.89—2016第二法）、叶酸（维生素B9）（GB 5009.211—2014）。

1.3.5 生物活性成分的测定 对于生物活性成分，分别测定了β-胡萝卜素、甜菜碱、黄酮和牛磺酸的含量。β-胡萝卜素的含量根据GB 5009.83—2016进行测定。甜菜碱的含量采用薄层扫描法进行测定[9]。黄酮类化合物采用高效液相色谱法（HPLC）进行测定[10]。牛磺酸的含量采用分光光度法测定[11]。

2 结果与分析

2.1 枸杞叶的基本组成

由表1可知，LL中富含蛋白质、碳水化合物及矿物质。随着年份的增长，蛋白质和灰分呈上升趋势，在第四年达到最大值;而碳水化合物和脂质呈下降趋势，在第一年达到最大值。但是总体来说，这些组分并没有明显差异。值得注意的是，LL中的蛋白质含量比常见的油菜、空心菜等绿叶蔬菜要高很多[12]，但是否能被利用还需要进一步验证。

2.2 矿物质含量

由表2可知，LL富含矿物质元素，其中矿物质元素含量的高低顺序为：钠>钾>钙>锌>铁。比较不同年份的LL中的矿物质含量可以看出，四年生的LL中钙含量较高，一年生的LL中锌含量较高，两年生的LL中铁含量较高。由于西北地区海拔高，干旱，日照强烈，使LL富集许多次生代谢产物，以抵御恶劣的外部环境[13]。LL是高钙、富含铁和锌的健康食品，每天食用50 g LL可以满足90.9%、236%、86%、6.1%和31%的钙、铁、锌、钾和钠的需求[14]，这说明LL是一种很好的天然矿物质补充剂。

2.3 氨基酸组成

由表3可知，LL含有18种氨基酸。在一年至四年的范围内，LL中必需氨基酸和总氨基酸含量随年份增长而下降。一年生的LL中必需氨基酸的含量为2.18 g/100 g，而四年生的LL中必需氨基酸含量仅为一年生LL的63%;一年生的LL中总氨基酸的含量高达7.98 g/100 g，四年生的LL中总氨基酸的含量下降至5.23 g/100 g。然而总氨基酸含量仅占蛋白质含量的15%～25%，说明LL中由凯氏定氮法测得的粗蛋白含量中较多为非蛋白氮，能被利用的蛋白质较少。

2.4 B族维生素含量

B族维生素含量高低顺序为：维生素B3>维生素B2>维生素B1>维生素B9。由表4可知，在不同年份的LL中，三年生的LL的维生素B1、B2、B3含量最高，分别可以达到0.25、1.54、49.21 mg/100 g。维生素B1、B2、B3的膳食营养素推荐摄入量（RNI）分别为1.4、1.4、14 mg/d[15]，因此，对于一个体重为60 kg的成年男性来说，食用500 g新鲜LL可以满足维生素B1、B2、B3的RNI的8.9%、55.0%、175.75%。这一结果表明，LL含有充足的维生素B1、B2、B3。一年生的LL中所含叶酸含量最高，达到了37.30 μg/100 g，而四年生的LL中叶酸含量最少，只有14.96 μg/100 g。前人研究表明，宁杞9号枸杞叶芽是B族维生素的良好来源[16]，这与我们的研究结果一致。

2.5 生物活性成分

不同年份的LL中，甜菜碱含量随着生长时间的变化而变化。由表5可知，四年生的LL所含甜菜碱含量最高，达到了981.50 mg/100 g，三年生的LL中甜菜碱含量最少，只有645.42 mg/100 g。两年生的LL所含β-胡萝卜素含量最高，达到了61.05 mg/100 g，其次是三年生的LL含量较高，为50.19 mg/100 g，而一年生的LL中β-胡萝卜素含量较少，只有44.43 mg/100 g。黄酮和牛磺酸在LL中的含量充足。四年生的LL所含牛磺酸含量最高，达到了481.02 mg/100 g，而两年生的LL中牛磺酸含量最少，只有405.32 mg/100 g。值得一提的是，牛磺酸广泛分布于动物组织和细胞中，在植物中较为少见。但LL中牛磺酸含量极为丰富。虽然LL中的牛磺酸远低于牡蛎（3.04 g/100 g）和乌贼（2.94 g/100 g）中的牛磺酸含量[17-18]，但远高于大豆（0.31 mg/100 g）等大多数植物性食品[19]，这对LL的加工利用具有重要意义。一年生至三年生的LL中具有较高的黄酮含量，二年生能够达到最大值1.97 g/100 g。天然植物的叶子是黄酮化合物的重要来源，研究表明，幼叶含有较多的生物活性物质[20]，这与我们的试验结果相符。

3 结论

通过研究不同收获年份的LL的营养成分，发现LL富含营养物质，尤其是蛋白质、矿物质等营养成分以及B族维生素、牛磺酸等生物活性成分，具有极高的营养价值。一年生的LL中钠、钾、氨基酸含量最高，三年生的LL中维生素B1、B2、B3含量最高，四年生的LL中蛋白质、牛磺酸、钙含量最高。这为LL采摘时间提供更精确的数据参考，为实际生产大规模、工业化地开发LL产品提供科学依据。

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