胰岛素休克的实验动物选择研究

王莉

[摘 要]该文探究了几种鱼的胰岛素休克现象。将实验鱼放入不同浓度的胰岛素水溶液中，待出现惊厥时将鱼转至10%萄葡糖溶液中，观察其恢复情况。结果显示，在3IU/mL胰岛素溶液中，出现休克的时间分别为斑马鱼（66.78±6.80）min、麦穗鱼（39.33±8.35）min、中华鳑鲏（50.00±10.21）min;在4IU/mL胰岛素溶液中，出现休克的时间分别为斑马鱼（30.67±6.47）min、麦穗鱼（16.22±5.22）min、中华鳑鲏（15.86±9.70）min。每种实验鱼在3IU/mL和4IU/mL两种胰岛素溶液中出现休克的时间之间均存在极显著差异（P<0.01）。三种鱼都可作为胰岛素休克实验的实验材料。

[关键词]中华鰟鮍;麦穗鱼;斑马鱼;胰岛素休克

[基金项目]2019年度国家级一流本科专业建设点“医学检验技术”项目（教高厅函〔2019〕46号）;2015年度宁夏回族自治区重点建设专业“医学检验技术”项目（宁教高办〔2015〕109号）

[作者简介]王 莉（1978—），女，陕西宝鸡人，医学检验学士，宁夏医科大学临床医学院检验学系实验师，主要从事临床生物化学检验研究。

[中图分类号] R-33[文献标识码] A[文章编号] 1674-9324（2020）33-0145-02[收稿日期] 2020-03-19

胰岛素休克，也称“低血糖惊厥”，是指给小鼠注射胰岛素或者将鱼置入胰岛素水溶液中，造成的动物实验性低血糖，外部表现为惊厥或昏迷[1-3]。对乡村中学而言，用小鼠做实验材料，采购不易且价格较贵。改用斑马鱼、麦穗鱼和中华鳑鲏等，材料易得，价格便宜，简便有趣。

一、材料和仪器

（一）实验动物

三种实验鱼均购于银川市胜利街花鸟鱼宠市场，实验前均作24h的饥饿处理。

斑马鱼，体长（33.1±2.51）mm，体质量（0.284±0.030）g。麦穗鱼，体长（39.4±3.27）mm，体质量（0.495±0.127）g。中华鳑鲏，体长（34.5±1.78）mm，体质量（0.578±0.067）g。实验用水的pH值为7.0～7.5，水温（20±2）℃。

（二）实验药品

胰岛素注射液（400IU/10mL），浙江万邦生化医药股份有限公司产品（批号21510208）。10%萄葡糖溶液，实验时现配。实验用水：自来水煮沸后冷却至室温。

（三）实验仪器用品

1mL注射器、50mL烧杯、500mL烧杯、50mL量筒、小鱼网、电子天平、镊子、电子表、红外温度计、pH试纸和标签纸等。

二、方法

（一）实验设计

准备3个50mL烧杯，分别加入40mL实验用水，然后各自放入5尾鱼。实验组加入一定量胰岛素注射液（400IU/10mL），混匀得到3IU/mL和4IU/mL单位胰岛素溶液，对照组不加。观察鱼在不同单位胰岛素溶液中的行为反应。以丧失平衡能力及游泳能力作为判定标准，记录每条鱼出现休克现象所经历的时间。当鱼出现休克后，将其及时转入10%葡萄糖溶液中急救，观察行为变化，记录苏醒条数，计算死亡率。以上实验均重复三次。

（二）统计分析

试验数据以±s表示，用Excel软件进行处理。采用成组数据平均数比较的t检验，P<0.05，为显著性差异，P<0.01，为极显著差异。对三种鱼在不同单位胰岛素溶液中出现休克的时间之间做方差分析，比较差异显著性。

三、结果与分析

（一）不同单位胰岛素溶液中斑马鱼出现休克的时间

由表1可知，斑马鱼在对照组清水中，不出现休克现象;在3IU/mL胰岛素溶液中，65分钟左右都会出现胰岛素休克现象;在4IU/mL胰岛素溶液中，30分钟左右都会出现胰岛素休克现象。将出现休克的鱼及时转入10%葡萄糖溶液进行急救，大部分恢复正常，有20%左右的斑马鱼死亡。斑马鱼在3IU/mL、4IU/mL胰岛素溶液中的休克时间之间存在极显著性差异（P<0.01）。

（二）不同单位胰岛素溶液中麦穗鱼出现休克的时间

由表2可知，麦穗鱼在对照组清水中，不出现休克现象;在3IU/mL胰岛素溶液中，40分钟左右都会出现胰岛素休克现象;在4IU/mL胰岛素溶液中，15分钟左右都会出现胰岛素休克现象。将出现休克的鱼及时转入10%葡萄糖溶液进行急救，但急救无效，死亡率均为100%。麦穗鱼在3IU/mL、4IU/mL胰岛素溶液中的休克时间之间存在极显著性差异（P<0.01）。

（三）不同单位胰岛素溶液中中华鳑鲏出现休克的时间

由表3可知，中华鳑鲏在对照组清水中，不出现休克现象;在3IU/mL胰岛素溶液中，50分钟左右都会出现胰岛素休克现象;在4IU/mL胰岛素溶液中，15分钟以上都会出现胰岛素休克现象。将出现休克的鱼及时转入10%葡萄糖溶液进行急救，但急救无效，死亡率均为100%。中华鳑鲏在3IU/mL、4IU/mL胰岛素溶液中的休克时间之间存在极显著性差异（P<0.01）。

（四）三种鱼在3IU/mL胰岛素溶液中出现胰岛素休克时间的比较

小写字母不同（a，b）表示两者之间有显著差异（P<0.05）;大写字母不同（A，B）表示两者之间有极显著差异（P<0.01）。

由表4可知，在3IU/mL胰岛素溶液中出現休克时间的差异，斑马鱼与中华鳑鲏、麦穗鱼相比均达极显著水平（P<0.01），而麦穗鱼与中华鳑鲏相比不明显。

（五）三种鱼在4IU/mL胰岛素溶液中出现胰岛素休克时间的比较

小写字母不同（a，b）表示两者之间有显著差异（P<0.05）;大写字母不同（A，B）表示两者之间有极显著差异（P<0.01）。

由表5可知，在4IU/mL胰島素溶液中出现休克时间的差异，斑马鱼与中华鳑鲏、麦穗鱼相比均达极显著水平（P<0.01），而麦穗鱼和中华鳑鲏相比不明显。

四、结论

在胰岛素休克实验中，对斑马鱼、麦穗鱼和中华鳑鲏在3IU/mL、4IU/mL胰岛素溶液中经历一定时间均出现休克现象。在3IU/mL溶液中，麦穗鱼休克耗时接近一节课，斑马鱼和中华鳑鲏均超过一节课;在4IU/mL溶液中，麦穗鱼和中华鳑鲏休克耗时在15min左右，斑马鱼在30min左右。从所需费用来看，麦穗鱼和中华鳑鲏大约是小鼠的10%，斑马鱼大约是小鼠的45%。因此，在胰岛素休克实验动物选择的经济性和现实性上，斑马鱼、麦穗鱼和中华鳑鲏所需远远低于小鼠。

参考文献

[1]韦建恒.胰岛素低血糖休克[J].生物学通报，1992，27（3）：49.

[2]沈旭明.胰岛素惊厥实验材料的选用与实验结果的分析[J].生物学杂志，2000，17（2）：32+8.

[3]苏永春，勾影波.用金鱼或鲫鱼做胰岛素休克实验[J].生物学通报，1995，30（4）：32.

Study on the Selection of Experimental Animals for Insulin Shock

WANG Li

（School of Clinical Medicine， Ningxia Medical University， Yinchuan， Ningxia 750004， China）

Abstract： The objective of this experiment is to explore the phenomenon of insulin shock in several kinds of fish. The experimental fish were put into different concentrations of aqueous insulin solution. When convulsions occurred， the fish were transferred to 10% glucose solution and their recovery was observed. According to the results， in 3 IU/mL insulin solution， the time of insulin shock for zebrafish， pseudorasbora parva and rhodeus sinensis gunther was respectively （66.78±6.80）min， （39.33±8.35）min， and （50.00±10.21）min; in 4 IU/mL insulin solution， the time of insulin shock for the three kinds of fish was respectively （30.67±6.47） min， （16.22±5.22） min， and （15.86±9.70）min. For each of the three kind of experimental fish， there was a very significant difference （P<0.01） in the time of insulin shock when it was put in 3 IU/mL and 4 IU/ mL insulin solution. The three kinds of fish could all be used as experimental animals for insulin shock experiments.

Key words： rhodeus sinensis gunther; pseudorasbora parva; zebrafish; insulin shock