自身免疫性卵巢早衰患者血清TBP2、BMP15的临床意义

冯 念 曹作增

1上海市浦东新区光明中医医院(201399)；2上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院

卵巢早衰(POF)是造成女性不孕的常见疾病之一,有30%的POF患者发病与自身免疫异常有关[1-2]。自身免疫性POF患者常由自身免疫系统失调产生识别卵巢的抗体,与抗原反应损伤卵巢而导致不孕[3]。有研究发现硫氧还蛋白结合蛋白-2(TBP2)敲除的雌性小鼠会出现不孕,并在卵泡形成中高表达,而卵泡发育缺陷是POF致病原因之一[4]。骨形态发生蛋白15(BMP15)在卵巢中特异性表达,关于TBP2、BMP15相关性及在自身免疫性POF表达研究较少[5]。本研究探讨TBP2、BMP15在自身免疫性POF的表达及临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2017年1月－2018年2月本院收治的自身免疫性POF 48例为病例组,同期体检卵巢功能正常女性48例为正常组。纳入标准：①符合《妇产科学》中POF诊断标准[6]；②有自身免疫性疾病；③经两位以上专家联合诊断确诊；④患者签署知情同意书,自愿参与本研究。排除标准：①年龄＞40岁；②原发性闭经；③有子宫或卵巢疾病手术史；④合并恶性肿瘤；⑤先天性双侧子宫发育异常；⑥合并严重心、肝、肾等实质脏器病变；⑦近3个月使用过激素类或免疫抑制类药物；⑧依从性差。本研究经本院伦理委员会审核批准。

1.2 检测方法

所有受试者入院后采集晨空腹静脉血取血清,-80℃保存备用。①TBP2、BMP15：采用酶联免疫吸附法检测血清,试剂盒分别购自上海武昊生物科技有限公司和上海江莱生物科技有限公司,酶标仪由美国BIORAD公司生产。②性激素：采用雅培I2000化学发光分析仪及配套试剂检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 一般资料

病例组年龄(32.5±3.5)岁(21～40岁),初潮年龄(13.8±0.7)岁(11～15岁),病程(2.2±1.4)年(0.5～5年)。正常组年龄(33.6±3.5)岁(23～40岁),初潮年龄(14.0±0.6)岁(12～16岁)。两组比较无差异(P＞0.05)。

2.2 两组血清TBP2、BMP15水平

病例组血清TBP2(0.43±0.09)、BMP15(0.68±0.11)水平均低于正常组(1.24±0.31、1.51±0.35)(P＝0.000)。

2.3 两组血清性激素水平

病例组FSH、LH水平高于正常组,E2水平低于正常组(均P＜0.05),见表1。

表1 两组性激素水平比较()

表1 两组性激素水平比较()

组别 FSH(U/L) LH(U/L) E2(pmol/L)正 常 组(48例) 6.16±3.12 7.54±3.17 135.17±29.86病 例 组(48例)58.92±6.23 37.61±3.96 69.38±11.53 t 52.462 41.070 14.240 P 0.000 0.000 0.000

2.4 病例组TBP2、BMP15与性激素水平相关性

病例组TBP2、BMP15水平与FSH、LH呈负相关性,与E2水平呈正相关性(均P＜0.05),见表2。

表2 POF患者TBP2、BMP15与性激素水平相关性

3 讨论

有研究报道,国外POF发病率为1%,而国内发病率为1%～3.8%且有增高趋势,导致自身免疫性POF发病率也明显升高。自身免疫性POF致病机制较复杂,常伴发其他免疫性疾病,增加治疗难度[7]。目前主要采用免疫治疗、激素替代治疗及卵巢移植等,但治疗效果不明显且有较多副作用[8]。

TBP2是TATA结合蛋白(TBP)家族重要成员,具有促进细胞凋亡、抑制细胞生长及调节氧化应激作用[9]。是卵母细胞成熟及受精过程中不可缺少基因。Gazdag等[10]研究发现雌性小鼠TBP2基因敲除后出现卵泡发育障碍、卵巢萎缩、功能退化及不孕等症状,与POF症状相似。周晓梅等[11]研究发现TBP2在子宫异位患者血清中低表达。本研究病例组血清TBP2水平低于正常组,提示自身免疫性POF患者TBP2低表达可能参与其致病过程。BMP15是转化生长因子β超家族重要成员之一,具有促进卵泡发育、颗粒细胞增殖及卵母细胞生长、成熟和排卵等功能,同时还能调控孕酮产生[12]。崔向荣等[13]研究发现BMP15在多囊卵巢综合征卵泡液中表达降低,并通过调控凋亡基因调节卵丘颗粒细胞凋亡。王鹤瑞等[14]在POF患者血液进行BMP15基因测序研究,发现在其编码区有7个位点发生突变,且编码区rs79377927多态性位点与POF疾病发生发展密切相关。唐华均等[15]研究证实在由环磷酰胺所致大鼠卵巢早衰模型中BMP15和生长分化因子9(GDF9)表达下调,治疗后BMP15表达上调,卵巢功能有所修复。本研究结果显示,病例组血清BMP15表达水平低于正常组,提示自身免疫性POF患者BMP15表达降低,可能参与其疾病发生发展过程。

本文性激素指标检测显示,病例组FSH、LH水平高于正常组,E2水平低于正常组,提示TBP2、BMP15异常表达可能通过引起性激素变化参与了POF疾病进程。Pearson相关性分析显示,自身免疫POF患者TBP2、BMP15表达与FSH、LH呈负相关性,与E2水平呈正相关性,提示TBP2、BMP15异常表达引起性激素水平变化。在正常情况下BMP15能促进颗粒细胞增殖,而颗粒细胞分泌的抑制素可降低FSH水平,当BMP15降低时FSH表达升高,同时LH表达也升高；而BMP15低表达与GDF9相互作用降低了E2水平,E2是由卵巢和胎盘分泌,而TBP2表达降低能引起胎盘萎缩致E2分泌减少。同时TBP2表达降低还能调控机体释放大量炎症细胞及炎症因子加重卵巢功能障碍[16-17]。相关性分析显示,自身免疫性POF患者TBP2与BMP15表达呈正相关性,提示二者可能通过相互协同作用参与了自身免疫性POF疾病发生发展过程。BMP15与GDF9在雌性小鼠中低表达时均出现不孕现象,而TBP2基因敲除雌性小鼠不孕症状与之相似,且TBP2基因缺乏或损伤雌性小鼠中BMP15与GDF9表达均降低[18]。因此我们推测,在自身免疫性POF患者体内TBP2与BMP15通过相互协调作用使其发病,其具体机制还需研究验证。

综上所述,本研究表明,自身免疫性POF患者存在TBP2、BMP15水平降低现象,且与患者性激素水平相关；TBP2与BMP15表达呈正相关性,可能是通过相互协同调控自身免疫POF发病过程。