2018—2019年贵阳市部分规模化猪场主要病毒性腹泻的流行病学调查

袁翠霞，景小金，陈 红，杨 峰，张 海，杨 源，刘 艳，景书灏，徐春志

（1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵州省动物疫病预防控制中心，贵阳 550081）

近年来，随着贵阳市生猪产业的不断发展，生猪频繁调运，疫病变得越来越复杂和多样化，其中腹泻类疫病成为困扰贵阳市生猪养殖业发展的重要因素之一。在引起猪腹泻的各种病因中，病毒性腹泻的危害是最为严重的，主要是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、猪轮状病毒（Porcine rotarvirus,PoRV）、猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV）三大病原所引起。猪群中存在单独感染或混合感染以上肠病毒，感染后的病猪出现水样腹泻、体温降低、脱水、呕吐和水盐代谢紊乱死亡，感染猪没有特效治疗药物，且临床治疗价值不大，所以对养殖业的危害严重，影响人民的正常生活，引起大家的高度关注[1-3]。

为了解2018—2019年贵阳市规模化猪场主要病毒性腹泻疫病的发生和流行趋势，本研究采集7个区（市、县）38个养猪场292份疑似腹泻粪便样品进行病原学的检测，为贵阳市规模化猪场主要病毒性腹泻疫病的预防和控制提供参考。

1 材料

1.1 病料

292份猪腹泻粪便样本，采用5 mL的EP管密封保存备用，来自贵阳市7个区（市、县）38个养猪场。

1.2 试剂

猪流行性腹泻病毒实时荧光RT-PCR试剂盒、猪轮状病毒实时荧光RT-PCR试剂盒、猪传染性胃肠炎病毒实时荧光RT-PCR试剂盒，均购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。

2 方法

将采集的292份猪腹泻粪便样本，分别加入1 mL生理盐水，反复冻融3次后高速离心，取上清液作为备检样本。按照上述3种病毒核酸提取试剂盒操作说明，分别进行PEDV、PoRV、TGEV的病毒核酸提取，并按实时荧光RT-PCR扩增试剂盒操作说明，分别进行体系构建和目的基因扩增，扩增结束后观察扩增曲线和CT值对结果进行判定。

3 结果

对采集的292份猪腹泻粪便样本分别进行PEDV、PoRV、TGEV的病毒核酸提取，实时荧光RT-PCR扩增，结果：PEDV核酸阳性病料129份，阳性率44.2%（129/292），PoRV核酸阳性病料25份，阳性率8.6%（25/292），TGEV核酸阳性病料10份，阳性率3.4%（10/292）。其中PEDV/PoRV混合感染核酸阳性病料9份，阳性率3.1%（9/292）；PEDV/TGEV混合感染核酸阳性病料5份，阳性率1.7%（5/292）；PoRV/TGEV混合感染阳性率为0，3种病原混合感染阳性率为0。总体趋势为感染阳性率：TGEV＜PoRV＜PEDV。结果见表1。

表1 不同地区猪群中病毒性腹泻病毒检测结果

4 分析与讨论

本研究对贵阳市7个地区38个规模化养猪场292份疑似腹泻粪便样品，分别进行流行性腹泻病毒、轮状病毒、传染性胃肠炎病毒的病原学流行病学调查，结果：PEDV核酸检出率为44.2%（129/292），PoRV核酸检出率8.6%（25/292），TGEV核酸检出率3.4%（10/292）。其中PEDV/PoRV混合感染核酸检出率3.1%（9/292）；PEDV/TGEV混合感染核酸检出率1.7%（5/292）；未检出PoRV/TGEV混合感染和3种病原混合感染。说明引起我市规模化猪场腹泻病毒总体趋势：TGEV＜PoRV＜PEDV，且存在 PEDV/PoRV和PEDV/TGEV混合感染情况。

朱子键等[4]对2015—2016年间东北地区的88个疑似猪场的264份病料样品进行病原学检测，结果 PEDV、PoRV、TGEV的阳性率分别是 74.62%、25.76%、6.06%，且存在两两混合感染和三重感染，以PEDV/PoRV双重感染为主。刘霞等[5]对2016—2017年间浙江省32个健康规模养殖场的611份猪粪便样品、16个临床发病猪场50份猪小肠样品进行PEDV、TGEV、PoRV检测，结果健康规模养殖场猪粪便样品中PEDV阳性率为4.09%，PoRV阳性率为6.55%。临床发病猪场猪小肠样品的PEDV、PoRV检出率分别为74.00%、6.00%。薛瑞雪等[6]对2013—2014年山东省226份猪腹泻样本进行PEDV、TGEV、PoRV检测，结果阳性率分别是34.96%、2.21%、28.76%。窦海燕等[7]对2015年黑龙江省67份猪粪便样品进行PEDV、TGEV检测，结果PEDV阳性率为73.2%，TGEV阳性率为28.4%。段群棚等[8]对2016—2019年广西366个规模猪场送检的914份仔猪腹泻病料样品进行PEDV、PoRV、TGEV检测，调查PEDV、PoRV样品平均阳性率分别为59.74%、4.92%，未检测出TGEV。阳酉萍等[9]对四川省9个地区送检的75份仔猪腹泻病料（小肠及粪便）进行PEDV检测，结果阳性率为88.00%。胡兴义等[10]对2013—2015年贵州省5个地州（市）27个规模养猪场203份发病仔猪腹泻粪便样品进行PEDV、TGEV和PoRV检测，结果PEDV阳性率为63.54%，TGEV阳性率为 0.98%，PoRV阳性率为7.88%，PEDV/TGEV混合感染率为 0.99%，PEDV/PoRV混合感染率为10.84%。

由于引起猪腹泻的因素很多，其中既有传染性因素，如病毒、细菌、寄生虫等，又有非传染性因素，如饲养管理、营养因素、应激等。在引起猪腹泻的各种病因中，病毒性腹泻的危害是最为严重的，本研究表明，PEDV、PoRV单纯或混合感染依然是我市猪腹泻的最主要的两大病原，TGEV虽然在本次研究中感染率相对较低，但猪群中依然存在。为此，猪场在防控过程中，既要加强PEDV、PoRV两大病原的防控，同时也要加强TGEV的防控，只有做好综合防控，才能确保猪群健康，养猪业持续发展。