一品红的组织培养技术研究

2020-08-14杨凉花陕西省安康市农业科学研究所院陕西安康725021

特种经济动植物 2020年8期

●杨凉花（陕西省安康市农业科学研究所院陕西安康725021）

一品红为大戟科大戟属常绿或半常绿植物，原产地墨西哥[1]。目前市场上还有一品白、一品粉等品种。由于一品红的花期正值元旦和春节期间，而且开花时苞片甚为鲜艳，很适合节日的气氛，因此在我国市场需求量较大。一品红繁殖大多采用扦插的方法，因材料受限，无法满足广大的市场需求，而通过组织培养获取种苗的方法已逐渐被采用，可进行大批量生产繁殖，进行工厂化育苗。

1 材料与方法

1.1 外植体的选择

选取当地市场上一品红品种‘喜庆红’健壮植株的顶芽或侧芽。

1.2 培养条件

用25℃恒温培养。光照时间为12h/d，光照度为1 600Lx。

培养基灭菌前pH为6.0，蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7g/L。

2 结果与分析

2.1 外植体的消毒

将采集的外植体剪除大叶片，置入烧杯中，用洗衣粉水摇动洗涤30min后再用自来水反复冲洗1h，送入无菌接种间，在超净工作台上先用75%的酒精浸泡20s后立即取出，用无菌水冲洗2～3次，再用0.1%的升汞灭菌5～7min，消毒时要不断搅动，使材料与消毒液充分接触，消毒过程中注意观察外植体颜色的变化，消毒时间过长则外植体表面发黑，死亡率较高，时间过短则消毒不彻底，污染率较高[2]，最后再用无菌水冲洗4～5次，置入铺有无菌滤纸的培养皿中，吸干表面水分，用解剖刀切去基部受损的组织，再切成1cm左右的带芽茎段，备用。

2.2 培养方法

2.2.1 诱导分化增殖培养将经过无菌处理的外植体分别接种到各培养基中，见表1，每瓶接种6～8株。经过16～24d的培养以后，所有培养基中的外植体都开始萌动生长。培养基1中的外植体约24d开始分化，少数产生丛生芽，大部分没有变化；培养基2中的外植体约22d后开始从基部生出比较密的丛生芽，但芽很小，诱导率在30%；在培养基3中，随着NAA含量的提高，一部分诱导出苗，并且开始生根，但是苗较细；在培养基4中，由于外植体的培养时间较前面培养基中的外植体培养时间短，因此诱导率在70%左右，生成的小苗相对健壮；培养基5中的外植体约18d产生愈伤组织，分化率较高，伴有少量不定芽生成；培养基6中的外植体约16d开始分化，诱导分化率最高，达75%，且有白色不定根形成。观察结果表明，增殖率与6-BA和NAA的含量有关，6-BA含量在1.0～2.0的范围内，增殖系数随着含量的增高而增加，但是在生产繁殖上，不能只要求增殖率，还要注重苗的长势[3]。由观察结果可知，培养基诱导分化效果最佳，即MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA是一品红最适宜的初代培养基。

在诱导分化培养基上培养约25d以后，待诱导分化出的小苗长至4～6cm时，从培养瓶中取出，剪成带芽的小段，再分别转接到培养基MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA上继续培养，每瓶接种5～6个，经过35d培养以后，繁殖体逐渐展开伸长，增殖倍数达到5倍以上。每隔40d左右分瓶转接，进行继代增殖培养，从而扩大培养规模，建立快速繁殖体系，见表1。

表1 6种培养基诱导分化效果对比

2.2.2 生根培养将进行继代培养的繁殖体放在增殖培养基中继续培养，大约25d以后，将已经长成的2～3cm高的幼苗分别转接到表2中的生根培养基中进行生根培养，每瓶接种5～7株。培养约10d以后各植株陆续开始生根，将观察结果进行统计得知，在培养基a中生根约需要18d，在培养基b中生根需要15d左右，在培养基c中生根需要12d，在培养基d中10d左右就开始生根。由结果可知，当NAA浓度增加到0.4mg/L时，虽然生根的天数缩短，但是生根数量少而且有须根。结果表明，一品红生根的最佳培养基为1/2MS+0.3mg/LNAA[4-5]。