海藻多糖可溶性粉饲料在增强猪瘟疫苗免疫效果上的临床应用

冯鹤宇 贾妮娜 袁朝原 韦英益 胡庭俊*

（1.广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005；2.广西百色市种猪场，广西百色533000）

海藻在动物营养学领域具有广阔的应用前景，其中富含螯合的微型矿物质，其可用性高于无机矿物质；同时具有益生元活性的复杂碳水化合物，能增强牲畜消化道内益生菌活性，提高传统饲料的利用率，减少传统饲料的使用，增强牲畜生产力[1]，是猪和鸡等畜禽的优良饲料添加剂[2]。研究发现，在动物饲料中添加海藻茎可以改善猪的肠道菌群，提高猪的免疫力[3]。添加2%螺旋藻到饲料中，可以提高雏鸡成活率，增加雏鸡的重量[4]。海藻多糖是从海藻中提取得到的一种植物多糖，其种类丰富，有卡拉胶、甘露聚糖、红藻淀粉、褐藻淀粉、琼胶、木聚糖、硫酸多糖、葡聚糖和海藻纤维等[5]，具有抗病毒、抗肿瘤、抗凝血及增强免疫力等多种功效[6-7]。大量研究表明，多种海藻中的硫酸多糖具有免疫增强活性[8-9]，在前期的研究中，笔者发现海藻多糖可溶性粉配合疫苗免疫能提高仔猪血清IL-2、IFN-γ水平和猪瘟抗体效价，增强猪瘟疫苗免疫效果。为进一步验证海藻多糖可溶性粉实验性临床试验的疗效以及在养猪生产中临床应用的效果及安全性，本试验进行海藻多糖可溶性粉临床应用试验。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 药品及试剂

海藻多糖可溶性粉由广西大学动物科技学院研制、西安雨田农业科技有限公司中试生产，规格：

100 g/袋。

黄芪多糖粉由江西仲襄本草生物有限公司生产，批准文号：兽药字（2014）140765236，生产批号：20140406。规格：100 g。

猪瘟兔化弱毒疫苗：猪瘟兔化弱毒疫苗（细胞源）由北京华都诗华生物制品有限公司生产，生产批号：135242。

猪瘟抗体效价间接血凝检测试剂盒由中国农科院兰州兽医研究所生产，生产批号：2014120905。

1.1.2 试验动物35～45 日龄的临床健康猪，购自广西百色市右江区新丰业猪场。

1.2 试验方法

1.2.1 动物分组及处理

选择35～45日龄的健康猪180头，随机分为3组，每组60 头，分别为猪瘟疫苗+海藻多糖可溶性粉组（临床推荐剂量）、猪瘟疫苗对照组、猪瘟疫苗+黄芪多糖粉对照组。

1.2.2 给药方法与剂量

各组的给药方法与剂量见表1。

表1 试验猪的分组及处理

1.2.3 血样采集

于疫苗接种或首次用药后的14、28 d，每组试验猪随机选择10 头猪进行前腔静脉采血，各采集2 ml，析出血清，-15 ℃保存，用于检测猪瘟免疫抗体效价。

1.2.4 血清猪瘟抗体水平测定

采用试剂盒提供方法进行检测。

1.2.5 饲养条件、用药观察与日常管理

试验在同一栋猪舍进行，猪舍为半敞开式，平养，定时自由采食，自由饮水，饲料为猪场自行配制的不含任何药物的全价料。试验期间仔细观察猪只健康状况及用药前后的临床表现。

1.2.6 数据处理

数据以“Means±SD”表示，用SPSS17.0 软件进行方差分析。显著性用P值表示，其中P＜0.05表示差异显著，P＜0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 临床表现

试验期间发现海藻多糖组仔猪采食欲旺盛，粪便呈浅黄色，较另2 组柔软，且精神状态良好，睡眠正常，皮毛光泽度好。猪瘟疫苗对照组仔猪采食欲一般，第9 d发现有一只仔猪卧地不起，体温降低、发抖、流涎；经肌注青霉素第2 d 好转。黄芪多糖组仔猪精神状态正常，无不良反应。

2.2 猪瘟疫苗抗体水平

本试验以猪瘟抗体滴度≥1∶32时认为合格。由表2 可知，接种猪瘟疫苗第14 d 时，饲喂添加海藻多糖可溶性粉仔猪猪瘟免疫抗体水平与黄芪多糖对照组比较无明显差别，较疫苗对照组有所提高；到28 d时，添加海藻多糖组仔猪猪瘟抗体水平较其他两组有所提高。采食添加海藻多糖组仔猪在接种猪瘟疫苗后其抗体水平高于疫苗对照组。

表2 各组猪猪瘟抗体水平合格数

3 讨论

3.1 海藻多糖对断奶仔猪生长性能的影响

近年来关于植物多糖在临床应用中的试验研究屡有报道，黄芪多糖等已在兽医临床中得到广泛应用。刘祝英[10]研究发现，在日粮中添加复合多糖（由牛膝、杜仲、玄参复合物提取）能显著提高断奶仔猪的日增重，降低料肉比，提高断奶仔猪的免疫功能，并能有效降低仔猪腹泻率。胡仓云等[11]对4 528头仔猪饲喂含黄芪多糖粉的日粮，同时配合使用黄芪多糖注射液可提高仔猪成活率和平均日增重。乔家运等[12]在日粮中添加0.1%芦荟多糖显著提高仔猪平均日增重，降低料重比，改善仔猪生长性能。海藻多糖作为一种天然的植物添加剂安全性很高且对于仔猪的生长具有促进作用。在哺乳期母猪的饲料中添加海藻多糖能够显著增加断奶仔猪平均日增重和降低料肉比并且降低了仔猪的腹泻率[13-14]。杨晋[15]研究发现，海藻多糖可以改善仔猪小肠结构，提高消化酶活性，提高集体免疫力。Wan等[16]从海藻细胞壁中提取的天然阴离子多糖——海藻酸低聚糖可以通过提高断奶仔猪的抗氧化能力、免疫力和肠道发育来促进断奶仔猪的生长。本试验中海藻多糖组的仔猪采食欲旺盛且精神状态及皮毛光泽度皆好于另外两组，也证明了海藻多糖的临床效果良好，对仔猪的生长无不良影响。

3.2 海藻多糖对于免疫功能提升的作用

大量的研究表明，多糖类成分可以提高牲畜的免疫功能，侯喜娥等[17]发现黄芪多糖可以大幅提高仔猪的免疫应答潜力，增强抗病防病的能力。黄芪多糖也被多项研究证明可以作为免疫增效剂，赵立香等[18]通过注射不同剂量的黄芪多糖并测量仔猪体内的抗体水平发现，高剂量黄芪多糖对PRRS 灭活疫苗具有免疫增强作用；刘瑞生[19]研究表明黄芪多糖能够加强疫苗的抗原免疫原性，提高抗体水平和作用时效。方磊涵等[20]证明了中草药复方多糖（由黄芪、党参、山楂、丹参等12 味中草药组成）不仅在一定程度上改善仔鸡的肠道内环境，还能够显著提高鸡血清新城疫抗体效价；其他多种植物多糖[21-24]也被证明能有效增强动物接种疫苗后的抗体效价。海藻多糖作为一种来源广泛的海洋天然活性多糖，已被证明能够通过对机体巨噬细胞免疫应答机制的调控达到免疫调节的效果[25]。Bi 等[26]从褐藻中提取的硫酸化多糖可以激活NF-κB和MAPK 信号通路，提高RAW264.7 巨噬细胞的免疫力；Leonard等[13]在母猪饲料中加入海藻多糖后检测到血液中白细胞的数目显著提升，这证明了海藻多糖对于动物机体的免疫作用。但是海藻多糖可溶性粉作为免疫增效剂，对仔猪的大规模临床应用试验目前还鲜见报道。

本试验结果显示，群体猪在饲喂含海藻多糖可溶性粉日粮后无不良反应，且其采食欲比基础日粮组和黄芪多糖组好。日粮中添加海藻多糖的仔猪在接种猪瘟疫苗后其抗体水平高于基础日粮组和黄芪多糖组。猪瘟疫苗抗体效价测定结果表明：与单用疫苗组、黄芪多糖配合疫苗组比较，海藻多糖可溶性粉能提高猪瘟疫苗免疫的抗体效价，且安全性好。

4 小结

临床应用试验表明，海藻多糖可溶性粉能提高猪瘟疫苗免疫的抗体效价，且安全性好。