血清载脂蛋白E水平与颈动脉粥样硬化斑块的关系研究*

宋 扬，范雪松，王恩世，孙 奇，贺建勋，张 蕾，赵 松，崔 颖，袁 慧△

1.首都医科大学附属北京安贞医院/北京市心肺血管疾病研究所检验科，北京 100029；2.中国医学科学院阜外医院成人心脏外科中心，北京 100037；3.北京市第一社会福利院/北京市老年病医院检验科，北京 100011

动脉粥样硬化可导致心脑血管疾病，是严重危害人类健康的病理基础。而载脂蛋白E(ApoE)是血液中参与机体脂质代谢及调节胆固醇平衡的主要载脂蛋白之一，其基因多态性与多种疾病相关。ApoE在动脉粥样硬化的病理过程中具有抗动脉粥样硬化的作用，ApoE通过促进外周细胞胆固醇的流出及清除血浆胆固醇脂蛋白，并通过减少低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的形成，达到抑制泡沫细胞形成从而抗动脉粥样硬化[1]。本文通过研究颈动脉粥样硬化斑块患者血清中ApoE水平，旨在分析脂类代谢与颈动脉粥样硬化的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2019年2—5月在首都医科大学附属北京安贞医院体检中心行颈动脉超声的体检者300例为研究对象。研究对象中男177例，女123例；年龄30～86岁，平均(57.42±13.06)岁；男女比例为1.44∶1。所收集的人群中对照组118例，对照组的颈动脉超声结果为双侧颈动脉正常，并排除心脑血管疾病；颈动脉内膜中层厚度(IMT)异常组182例。所有研究对象均排除严重肝肾功能不全、脑卒中、心脏病、肺动脉高压、肿瘤、严重感染等。所有研究对象均自述未服用过任何降脂药物。本研究检查前所有研究对象签署知情同意书。

1.2仪器与试剂 美国贝克曼库尔特AU5400全自动生化分析仪检测血脂指标。主要血脂检测指标包括三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和ApoE，试剂购自日本积水医疗株式会社。采用国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)推荐的酶法检测TG水平。采用第3代均相法检测LDL-C水平，当标本测定值超过上限时，将标本用9 g/L氯化钠溶液作1+1稀释重新检测，结果乘以2。采用第3代均相法检测HDL-C水平，当标本测定值超过上限时，将标本用9 g/L氯化钠溶液作1+2稀释重新检测，结果乘以3。采用免疫透射比浊法检测ApoE水平。均采用日本积水医疗株式会社提供的配套校准品及质控品，严格按照试剂说明书制订测定参数。

1.3方法 受试者均于前一日空腹12 h以上，次日清晨VACUETTE®真空采血管采集肘静脉血5 mL，室温静置30 min，4 ℃ 3 000×g离心10 min分离血清，送检验科直接检测TG、LDL-C和HDL-C水平。同时吸取500 μL血清于EP管中，冻存至-80 ℃保存，统一进行ApoE水平检测。颈动脉超声检查仪器为日本东芝Aplion-500超声诊断仪(探头频率4～11 MHz)，均为同一位超声体检医生操作，根据《血管超声检查指南》对颈动脉粥样硬化斑块进行评价，如果IMT异常组中有局限性回声结构突出管腔情况存在(回声结构可不均匀或伴声影)，则进一步分亚组：IMT 1.0～<1.5 mm者纳入IMT增厚组(65例)，IMT≥1.5 mm者纳入颈动脉粥样硬化斑块组(117例)。

2 结 果

2.1IMT异常组与对照组临床资料比较 IMT异常组与对照组的性别构成、体质量指数(BMI)`和既往史(吸烟、饮酒、运动、高血压和冠心病患病率)比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。IMT异常组的年龄和糖尿病患病率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2IMT异常组与对照组血脂水平比较 IMT异常组与对照组的TG和HDL-C水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。IMT异常组的LDL-C水平高于对照组，IMT异常组的ApoE水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3颈动脉粥样硬化斑块组、IMT增厚组与对照组临床资料比较 颈动脉粥样硬化斑块组、IMT增厚组与对照组的性别构成、BMI和既往史(吸烟、饮酒、运动、高血压和冠心病患病率)比较，3组间差异均无统计学意义(P>0.05)。颈动脉粥样硬化斑块组和IMT增厚组的年龄高于对照组(P<0.01)，颈动脉粥样硬化斑块组与IMT增厚组的年龄差异无统计学意义(P>0.05)。IMT增厚组的糖尿病患病率高于颈动脉粥样硬化斑块组和对照组(P<0.01)，颈动脉粥样硬化斑块组与对照组糖尿病患病率差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 IMT异常组及其各亚组与对照组临床资料比较

2.4颈动脉粥样硬化斑块组、IMT增厚组与对照组血脂水平比较 颈动脉粥样硬化斑块组、IMT增厚组与对照组的TG、HDL-C和LDL-C水平比较，3组间差异均无统计学意义(P>0.05)。颈动脉粥样硬化斑块组ApoE水平低于IMT增厚组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，IMT增厚组和对照组ApoE水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 IMT异常组及其各亚组与对照组血脂水平比较

3 讨 论

ApoE在多种脂蛋白颗粒中均存在，最先在健康者VLDL-C中发现，主要作用是参与脂类代谢、神经元的修复、再生和免疫反应，所以，ApoE的异常往往伴随着脂代谢的异常[2]。LDL-C作为传统的致动脉粥样硬化危险因素，有着不可替代的临床应用价值。但在临床上许多患者尽管LDL-C在正常范围但仍发生急性心脑血管事件，还有许多患者尽管应用他汀类药物使LDL-C降到正常范围仍发病，说明非传统血脂指标提示LDL-C以外的危险因素及血脂残留风险有着重要的临床意义。

本研究发现，ApoE的水平在颈动脉粥样硬化斑块组低于IMT增厚组和对照组，而LDL-C水平仅在IMT异常组和对照组之间有差异，在颈动脉粥样硬化斑块组、IMT增厚组与对照组3组间差异无统计学意义，提示ApoE水平随着斑块严重程度发展可进一步识别出颈动脉粥样硬化斑块，从另一个侧面反映ApoE在不同的疾病分层中具有不同的水平。年龄在颈动脉粥样硬化斑块组和IMT增厚组高于对照组，颈动脉粥样硬化斑块组和IMT增厚组的年龄差异无统计学意义。IMT增厚组的糖尿病患病率高于颈动脉粥样硬化斑块组和对照组，而颈动脉粥样硬化斑块组与对照组的糖尿病患病率差异无统计学意义，提示在颈动脉粥样硬化斑块组中ApoE水平低不是由年龄和糖尿病导致的。

ApoE参与到脂质运输及代谢过程的方式是依靠其所携带的脂质结合域，结合极低密度脂蛋白和高密度脂蛋白来运输胆固醇和TG，从而参与细胞对脂蛋白的吸收。越来越多的研究发现，ApoE可以影响血脂水平，而脂质代谢紊乱是动脉粥样硬化众多发病因素中非常重要的环节。动脉粥样硬化斑块中胆固醇主要由血浆脂蛋白构成，而ApoE又是构成血浆脂蛋白的重要成分，ApoE在脂质代谢中可作为高脂血症与动脉粥样硬化发生、发展的重要分子靶标[3-5]。此外，有研究显示，ApoE具有非常明显的基因遗传多态性，ApoE可通过多态性蛋白形式参与脂蛋白的转化与代谢过程，ApoE与脂代谢紊乱、冠心病和动脉粥样硬化的发生、发展密切相关[6-7]。ApoE的其他作用还包括：ApoE能调控血浆中脂蛋白的清除与脂蛋白的氧化，从而增加外周细胞胆固醇的流出，达到维持血浆胆固醇总体内稳态的作用；ApoE可抑制血小板衍生生长因子诱导的血管平滑肌细胞的迁移、增殖活动；ApoE可以调节血小板功能，通过激活一氧化氮合酶，促使血小板产生足够的一氧化氮达到抑制血小板聚集的作用；ApoE亦可通过减少T淋巴细胞活化，达到抑制白细胞介素-2的产生及淋巴细胞增殖的作用[8-9]。本研究结果也进一步支持ApoE可参与到动脉粥样硬化发生、发展过程中。

本研究的不足之处：(1)未能通过大样本数据获取资料；(2)本研究为横断面研究，无法确定ApoE与颈动脉粥样硬化斑块发生之间的因果关系。因此，若要进一步确定ApoE在颈动脉粥样硬化斑块中的临床应用价值,需要更深入的研究。